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不同环境因素对砖红壤解磷菌解磷能力的影响 　　摘#8195;要#8195;通过改变培养基中各种微量元素的比例和改变溶液pH值，找出对南方砖红壤解磷菌解磷能力影响最大的环境因素，为今后的解磷菌剂开发提供依据。从实验结果来看：接种了解磷菌的培养基中，有效磷与生物磷总量大幅度提升。其中：①pH值对南方砖红壤解磷菌解磷能力的影响呈现抛物线形，在pH值为7时，南方砖红壤解磷菌解磷能力达到最大，与其他pH值下解磷水平差异显著。当pH值在5～7时，最适合解磷菌的生长。②金属离子中，缺少Fe2+、Mn2+、Mg2+均对南方砖红壤解磷菌解磷能力有较大的影响。③作物不同生长期和种植不同作物对南方砖红壤解磷菌的生长有较大影响。 　　关键词#8195;砖红壤；解磷菌；pH值；解磷能力；金属离子 　　中图分类号：S154.3#8195;文献标志码：A#8195;文章编号：1673-890X（2014）03-124-5 　　多年来，国内外许多的土壤工作者在研究磷肥的施用过程中发现：土壤中的多种金属离子（Fe、Mn、Al等）对施入的磷肥有强烈的固定作用，使磷肥的利用率大大降低[1]。而自前苏联研究人员蒙金娜1935年从土壤中分离出解磷巨大芽孢杆菌并发现该菌对土壤难溶态磷酸盐有一定的解磷效果后，国内外相继开始了对解磷菌的研究[2]。目前对解磷菌解磷机制还不完全了解，赵小蓉等的研究结果表明：微生物在生长繁殖时，不仅分解难溶性的磷化合物，而且利用一部分分解的磷组建其细胞成分，有些细菌能够在细胞中储藏磷酸盐，如果将这一部分磷排除在外，会低估解磷菌的解磷能力，有时甚至会导致错误的结论，所以微生物量磷也应是微生物分解的磷的一部分[3]。本实验是于2010年9-12月进行。是对南方砖红壤菜地土中的解磷菌解磷能力进行研究。通过分离、纯化和培养，以磷矿粉为唯一磷源，并在培养过程中提供不同解磷菌生长环境（主要是pH值、金属离子的影响因素），观察外界环境变化对解磷菌解磷能力的影响。在实验中寻求一种更适合解磷菌发挥解磷能力的因素，为今后在实际生产提供一定的理论依据。 　　1#8195;材料与方法 　　1.1#8195;采样及菌种分离 　　本实验的原始菌种取自广东海洋大学主校区西区土壤菌落，并根据细菌鉴定手册以及前人分离土壤解磷菌的实验现象对分离的菌株进行鉴定。通过培养基分析实验发现游离态磷减少可以断定所分离的菌株为我们所需的解磷菌株。然后通过分离、纯化等一系列工作，最终分离出一株无机解磷菌株。本次实验对象生存的环境的土壤类型属于玄武岩砖红壤，所取土壤为油菜苗（7～8叶）根际土，用无菌袋装回实验室。在实验室用抖根法将土壤从根际抖落，混匀，采用四分法弃土，称取根际土15.000 g于锥形瓶中（余土用无菌袋装后于4.0 ℃冰箱保存），加蒸馏水50 ml振荡30 min，静置15 min；吸取上清液10 ml于试管中，并稀释至100 ml。采用划线法接种于分离培养基。并放在恒温培养箱（27.5 ℃）中静置培养6 d。挑取有明显透明圈的菌株，将其分离，进行第1次纯化，并放在恒温培养箱（27.5 ℃）中静置培养6 d，并保存纯化后的 　　菌种。 　　1.2#8195;培养基 　　1.2.1#8195;分离培养基 　　葡萄糖：10.000 g，（NH4）2SO4：0.500 g，磷矿粉：10.000 g，MnSO4 ：0.030 g，NaCl：0.300 g，KCl：0.300 g，MgSO4：0.300 g，FeSO4。7H2O：0.030 g，琼脂：18.000 g，蒸馏水：1000 ml，pH：6.5～7.0。 　　1.2.2#8195;蒙金娜无机液体培养基（即实验主培养基 　　母液） 　　葡萄糖：10.000 g，（NH4）2SO4：0.500 g，磷矿粉：10.000 g，NaCl：0.300 g，KCl：0.300 g，酵母膏：0.400 g，蒸馏水：1000 ml 。 　　1.2.2.1#8195;测定金属离子影响的培养基 　　在发酵培养基中分别加入MnSO4#8226;4H2O ：0.030 g，MgSO4。7H2O： 0.030 g，FeSO4#8226;7H2O：0.030 g，和其中任意两种的组合，以及全部加入MnSO4#8226;4H2O，MgSO4#8226;7H2O：0.030 g，FeSO4#8226;7H2O：0.030 g，共7个处理。 　　1.2.2.2#8195;测定pH值影响的培养基 　　在发酵培养基中，将培养基以1mol/l的HCL或1mol/l的NaOH溶液调pH值至不同需求值。 　　1.3#8195;解磷菌的培养 　　将已纯化的解磷菌接种到配置好的液体培养基中，在恒温培养箱（27.5 ℃）中振荡培养5 d。