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南瓜多糖研究进展 　　摘要：对近年南瓜多糖提取、分离、纯化、分析方法及药理作用的研究进展作一综述。 　　关键词：南瓜多糖；提取分离；分析方法；药理作用 　　中图分类号：Q 539文献标识码：A文章编号：1672-979X(2007)08-0051-03 　　 　　南瓜（Cucurbita moschata Duch）又称番瓜、倭瓜、金瓜等，系葫芦科南瓜属中一年生蔓性草本植物[1]。南瓜含有丰富的甘露醇，多种氨基酸（瓜氨酸、天冬酸），维生素C，E及微量元素Fe，Se等和生物碱、南瓜子碱等[2]，是营养丰富且具有保健功能的蔬菜。近年南瓜功能性因子的研究及功能食品的开发越来越受人们重视。南瓜多糖是南瓜中重要的活性成分，成为研究的热点。现对南瓜多糖的提取、分析及功能性研究进展作一综述。 　　 　　1南瓜多糖的理化性质 　　 　　南瓜多糖（pumpkin polysaccharide，PP）为棕色粉末，溶于水，易溶于热水，以及乙酸乙酯等有机溶剂。其水溶液呈透明黏稠状，可被2% CTAB络合沉淀，但与碘-碘化氨基黑10B反应为阴性。紫外扫描表明，南瓜多糖主要由糖（69.82%）和蛋白质（17.53%）组成[3]。孔庆胜等[4]用纸层法分析南瓜多糖成分，系由D-葡萄糖、D-半乳糖、L-阿拉伯糖、木糖和D-葡糖醛酸组成，薄层扫描得5种单糖的峰面积，其比值为D-葡萄糖?D-半乳糖?L-阿拉伯糖?木糖?D-葡糖醛酸 = 40.18?15.09?10.73?6.56?26.44，其摩尔比分别为0.083?0.181?0.069：0.031?0.178。张拥军等[3]通过HPLC分析南瓜多糖组成为鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖和半乳糖，其近似摩尔比为4:2:3:5。 　　 　　2南瓜多糖的提取纯化 　　 　　多糖是一种极性大分子化合物，大多用不同温度的水或稀碱溶液提取。水浸提法最常见，热水提取效果要好于冷水浸提，且随着温度的提高提取率增加。但由于水难以完全溶出其中的多糖物质，所以需多次浸提，操作时间长，提取率低。 　　近年超声波提取法广泛用于南瓜多糖的提取[5]。徐雅琴等[6]比较了热水、超声波及复酶法提取南瓜多糖，结果表明，复合酶法提取率优于热水浸提法和超声波法。赵二劳等[7]对微波法提取南瓜多糖的条件进行了优化实验，结果表明，微波辅助法提取比传统加热浸提法节省提取剂用量，缩短提取时间，还能提高多糖提取量。缓冻法也能强化南瓜多糖的提取效果，且效果优于超声波。 　　纯化主要是除去多糖提取液中小分子物质。南瓜多糖纯化多用脱蛋白、脱色、透析及凝胶柱层析等法。脱蛋白多用Sevag法，也有学者用三氯乙酸法；脱色则多用活性炭法。向东等[8]通过正交试验获得南瓜多糖最佳脱色工艺条件。吴建中等[9]用超滤技术浓缩提纯南瓜多糖，可脱除南瓜粗提液中大部分色素和灰分，省略了传统工艺中的透析步骤，简化了南瓜多糖的提纯工艺。南瓜多糖提取和纯化的一般步骤见图1。 　　 　　 　　3南瓜多糖的分析 　　 　　3.1多糖的相对分子质量测定 　　相对分子质量测定大多用凝胶过滤法。孔庆胜等[4]用0.1 mol/L NaCl，流速3.0 mL/h，平衡Sephadex G-200层析柱3 d。用已知相对分子质量多糖标准品dextran T10，T40，T70，T90 5 mg流速0.12 mL/min，分别上柱，用0.1 mol/L NaCl洗脱，分别收集，每管收集1.0 mL，用硫酸-苯酚法测定各管糖含量，分别求得洗脱液体积Ve，后用蓝色葡聚糖（dextran T-2000）上柱，得柱空体积V0，根据Ve/V0值查标准曲线，测得多糖相对分子质量为16 000。 　　张拥军等[3]用HPLC法测南瓜多糖相对分子质量，用TSK及Ultrahydrogel linear （7.8 mm×300 mm）色谱柱，双柱串联，示差折光检测器检测。按HPLC测定的相同条件将7种标准 dextran相继进样，记录各自的保留时间TR，绘制标准曲线。待测样品按上述条件进样，求得TR，通过标准曲线的回归方程计算多糖相对分子质量为1.16×105。 　　3.2多糖的单糖组成及糖苷键成分测定 　　多糖的单糖组成是多糖质控的主要指标。目前对南瓜多糖的分析大多用纸层析或薄层色谱法。孔庆胜等[4]用Whatman No.Ⅰ水解南瓜多糖后，慢性定性层析滤纸，纸长40 cm，展开系统为醋酸乙酯：吡啶:水=10∶4∶3（v∶v∶v），上行法展开18 h，用标准单糖对照，硝酸银-氢氧化钠试剂显色，于80 ℃加热10 min后观察结果。 　　气相色谱检测南瓜多糖成分。将样品用1.0 mo1/L硫酸封管，于100 ℃水解6 h后，饱和Ba(OH)2中和，滤液置40 ℃减压蒸干后加入