利拉鲁肽对高脂饮食喂养大鼠血清及肝脏中TNF―影响.docVIP

利拉鲁肽对高脂饮食喂养大鼠血清及肝脏中TNF―影响 　　【摘要】 目的 研究利拉鲁肽对高脂饮食喂养的SD大鼠血清及肝脏中TNF-?的影响。方法 将48只雄性SD大鼠随机分为4组，分别予以普通饮食（ND）、高脂饮食（HFD）、高脂饮食加小剂量利拉鲁肽腹腔注射（HFD+SGLP-1）、高脂饮食加大剂量利拉鲁肽腹腔注射（HFD+LGLP-1）。喂养8周后检测大鼠血糖、体重，并检测大鼠血清及肝脏TNF-a蛋白表达水平的变化。结果 与ND组比较，HFD组大鼠体重、血脂及血糖水平显著升高，血清及肝脏TNF-α蛋白水平显著升高（P0.05）。而与HFD组比较，HFD+SGLP-1组和HFD+LGLP-1组大鼠体重、血脂及血糖水平明显降低，TNF-α蛋白水平明显减低（P0.05），但以HFD+LGLP组效果最为显著。结论 利拉鲁肽能够显著抑制高脂饮食喂养导致的体重增加，降低血糖，并改善胰岛素抵抗。利拉鲁肽改善胰岛素抵抗的作用可能与减少血清及肝脏中TNF-α蛋白的表达有关。 　　【关键词】 利拉鲁肽；TNF-?；胰岛素抵抗；高脂饮食 　　胰岛素抵抗是2型糖尿病的主要的病理生理学基础，大量的研究表明，炎症可能是促进胰岛素抵抗的重要因素，其主要机理可能与炎性因子干扰胰岛素受体底物信号转导通路有关，HOMA-IR是用于评价个体的胰岛素抵抗水平的指标。肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor α，TNF-α）是一种非糖基化蛋白，由多种细胞，如巨噬细胞、单核细胞、中性粒细胞、NK 细胞肥大细胞合成分泌，有研究表明脂肪细胞也分泌TNF-α[1]。大量证据证明TNF-α参与了胰岛素抵抗的形成，在胰岛素抵抗的发病机制中起了重要的作用[2]，动物试验也表明胰岛素抵抗与TNF-α的过度表达有密切的关系，而TNF-α与可溶性的TNF-α受体结合后可以降低体内胰岛素抵抗的程度[3]，现将研究结果报道如下。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　选取48只SPF级、清洁级雄性SD大鼠（湖南斯莱克景达实验动物有限公司，型号12910371116）作为研究对象，体重240-260g，均为8周龄大小，均体健。 　　1.2 研究方法 　　将48只雄性SD大鼠随机分为4组，分别予以普通饮食（ND）、高脂饮食（HFD，饮食组成为胆固醇0.5%，猪油10%，蛋黄粉10%，维持料59.5%，蔗糖20%）、高脂饮食加小剂量利拉鲁肽（HFD+SGLP-1，利拉鲁肽由丹麦诺和诺德公司生产，国药准字0.6mg/d腹腔注射、高脂饮食加大剂量利拉鲁肽（HFD+LGLP-1）1.8mg/d腹腔注射，记录每天每只大鼠的给食量和撒食量，每周定时称体重，检测血糖。第8周末大鼠禁食12h后测定各组小鼠的空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR；断头处死，采血并分离血清，取肝脏组织并称重，-80℃冰箱冷冻保存，分别检测血液及肝脏TNF-α蛋白表达水平的变化。 　　1.3 检测方法 　　经过8周，检测大鼠的体重、空腹血糖、空腹胰岛素，计算HOMA-IR指数。按试剂盒（中生北控生物科技股份有限公司）说明书操作。空腹血糖采用葡萄糖氧化酶法，血清胰岛素采用ELISA检测。血清TNF-α测定采用免疫发光法。采用Western blot方法对大鼠肝脏中TNF-α蛋白水平进行检测。 　　1.4 统计学方法 　　所有数据采用SPSS17.0统计学软件进行分析，采用（ ±s）表示，其中计量资料用t检验，计数资料采用 x2 检验，以P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 不同饮食喂养和利拉鲁肽剂量注射对大鼠体重的影响 　　与ND组比较，HFD组大鼠体重明显增加（P0.05）；而与HFD组比较，HFD+SGLP-1、HFD+LGLP-1组大鼠体重明显减轻（P0.05），其中尤以HFD+LGLP-1组大鼠体重下降更为明显。见表1。 　　2.2 各组大鼠血糖水平比较 　　与ND组比较，HFD组大鼠的血糖水平显著升高（P0.05）；与HFD组比较，HFD+LGLP-1组大鼠的血糖水平显著降低（P0.05）。见表1。 　　2.3 各组大鼠HOMA-IR水平比较 　　与ND组比较，HFD组大鼠HOMA-IR水平显著升高（P0.05）；与HFD组比较，HFD+LGLP-1组大鼠的HOMA-IR水平显著降低（P0.05）。见表1. 　　2.4 各组大鼠血清TNF-α表达水平的变化 　　与ND组比较，HFD组大鼠血清TNF-α水平明显增高（P0.05）；而HFD+LGLP-1组大鼠血清TNF-α水平则较HFD组显著降低（P0.05）。见表2。 　　2.5 各组大鼠肝脏TNF-α蛋白表达水平的变化 　　与ND组比较，HFD组大鼠肝脏TNF-α蛋白