TSLP 在动脉粥样硬化炎症反应中的作用和机制-心血管内科专业论文.docxVIP

四华申科技大学罔济医学院E·R·-???回 四 华申科技大学 罔济医学院 饰LF阳门bm 但 也 ·电 帽·······E···阳·· ·阳帽·· 帽·······E···阳·· ·阳帽· · ·四· 独创性声明 本人郑重声明，本学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果 的总结。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体 已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中以明 确方式标明。本人完全意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留 并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授 权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采 用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本论文属于 保密□ ，在 年解密后适用本授权书。 不保密□。 （请在以上方框内打“√” ） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 目 录 中 文 摘 要 1 ABSTRACTS 4 前 言 7 参 考 文 献 9 第一部分 TSLP 在动脉粥样硬化血管内的表达 11 1. 材料及方法 12 2. 结 果 17 3. 讨 论 24 参 考 文 献 25 第二部分 氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞表达胸腺基质淋巴细胞生成素 .. 27 1. 材料及方法 27 2. 结 果 34 3. 讨 论 38 参 考 文 献 39 第三部分 氧化低密度脂蛋白诱导血管平滑肌细胞表达胸腺基质淋巴细胞生成素 41 1. 材料及方法 41 2. 结 果 48 3. 讨 论 52 参 考 文 献 53 第四部分 阿托伐他汀抑制氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞表达 TSLP 55 1. 材料及方法 55 2. 结 果 62 3. 讨 论 65 参 考 文 献 66 总 结 68 综述 胸腺基质淋巴细胞生成素（TSLP） 69 参 考 文 献 81 附录一 英文缩略词表及中文对照 92 附录二 攻读博士学位期间主要发表的论文 94 致 谢 95 华中科技大 学博士学位论 华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 PAGE 1 PAGE 1 TSLP 在 动 脉 粥 样 硬 化 炎 症 反 应 中 的 作 用 和 机 制 博士研究生姓名： 昌 薇 博士生导师姓名： 李大主 曾秋棠 教授 华中科技大学同济医学院附属协和医院心血管内科 中 文 摘 要 第一部分 TSLP 在动脉粥样硬化血管内的表达 目的：观察人和动脉粥样硬化（AS）模型小鼠的 AS 血管内是否表达胸腺基质淋巴细 胞生成素（TSLP）及其与树突状细胞（DCs）的关系。 方法：采取人无 AS 血管和 18 周龄的 C57BL/6 雄性小鼠血管作为正常对照，人有 AS 血管和 18-22 周龄 C57BL/6 背景 ApoE-/ - AS 模型小鼠病变血管为病变组，用免疫 组化法检测血管中 TSLP、CD11c 和 CD4 的表达，用原位杂交技术检测血管中 TSLP mRNA 的表达，用双重免疫荧光法检测血管中 TSLP 和 DCs 的共表达关系。 结果：在人和小鼠正常血管均未见明显 TSLP 表达，而在人 AS 病变血管与 AS 模型 小鼠病变血管内均见 TSLP 及 TSLPmRNA 表达。双重免疫荧光染色显示 TSLP 表达部位周围明显 DCs 聚集。 连续切片免疫组化染色显示同一血管内 TSLP 表 达部位有 DCs 和 TCs 共表达。 讨论：TSLP 在人及 AS 模型小鼠的 AS 血管显著表达，其周围可见明显 DCs、TCs 聚集，这说明 TSLP 作为 DCs 的上游激活因子，可能直接参与了 AS 免疫炎症反 应的调控。 关键词：胸腺基质淋巴细胞生成素；动脉粥样硬化；ApoE-/-小鼠 第二部分 氧化低密度脂蛋白诱导血管内皮细胞表达 TSLP 目的 探讨氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）可否诱导血管内皮细胞产生 TSLP。 方法 将 ox-LDL（12.5, 25, 50, 100mg/L）与培养原代人脐静脉内皮细胞（HUVECs） 共育 12 小时，在 6 小时和 12 小时进行检测，用 RT-PCR 检测 TSLP mRNA 的表 达, 采用免疫荧光法检测细胞胞浆中 TSLP 表达，用 ELISA 法检测细胞培养上清 液中 TSLP 的浓度。 结果 在对照组 HUVECs 中几乎未检测到 TSLP 表达；在实验组，HUVECs 中检测到 TSLP m