不同地黄品种叶片中活性氧和抗氧化物质差异研究.docVIP

不同地黄品种叶片中活性氧和抗氧化物质的差异研究 　　摘要：以河南省焦作市武陟县主栽的地黄品种“金九”和航天搭载诱变后选育出的“HT-102”为材料进行大田试验，研究不同地黄品种叶片中活性氧和抗氧化物质的差异性。结果表明：相同生长期中，HT-102叶片中的活性氧（ROS）水平、抗氧化物质含量及SOD、POD抗氧化酶活性都显著高于金九，差异达显著水平（P0.05）；205 d时2个品种叶片中的ROS水平、抗氧化物质含量及抗氧化酶活性都显著高于155 d的样品，差异达显著水平（P0.05）；同一地黄品种叶片中ROS水平和抗氧化物质含量及抗氧化酶活性呈显著正相关。在205 d时，HT-102叶片干枯现象较金九严重。研究表明ROS水平、抗氧化物质含量及抗氧化酶活性高低可作为地黄栽培品种的特征之一，能作为地黄种质资源评价的一个指标，对于地黄品种的鉴定具有一定的应用价值。 　　关键词：地黄；活性氧；抗氧化物质；抗氧化酶；脯氨酸 　　中图分类号： S567.23+9.01文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）06-0377-04 　　收稿日期：2016-01-07 　　基金项目：河南省科技发展计划 （编号：132300410355）。 　　作者简介：李玉华（1980―），女，河南濮阳人，博士，讲师，主要从事植物生理生态和分子生物学方面的研究。E-mail：2010liyuhua@163.com。地黄[Rehmannia glutinosa（Gaertn.）Libosch.]，玄参科地黄属多年生草本植物，可全草入药，但主要以块根入药，是我国一种大宗常用中药材。地黄的主要化学成分有环烯醚萜及其苷类、有机酸类、糖类和氨基酸等，地黄及其提取物具有调节免疫系统、降血糖、抗衰老、抗肿瘤功效，而且对造血系统、心血管系统、内分泌系统、中枢神经系统都具有一定的生理药理活性[1]，而上述生理、药理活性均与地黄的抗氧化物质密切相关，所以抗氧化物质活性的测定对中药材地黄的质量评价有一定的指导意义。 　　许多研究表明，植物在生长过程中，细胞会通过多种途径产生超氧阴离子（O-2 ? ）、羟自由基（?OH）、单线态氧（ ? O2）和过氧化氢（H2O2） 等活性氧（reactive oxygen species，ROS），影响细胞的正常代谢。当植物生长受到干旱、盐渍、农药、病原菌等胁迫或衰老时，会诱导体内产生过量的ROS，在细胞内造成严重的氧化胁迫[2]。而且，研究还发现ROS及其诱导的氧化反应是导致生物衰老和人体多种疾病的主要起因之一[3]。ROS具有很高的化学反应活性，能氧化DNA、损伤蛋白质，且使脂质过氧化从而破坏细胞[4]。为了保护机体免受ROS的损害，植物在长期的进化过程中，细胞内形成了一套非常高效的非酶促/酶促抗氧化系统来清除ROS，从而减轻氧化胁迫对细胞的伤害和氧化还原状态的紊乱程度。非酶促抗氧化系统即抗氧化剂，包括谷胱甘肽（glutathione，GSH）和抗坏血酸（ascorbate，AsA）等[5-6]。酶促抗氧化系统即抗氧化酶，主要包括超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、过氧化物酶（peroxidase，POD）、过氧化氢酶（catalase，CAT）、抗坏血酸过氧化物酶（ascorbate peroxidase，APX）和谷胱甘肽还原酶（glutathione reductase，GR）[7]。至今，很多学者对地黄中主要的酚类、糖类、苷类等抗氧化物质进行了大量的研究工作[8-9]，而关于不同品种地黄叶片中的ROS和酶促及非酶促抗氧化物质的研究较少。 　　地黄的品种很多，但由于自然环境和生产措施的影响，经有性杂交和块根变异，形成了很多地黄栽培品种及其变种，不同品种间质量也是参差不齐。金九（03-2）是河南省温县农业科学研究所采用杂交法经多年选育而成的产量高、品质好、综合抗性突出的地黄品种[10]，现已成为当地的适优主栽品种。航天一号（HT-102）是地黄种子在2006年9月9日15：00 随“实践八号”育种卫星进入太空进行诱变，再经系统筛选、扩繁获得的高产品种[11]。本试验选用金九和 HT-102这 2个地黄品种，比较其叶片中ROS水平和抗氧化物质的差异，从抗氧化角度分析不同品种地黄对相同生长环境的适应性，为其抗性机理的研究提供参考，进而为地黄的栽培种植和品种选育提供理论依据。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　试验所用的金九和HT-102地黄品种购自河南省焦作市温县农业科学研究所，挑选长度为3～4 cm、直径相近、部位一致的地黄“种栽”（繁殖材料），于2014年4月20日种植于武陟农科种业公司地黄试验田中，株距约10 cm，行距约 30 cm。在同样环境的地块，采用同样栽