中国药典二氧化硫测定法应用于白芍药材检测探讨.docVIP

中国药典二氧化硫测定法应用于白芍药材检测探讨 　　[摘要] 为了探讨2010年版《中国药典》第一增补本附录二氧化硫（SO2）残留量测定法应用于白芍药材检测的可靠性，采用药典方法测定白芍药材中SO2残留量，考察方法的重复性;采用HPLC测定白芍残渣和蒸馏液中芍药苷亚硫酸酯的含量，考察芍药苷亚硫酸酯被盐酸置换转化释放SO2的情况。研究发现药典方法检测白芍药材SO2残留量时，结果重复性差;SO2残留检测达“终点”时，药材残渣和蒸馏液中均检测到芍药苷亚硫酸酯，说明芍药苷亚硫酸酯没有完全被盐酸置换成亚硫酸释放SO2。药典方法不能准确检测白芍药材SO2残留量，有必要进行修订或建立新的高选择性检测方法。 　　[关键词] 二氧化硫残留;白芍;HPLC;芍药苷亚硫酸酯 　　[收稿日期] 2014-07-25 　　[基金项目] 国家中医药管理局行业专项（201307008-2）;国家高技术研究发展计划（863）项目（2014AA022204）;中国中医科学院江苏分院课题（JSBN1301） 　　[通信作者] *李松林，研究员，硕士生导师，主要从事中药药效物质基础、质量控制和新产品研发，Tel：（025E-mail：songlinli64@126.com 　　[作者简介] 刘欢欢，硕士研究生，Tel：E-mail：huanhuanliuyc@126.com 　　硫熏法是部分中药材传统加工养护方法之一，具有防虫、防霉、杀菌和美化药材外观的作用[1]。因经济、方便，在民间被广泛应用，近年来甚至被滥用[2]。研究表明不合理的硫熏处理可导致药材活性成分发生转化[3-4]，SO2（亚硫酸盐）残留量过高，不但影响药材质量，而且存在安全隐患[5-7]。为了监控药材硫熏情况，2010年版《中国药典》附录收载了中药材及饮片中SO2残留量测定方法[8]，并在第一增补本对方法进行修订[9]。其基本原理是将样品在充满氮气的环境中经盐酸酸化，使残留亚硫酸盐被置换生成亚硫酸，亚硫酸再经加热水解生成SO2，产生的SO2通过氮气流直接带入吸收液中，再运用碘和亚硫酸氧化还原反应进行滴定[8-9]。在2010年版《中国药典》第二增补本中又收载了中药材及饮片中SO2残留限量标准，规定山药、牛膝、粉葛、天冬、天麻、天花粉、白及、白芍、白术和党参等10种中药材及其饮片SO2残留量不得超过400 mg?kg-1，其他中药材及饮片则不得超过150 mg?kg-1[10]。 　　白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall的干燥根，为常用中药材，在储存过程中容易发生色变和虫蛀等现象，通常采用硫熏法进行加工处理[11]。但研究发现硫熏后白芍中主要活性成分芍药苷会明显降低，同时生成新的化合物芍药苷亚硫酸酯[12-14]。尽管初步研究证明芍药苷亚硫酸酯无明显毒性[15]，但其活性和体内药代动力学行为均与芍药苷有明显差异[16-17]。本课题组按照《中国药典》2010年版第一增补本附录IXU项下的蒸馏法检测白芍药材中的SO2含量[9]，发现实验结果重复性差。因此本文拟通过考察药典方法测定白芍中SO2残留结果的重复性，应用HPLC测定药材残渣和蒸馏液中芍药苷亚硫酸酯的含量，探讨药典方法测定白芍中SO2残留量的可靠性，为药典方法的修订提供科学依据。 　　1 材料 　　Waters高效液相色谱仪（Alliance2695四元泵、自动进样系统、柱温箱、Empower 色谱工作站、Waters2996二极管阵列检测器）;Millipore Milli-Q 超纯水制备仪（美国）;METTLER 1/1万和1/100万电子天平（瑞士）;KQ-250E型医用超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）;1 000 mL可调温电热套（南通市通州申通电热器厂）;78-1型磁力加热搅拌器（江苏省金坛市荣华仪器制造有限公司）;二氧化硫残留测定装置（泰康医疗）;氮气（纯度≥99.999%，南京天泽气体有限责任公司）。 　　白芍样品（JSPACM-K-1-27， JSPACM-K-1-17，JSPACM-K-1-15）购自亳州康美药材交易中心，芍药苷亚硫酸酯（paeoniflorin sulfonate）对照品 （实验室自制，结构经NMR和MS确证，纯度经HPLC分析≥98%）。硫代硫酸钠滴定液、碘滴定液（0.01 mol?L-1，按2010年版《中国药典》第一增补版附录XV F 方法配制）[9];淀粉指示液（按2010年版《中国药典》二部附录XV E方法配制）[18];水为超纯水;乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。 　　2 方法 　　2.1 二氧化硫残留量测定 　　按照《中国药典》2010年版第一增补版附录IXU中规定用蒸馏法测定药材或饮