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孩儿参组织培养及无性系建立研究 　　摘　要：以具有腋芽的嫩茎为材料，对孩儿参组织培养及无性系建立进行了研究。结果表明：1／2MS+BA 0.1mg／L+IAA0.1 mg／L是诱导孩儿参腋芽生长的理想培养基；MS+BA 0，4 mg／L+IAA 0，1 mg／L是孩儿参不定芽分化培养的理想培养基；1／3MS+1AA 0.4 mg／L是生根培养的理想培养基；河沙和炉灰渣是试管苗移栽的理想基质。 　　关键词：孩儿参；无性系；快速繁殖 　　中图分类号：S688.4；Q943.1　文献标识码：A　文章编号：1006―6500(2008)05-0004-04 　　　孩儿参(Pseudostellaria heterophylla)又叫太子参、异叶假繁缕，属于石竹科假繁缕属多年生草本植物。根可入药，也可代人参使用，具有滋养壮力、补气生津、健脾等功效，能治肺虚咳嗽、脾虚心悸、口渴、食欲不振、肝炎、神经衰弱、体弱无力、自汗盗汗等多种疾病。由于孩儿参具有多种药用价值，并且可以代替人参使用，近年来人们的大肆采集，使本来分布量就很少的孩儿参，现在在辽宁南部地区已经很难采到，于是有的农民就开始进行人工种植。但由于很难采集到种子和种苗，从而影响了种植。为此，笔者对孩儿参进行组织培养和无性系建立的研究，以期获得大量种苗，满足人们的需要。 　　 　　1　材料和方法 　　 　　1.1　材料处理 　　采集河边林荫下生长非常旺盛的孩儿参，切去叶片，将具有顶芽和侧芽的嫩茎放到磨口广口瓶中，自来水冲洗15min后，用0.05％安利洗涤液振荡洗涤20min左右，洗至没有泡沫时置于超净工作台上。用75％乙醇灭菌10s后，迅速用无菌水洗涤3次，接着用0.1％HgCl2溶液振荡灭菌1min，再加入等体积无菌水，继续振荡灭菌10min。接着用无菌水振荡洗涤6次，即获得无菌材料。 　　 　　1.2　培养条件 　　培养基以MS、1／2MS和1／3MS为基本培养基，附加不同浓度的细胞分裂素BA和生长素IAA、NAA、IBA。以MS为基本培养基时，加蔗糖30g／L；以1／2MS为基本培养基时，加蔗糖15g／L；以1／3MS为基本培养基时，加蔗糖10g／L。培养基胨力强度为180g／cm2，pH5.8～6.0，培养条件14-24℃，光照10h／d，光照度20001x。 　　 　　2　结果与分析 　　 　　2.1　腋芽的生长培养 　　将无菌嫩茎切成长0.3cm左右具有腋芽的茎段，接种到以1／2MS为基本培养基，附加BA0.1 mg／L，IAA 0.1，0.4，0.7和1.0 mg／L的4种培养基上进行腋芽的生长培养。35 d时腋芽开始生长。60d后观察统计表明，在4种培养基上培养的腋芽都能生长。其中在1／2MS+BA 0.1mg／L+IAA 0.1mg／L的培养基上，不仅腋芽的生长率达到了100％，并且生长快而旺盛。将在这一培养基上诱导生长的芽剪成具有顶芽或1～2个腋芽的茎段，在相同培养基上进行继代培养，35d又能生长成高2cm左右的芽，连续3次试验共13代的继代培养，培养芽的长势保持不变。这说明1／2MS+BA 0.1 mg／L+IAA 0.1mg／L是诱导孩儿参腋芽生长的理想培养基。 　　 　　2.2　芽的分化培养 　　将上述培养的芽剪成具有顶芽或1-2个腋芽的茎段，接种到以MS为基本培养基，附加不同浓度的BA、IAA、NAA的培养基上进行芽的分化培养，每种培养基接种50个材料，培养到20d左右时开始分化，40d时观察统计。由表1可见，在BA浓度为0.4mg／L、NAA浓度为0.1 mg／L这一培养基上，不仅分化率为96％，而且单芽分化的不定芽数达到4.5，分化的不定芽高度为1～3 cm。长势好。把分化的不定芽剪成具有顶芽或1-2个腋芽的茎段，接种到相同的培养基上进行继代分化培养，连续培养9代，其分化不定芽的分化率、单芽分化数和分化芽的长势基本保持不变，但继代培养周期缩短为35d。这说明MS+BA 0.4 mg／L+NAA 0.1mg／L是孩儿参不定芽分化培养的理想培养基。 　　 　　 　　2.3　生根培养 　　将上述分化培养高度为1cm以上的不定芽从基部剪下，接种到以1／2MS和1／3MS为基本培养基，附加不同浓度IAA、NAA和IBA的生根培养基上进行生根培养。每种培养基接种50个材料。培养到10d时有的培养基上可见形成根原基，培养25d时观察统计。由表2可见，在附加NAA的生根培养基中，不能诱导生根；在附加IBA的生根培养基中，诱导生根率也较低，生出根的长势也较差；在含有浓度分别为0.2，0.4，0.6，0.8mg／L IAA的生根培养基上都能诱导生根；其中在IAA浓度为0.4 mg／L的1／3MS生根培养基上，不仅生根率达98