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β羟丁酸检测方法及临床应用研究 　　中图分类号：R446.6 　　文献标识码： A 　　文章编号： 1672-3783(2008)-9-0110-02? 　　【摘 要】 传统检查酮体均是检查尿酮体的含量，但尿酮体以乙酰乙酸为主。而酮体的主要成分为β-羟丁酸（约占酮体总量的78%[1]），所以检测β-羟丁酸才是监测酮症酸中毒最敏感的指标。β-羟丁酸在酮体中最稳定，采用目前先进的酶联反应方法，结果准确可靠。β-羟丁酸检测在糖尿病酮症酸中毒诊断、治疗中有重要意义，对糖尿病的早期诊断也有重要意义。它还做为糖尿病昏迷的诊断及鉴别诊断指标，用作肝移植后肝能量代谢的指标。在代谢性酸中毒过程中，除检查电解质之外，还应检查β-羟丁酸的含量。? 　　【关键词】β-羟丁酸 酮症酸中毒 临床应用 文献综述 　　 　　β-羟丁酸（β-Hydroxybutyric acid，β-HB）分子式：CH?3CHOHCH?2(COOH)，结构式： ，也叫D-3羟丁酸（D3-H）。它是酮体的主要成分，约占78%[1]，是脂肪酸在肝脏进行正常分解代谢所生成的特殊中间产物。 正常人血液中β-羟丁酸含量极少，这是人体利用脂肪氧化供能的正常现象。但在某些生理情况(饥饿、禁食)或病理情况下(如糖尿病)，糖的来源或氧化供能障碍，脂动员增强，脂肪酸就成了人体的主要供能物质。脂肪酸分解代谢产生酮体（β-羟丁酸含量最多，约占78%，乙酰乙酸约占20%，丙酮约占2%[2]）的量超过肝外组织利用的能力，二者之间失去平衡，血中β-羟丁酸浓度就会过高，导致酮血症(acetonemia)和酮尿症(acetonuria)。乙酰乙酸和β-羟丁酸都是酸性物质，因此酮体在体内大量堆积还会引起代谢性酸中毒。? 　　国外报道正常β-羟丁酸水平为1.0 mmoL／L为高酮血症，3.0mmoL／L为酮症酸中毒[3] 。我国血β-羟丁酸正常水平还有待进一步研究，各个文献报道不一。? 　　 　　1 β-羟丁酸的检测方法? 　　 　　传统检测酮体的方法是在碱性条件下，尿中的乙酰乙酸、丙酮与亚硝基铁氰化钠反应，生成紫红色的复合物。这种测试方法对乙酰乙酸的敏感度为5~10mg/dl，对丙酮的敏感度为40~70mg/dl，并且不与β-羟丁酸反应。而β-羟丁酸在酮体中所占比例最大，可以代表酮体的含量。所以美国糖尿病协会认为，现有的尿酮体检测对酮症酸中毒的诊断或监测治疗不可靠，血β-羟丁酸的定量检测是取代尿酮体检测的一个可靠有用的方法[4]，它对病情的准确判断及疗效观察起重要作用。? 　　1962年以前，检测β-羟丁酸的方法是将β-羟丁酸氧化成丙酮，再用滴定法、比重法、比色法测定所生成的丙酮，这是半定量的结果，而且丙酮生成量在很大程度上受实验条件的影响，用气相色谱(GC)法定量分析丙酮也仅能测定血清总酮浓度，无特异性[5]。? 　　现在武汉来福赛斯生物科技有限公司有β羟丁酸检测的酶联免疫法（ELISA法）试剂盒，但这种方法只能定性或半定量。目前大量应用的是酶偶联法检测血清β-羟丁酸，如宁波亚太生物技术有限责任公司生产的β羟丁酸检测试剂盒，原理是在β-羟丁酸在β-羟丁酸脱氢酶及NAD+的特异性氧化下，生成乙酰乙酸和NADH，NADH和氧化性的INT在黄递酶作用下，生成还原性的INT和NAD+，NAD+ 再和β-羟丁酸在β-羟丁酸脱氢酶作用下生成乙酰乙酸和NADH，如此循环往复，检测生成的还原性INT，在505nm波长（470~560nm范围内）测定吸光率的变化。标本中β-羟丁酸含量与吸光率变化成正比，求得β-羟丁酸的值。该方法灵敏度高、特异性强、线性范围宽（0~4.0mmol/L）、准确度高（回收率98%），重复性好（cv%=2.3）,不受乙酰乙酸、抗坏血酸、甘油三脂（600mg/dl）干扰等特点，适合在全/半自动生化仪上应用。? 　　 　　2 β-羟丁酸测定的临床应用? 　　 　　2.1 β-羟丁酸检测在糖尿病酮症酸中毒的诊断、治疗中的重要意义 糖尿病酮症酸中毒是糖尿病最常见的严重急性并发症，是糖尿病患者的主要死亡原因。为了及时、准确判断病情，非常需要一个高灵敏度且特异性强的指标，β-羟丁酸的测定满足了上述要求。检测β-羟丁酸可反映体内酮体的情况和酸中毒的真实情况[6]。当HbAlc8.9% ，FBG 14.4mmol／L时，虽尿酮体阴性，有必要同时监测血β-羟丁酸，及时发现血酮体增高。对于无尿或仅尿β-羟丁酸增高尿试纸不能测出酮体者，更有必要检测血β-羟丁酸，以利及时诊断，早期控制酮症酸中毒，阻止代谢紊乱恶化[7]。? 　　糖尿病酮症酸中毒好发于1型糖尿病，也可发生于2型糖尿病。2型糖尿病病人由于体内分泌一定量胰岛素，不易发生酮症酸中毒，但随着2型糖尿病发病总数的迅速增长，病人群体