二甲基氨氯吡咪及氨氯吡咪对心肌肥厚大鼠离体乳头肌力学特性影响.docVIP

二甲基氨氯吡咪及氨氯吡咪对心肌肥厚大鼠离体乳头肌力学特性的影响 　　摘要　目的　观察并比较二甲基氨氯吡咪(DMA)和氨氯吡咪(AM)对心肌肥厚大鼠离体乳头肌的变力性作用，并探讨其机制。方法 采用离体乳头肌灌流方法观察DMA和AM对心肌肥厚大鼠离体乳头肌的变力性作用，并利用L－型钙通道阻滞药和Na＋－Ca2交换体(NCX)阻断剂探讨其可能机制。结果　(1～20)μmol／LDMA对心肌肥厚大鼠离体乳头肌产生剂量依赖性的正性变力作用，升高发展张力(TC)，缩短收缩至最大速率的时间(T―dp／dtmax)和75％舒张时间(T75％)，与用药前相比，差异有统计学(P0.05或P0．01)。(0．05～1．00)mmol／LAM对心肌肥厚大鼠离体乳头肌产生剂量依赖性的负性变力作用，降低TC。延长T-dp／dtmax和T75％。与用药前相比，差异有统计学意义(P0．05或P0．01)。DMA对心肌肥厚大鼠离体乳头肌的正性变力作用不能被L－型钙通道阻滞药尼卡地平阻断。DMA对心肌肥厚大鼠离体乳头肌的正性变力作用能被Na+－Ca2+交换体(NCX)阻断剂氯化镍(NiCl2)阻断。结论　DMA(1～20)μmol／L对正常大鼠离体心脏产生剂量依赖性的正性变力作用。(0．05～1．00)mmol／L AM对心肌肥厚大鼠离体乳头肌产生剂量依赖性的负性变力作用。与AM抑制NCX不同，DMA通过激动NCX对心肌肥厚大鼠离体乳头肌产生正性变力作用。 　　关键词：二甲基氨氯吡咪；钠钙交换体；正性变力作用 　　中图分类号：R542．2 R256．2 　　文献标识码：A 　　文章编号：1672―1349(2007)06―0502―03 　　氨氯吡咪(amiloride，AM)对离子通道作用复杂，除对NA＋－H+交换有影响外，还对Na－Ca交换体(NCX)、电压门控K－Na－Ca2通道和Na－K－ATP酶有作用。近年来对作用更强更特异的AM衍生物的研究得到了广泛关注，且发展迅速，现已约达一千种。二甲基氨氯吡咪(dimethy―lamiloride，DMA)是AM第5位碳原子两个甲基取代两个氢原子后得到的产物，它对离子通道作用的强度、特异性，甚至作用的根本性质都与AM具有不同之处甚至截然相反。NCX是心肌细胞膜上的一种双向的非三磷酸腺苷(ATP)依赖的生电性离子转运蛋白。多数研究认为，AM及其多数衍生物均是NCX抑制剂，而我室前期膜片钳的研究表明，DMA能增强单个大鼠心肌细胞收缩力和钙瞬变，且其作用是通过增强NCX电流实现的[5]。 　　本次研究选取心肌肥厚大鼠左心室乳头肌，采用离体乳头肌灌流法，观察DMA和AM对乳头肌的变力性作用，并利用L-型钙通道阻滞药和NCX抑制剂探讨DMA对肥厚心肌的变力性作用与NCX的关系，为临床治疗心力衰竭开发新药提供药理学依据。 　　 　　1材料与方法 　　 　　1．1动物　健康清洁级Wistar大鼠，体重为(250～300)g，由山西医科大学实验动物中心提供，合格证号为：314第070104号。 　　1．2药品及试剂　DMA[5一(N，N―dimethyl)amiloride]，美国Sigma公司，批号67H4087；AM(amiloride hydrochloride)，美国Sigma公司，批号064K0743；氯化镍(NiCl2)，美国Sigma公司，批号129H3640；HEPES(N－2－hydroxyethylpiperazine―N－2－ethane―sulfonicacide)，北京化学试剂公司，批号030605；尼卡地平(nicardipine)，上海生工生物工程有限公司，批号3568A22。将DMA、AM、尼卡地平、NiCl2溶解于双蒸水中配成母液冷藏贮存于冰箱备用，实验前用台氏液稀释到所需浓度。 　　1．3仪器　离体乳头肌灌流装置；SEN－7103电子刺激器(日本NIHONKOHOEN公司)；BL－410生物信号分析系统(成都泰盟科技)。 　　 　　1．4方法 　　 　　1．4．1大鼠心肌肥厚动物模型的制备　选用雄性Wistar大鼠，称重后，参照Doering等方法，用戊巴比妥钠30 mg／kg腹腔注射麻醉后固定于手术台，无菌操作下打开腹腔，在双侧肾动脉上方游离出腹主动脉穿过一根0号丝线，沿腹主动脉长轴置一直径为0．7mm的小圆棒(7号针头磨制)，将腹主动脉与小圆棒一起结扎，抽出小圆棒，检查腹主动脉通畅后，分层关闭腹腔。术后第3周起每周做超声心动图(HP5500超声心动图仪，12MHz探头)，直到心肌肥厚为止。另做一组对照组动物，开腹后仅做分离但不结扎。 　　1．4．2乳头肌制备及灌流方法　取成型的模型大鼠，猛击其枕后部致昏，迅速开胸取出心脏，置于100％氧气饱和的室温台氏