Smad2蛋白在正常宫颈宫颈上皮内瘤变与宫颈浸润癌中表达及意义.docVIP

Smad2蛋白在正常宫颈宫颈上皮内瘤变与宫颈浸润癌中表达及意义 　　[摘要] 目的 研究Smad2蛋白在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变与宫颈浸润癌中的表达，及与临床病理学特征的关系。 方法 选择宫颈上皮瘤变组织样本67例（CIN组），宫颈浸润癌组织样本53例（ICC组），正常宫颈组织样本30例（NCE组），采用免疫组化SP法检测各组织中Smad2蛋白的表达。 结果 正常宫颈、宫颈上皮内瘤变与宫颈浸润癌组织中Smad2阳性率、染色程度得分、阳性细胞占比得分及表达强度比较，差异均有统计学意义（P0.01）。CIN1级、CIN2级、CIN3级Smad2阳性率和表达强度得分比较，差异有统计学意义（P0.01），表达强度得分与宫颈上皮内瘤变分级呈负相关（P0.05）。Smad2在宫颈浸润癌组阳性表达与病理分级有关（P0.05）。 结论 Smad2蛋白在宫颈浸润癌组织中的表达低于正常宫颈组织和宫颈上皮内瘤变组织，Smad2蛋白与宫颈上皮内瘤变病变程度有关，且与宫颈浸润癌恶性程度有关。Smad2蛋白低表达可能在宫颈癌前病变进展及宫颈癌发生发展中起重要作用。 　　[关键词] 宫颈癌；浸润癌；宫颈上皮内瘤变；Smad2 　　[中图分类号] R713.44 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）29-0069-03 　　宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤，我国发病率呈逐年增长趋势，并向年轻化发展，病死率高。宫颈上皮内瘤变属宫颈良性病变，被认为是宫颈原位癌前病变，随着病变程度进展将可能发展为宫颈原位癌，是早期宫颈癌筛查的高危人群。Smads蛋白家族是TGF-β唯一作用底物，其中Smad2蛋白是一种潜在的抑癌基因[1]。本研究通过对正常宫颈、宫颈上皮内瘤变与宫颈浸润癌组织中Smads2蛋白的表达，探讨Smads2蛋白在宫颈癌发生、发展中的作用。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料来源 　　选择2010年2月～2012年12月在嘉兴市妇幼保健院行手术或病理活检的150例患者宫颈组织样本，其中宫颈上皮瘤变组织样本67例（CIN组），宫颈浸润癌组织样本53例（ICC组），正常宫颈组织样本30例（NCE组），均经病理学诊断证实。年龄28～69岁，平均（49.38±10.84）岁。CIN1级23例，CIN2级28例，CIN3级16例。宫颈浸润癌组织学类型：鳞癌22例，腺癌31例；按国际抗癌协会（UICC）TNM标准临床分期：Ⅰ期14例，Ⅱ期20例，Ⅲ期19例；病理分级：Ⅰ级15例，Ⅱ级19例，Ⅲ级19例；淋巴结转移21例，无淋巴结转移32例。 　　1.2试剂与仪器 　　兔抗人Smad2单克隆抗体购自通派（上海）生物科技有限公司，DAB显色剂、即用型快捷免疫组化检测试剂盒均购自福州迈新生物技术开发有限公司。 　　1.3免疫组化检测 　　所有样本石蜡包埋以4 μm厚度连续切片，常规进行二甲苯脱蜡、梯度酒精脱水、H2O2灭活内源性过氧化物酶，高温水浴修复抗原，采用即用型快捷免疫组化检测试剂盒以免疫组化SP法检测样本Smad2水平，按试剂盒说明书进行，以PBS替代一抗作为阴性对照，DAB显色、苏木精复染、脱水、透明、封片。 　　1.4 结果判定[2] 　　细胞质或细胞核染色呈黄色或棕黄色颗粒为阳性，根据染色程度和阳性细胞占比评价染色结果：无染色为0分、淡黄色为1分、棕色2分、深棕色为3分；在高倍光镜下随机选择5个视野计数500个细胞，计算阳性细胞占比，50%计3分。表达强度以两项得分之和表示： 0～1分为阴性（﹣），2～4分为阳性（+），5～7分为中度阳性（++），7分为强阳性（+++）。 　　1.5 统计学处理 　　采用SPSS18.0统计学软件进行数据分析，计数资料用百分比表示，采用Chi-Square检验，计量资料采用（均数±标准差）表示，采用ANOVA，两两比较采用SNK-q检验，等级相关性采用Spearman相关系数分析，P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 Smad2在宫颈组织中的染色 　　Smad2染色定主要位于细胞质，少量位于细胞核，宫颈上皮内瘤变和宫颈浸润癌组织中染色程度较正常宫颈组织浅，呈黄色，宫颈浸润癌组织中染色程度较CIN组织浅，呈淡黄色或无染色。正常宫颈、宫颈上皮内瘤变与宫颈浸润癌组织中Smad2阳性率、染色程度得分、阳性细胞占比得分及表达强度比较，差异均有统计学意义（P0.01），见表1。 　　2.2 Smad2在宫颈上皮内瘤变组织中的表达 　　CIN1级、CIN2级、CIN3级Smad2阳性率和表达强度得分比较，差异有统计学意义（P0.01），表达强度得分与宫颈上皮内瘤变分级呈负相关（r=0.392，P0.05），见表2。 　　2.3 Smad2在宫颈浸润癌组