安丝菌素P―3摇瓶发酵培养基优化.docVIP

安丝菌素P―3摇瓶发酵培养基优化 　　摘要：为了优化安丝菌素P-3（AP-3）的摇瓶发酵培养基，以AP-3产量为主要指标，在单因素试验的基础上，利用均匀试验设计U*15（157）对培养基中碳源、氮源和前体异丁醇进行优化。得到最适培养基配方为葡萄糖4.22%，麦芽糖0.75%，玉米浆3.42%，乙酸铵0.41%，异丁醇0.43%，碳酸钙0.50%，氢氧化钠0.12%，磷酸氢二钾0.10%，pH（7.4±0.2）。在此条件下进行验证试验，AP-3产量为（51.86±1.33） mg/L，与模型预测值接近。表明该优化方法切实可行，能够获得较高的AP-3产量。 　　关键词：安丝菌素P-3；发酵；培养基；优化 　　中图分类号：TQ920.6 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）11-2707-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.11.039 　　Optimization of Shaking-flask Fermentation Medium for Ansamitocin P-3 　　GU Zheng-wei，ZHU Xiao-yuan，LI Ji-lie 　　（Central South University of Forestry and Technology/2011 Cooperative Innovation Center of Cultivation and Utilization for Non-Wood Forest Trees of Hunan Province/Key Laboratory of Cultivation and Protection for Non-wood Forest Trees，Ministry of Education，Changsha 410004，China） 　　Abstract： In order to optimize the shaking-flask fermentation medium for ansamitocin P-3（AP-3），the yield of AP-3 was used as major index， based on the single experiment， carbon sources， nitrogen sources and precursor isobutanol were optimized by the design method of even experiment U*15（157）.The optimum medium formulas were glucose 4.22%，maltose 0.75%，corn steep liquor 3.42%，ammonium acetate 0.41%，precursor isobutanol 0.43%，CaCO3 0.50%，NaOH 0.12%，K2HPO3 0.10%，pH （7.4±0.2）.Under the above condition， the yield of AP-3 was up to（51.86±1.33） mg/L， closely to the prediction of the model. Relatively high yield of AP-3 was gained by this feasible optimization. 　　Key words： ansamitocin P-3； fermentation； medium； optimization 　　安丝菌素（Ansamitocins）是一类由橙色珍贵束丝放线菌（Actinosynnema pretiosum）发酵生成的美登素类抗生素[1]，具有抗肿瘤、抗细菌、抗结核杆菌等生理活性[2，3]，其衍生物可以作为“弹头”与单抗结合形成活性高、副作用小的抗体-药物偶联物（Antibody-drug conjugates，ADCs）[4-7]。根据C-3侧链的碳链长度不同，安丝菌素可分为P-1、P-2、P-3、P-3’和P-4五个组成部分，其中安丝菌素P-3是主要发酵产物[8，9]。 　　培养基组成是发酵过程必须考虑的因素，碳源对微生物生长代谢的作用主要是提供细胞及合成产物的碳架，提供细胞生命活动所需的能量。氮源主要用于合成氨基酸、蛋白质、核酸等菌体细胞物质和含氮代谢物，包含有机氮源和无机氮源，两者通常在发酵过程中混合使用。前体是次级代谢物生物合成的主要限制因素，往往决定抗生素的产量与质量，主要来源于脂肪酸、单糖、蛋白质等含碳物质的代谢，还有些源于主代谢中无作用酶的催化产物。 　　本研究利用单因素试验考察