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响应曲面法优化分析甘薯不同肉色薯块多酚提取条件 　　摘要：在优化紫心、黄心、橘黄心和橘红心4类肉色11个甘薯品种薯块多酚提取条件的基础上，运用响应曲面法进行乙醇体积分数、浸提时间和固液比3因素3水平Box-Behnken优化设计试验，以比较品种间最佳提取条件的差异。结果表明，11个甘薯品种薯块多酚的最佳提取条件存在异同，需根据研究目的对多酚提取条件采取不同的策略与方法；对批量甘薯品种薯块中的多酚含量高低进行评价时，可选取乙醇体积分数60%、浸提时间9 h、固液比 10 mg/mL 作为多酚通用提取条件。 　　关键词：甘薯；薯块；多酚；提取条件；响应曲面法 　　中图分类号：TS201.1 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2015）07-0276-05 　　植物多酚类物质具有抗炎、抗病毒、抗氧化、抗突变、DNA损伤修复等功能[1-2]，能阻止心血管疾病、神经退行性疾病、糖尿病、骨质疏松症、癌症等许多慢性疾病的发生[3-5]。甘薯不仅是发展中国家的重要粮食、饲料和工业原料作物，而且其茎叶和薯块中含有绿原酸、花色苷、黄酮等多酚类物质[6]，是多酚类物质新的较好来源[7]，这为甘薯产业开发提供了新思路。 　　响应曲面法（RSM）是一种对多种因素进行试验设计能得到最佳条件的研究方法[8]，在甘薯多酚研究中已得到一定的应用，如Song等利用响应曲面法得到微波302 W、浸提时间123 s、乙醇体积分数53%甘薯叶片总酚微波辅助的提取方法[9]；陆国权等运用响应曲面法研究甘薯薯块多酚提取条件认为，乙醇体积分数60%、物料比1 g ∶60 mL、80 ℃水浴下浸提88 min最佳[10]；Fan等利用响应曲面法得到提取温度 80 ℃、提取时间60 min、固液比1 g ∶32 mL为紫心甘薯薯块花青素的最佳提取条件[11]；韦学丰等对甘薯叶黄酮提取方法进行响应曲面法优化，得到微波功率302 W、微波时间4 min、乙醇体积分数50%、固液比1 g ∶43 mL为最佳提取条件[12]。 　　甘薯多酚固有含量因品种、种植地点、栽培措施等不同而有差异，而对其含量测定时，也会受提取溶剂种类和浓度、浸提时间、提取温度、固液比等因素影响[13-14]。前人在甘薯多酚提取时，多数是针对某一类肉色甘薯品种[15]或一类多酚[11]，针对不同肉色甘薯薯块多酚通用提取条件的研究较少。本试验选取紫心、黄心、橘黄心和橘红心4类肉色的11个甘薯品种，采取25 ℃、振荡辅助提取条件下进行乙醇体积分数、浸提时间和固液比3个单因素提取条件，利用响应曲面法对不同肉色甘薯薯块多酚提取条件进行优化与比较，为甘薯资源的多酚含量评价与筛选奠定一定的基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料与试剂 　　11个不同肉色甘薯品种薯块（表2）采自西南大学重庆市甘薯工程技术研究中心合川试验基地。无水乙醇（分析纯），重庆川东化工有限公司产品；无水碳酸钠（分析纯），成都市科龙化工试剂厂产品；福林酚（Folin-Ciocalteu）反应试剂、绿原酸（chlorogenic acid）标准品，Sigma公司产品。 　　1.2 仪器与设备 　　FW135型中草药粉碎机，天津市斯特仪器有限公司生产；CM-2300D美能达色差计，日本美能达公司生产；BSA124S型电子分析天平，赛多利斯科学仪器北京有限公司生产；MIKRO 22R型离心机，Hettich Zentrifugen公司生产；HZ-8211K台式空气恒温振荡器，金坛市盛蓝仪器制造有限公司生产；SY-2000旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂生产；T6新世纪型紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限责任公司生产。 　　1.3 方法 　　1.3.1 样品粉末的制备 薯块收获期，选用大小均匀一致的薯块，清水洗净，室温下晾干；四分法取样，切成1 cm×1 cm×1 cm 左右的薯粒，混匀，40 ℃条件下烘干至恒质量；将烘干薯粒粉碎，120目过筛，装瓶，密封，-20 ℃低温保存，备用。 　　1.3.2 甘薯薯块粉末色度的测定 CM-2300D美能达色差计测定11个甘薯薯块样品粉末的L*、a*和b* 3个指标，计算C*值和h°值[16-17]。 　　1.3.3 样液提取与制备 准确称取0.300 0 g样品粉末于带塞锥形瓶中，加入一定体积不同体积分数的乙醇提取剂，25 ℃、100 r/min避光振荡浸提一定时间；浸提液 5 000 r/min 离心20 min；取上清液，提取剂定容至50 mL；50 ℃ 旋转蒸发乙醇至完全，超纯水定容至50 mL。每个品种重复3次。 　　1.3.4 提取条件优化 以乙醇体积分数60%、浸提时间 9 h、固液比10 mg/mL为基础，改变任一条件进行单因素试验，研究乙醇体积分数、浸