TGF-β诱导免疫细胞耐受参与肝癌的发生发展-药理学专业论文.docxVIP

安徽医 安徽医科大学硕士学位论文 1.2.8 DC 抗原摄取能力分析 29 1.2.9 混合淋巴细胞反应（MLR） 29 1.2.10 DC 培养上清中 IL-10 和 IL-12 水平检测 30 1.2.11 小鼠骨髓来源 DC 的培养及 TGF-β 时间和浓度相关处理 30 1.2.12 小鼠肝癌细胞株（Hepa）的培养 31 1.2.13 流式细胞术检测小鼠 CD4+CD25+Foxp3+ Treg 比例 31 1.2.14 流式细胞术检测 T 细胞凋亡 32 1.2.15 细胞毒性试验 33 1.3 统计学处理 33 2 结果 33 2.1 二乙基亚硝胺（DEN）诱导大鼠肝脏病变 33 2.2 大鼠肝脏癌变过程中 TGF-β 水平的变化 34 2.3 大鼠肝脏癌变过程中 DC 表型的变化 35 2.3.1 大鼠肝脏癌变过程中 DC 表面 CD80 的表达 35 2.3.2 大鼠肝脏癌变过程中 DC 表面 CD86 的表达 36 2.3.3 大鼠肝脏癌变过程中 DC 表面 MHCⅡ的表达 36 2.4 大鼠肝脏癌变过程中 CD4+CD25+Foxp3+ Treg 比例的变化 37 2.5 小鼠骨髓来源 DC 的鉴定 39 2.5.1 形态学观察 39 2.5.2 表型检测 39 2.6 TGF-β 对 DC 表面 CD40、CD83、CD86 和 MHCⅡ表达的影响 .. 40 2.7 TGF-β 对 DC 中 CD45RB 和 IDO 表达的影响 41 2.8 TGF-β 对 DC 分泌 IL-10 和 IL-12 的影响 42 2.9 TGF-β 对 DC 抗原摄取能力的影响 43 2.10 TGF-β 对 DC 促进 T 细胞增殖功能的影响 43 TGF-β 上调 DC 表面 PD-L1 表达 44 TGF-β 上调 DC 中 STAT3 和 p-STAT3 表达 46 2.13 STAT3 特异性阻断剂 NSC74859 作用后，DC 表面 PD-L1 表达 的变化 48 TGF-β-DC 诱导 T 细胞凋亡 49 TGF-β-DC 诱导 CD4+ CD25+ Foxp3+ Treg 生成 50 TGF-β-DC 抑制 T 细胞对 Hepa 的杀伤作用 52 3 HYPERLINK \l _bookmark0 讨论 53 4 结论 56 5 HYPERLINK \l _bookmark1 本研究的创新点 57 参考文献 58 致谢 65 综述：肿瘤相关树突状细胞研究进展 67 PAGE PAGE 1 英文缩略词对照（Abbreviation） 英文缩写 英文全名 中文全名 Ag antigen 抗原 AP ammonium persulfate 过硫酸铵 APC antigen presenting cell 抗原提呈细胞 DC dendritic cell 树突状细胞 DEN N-nitrosodiethylamine 二乙基亚硝胺 ELISA enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附试验 FCS fetal bovine serum 胎牛血清 GM-CSF granulocyte macrophage colony stimulating factor 粒细胞-巨噬细胞集落刺 激因子 HCC hepatocellular carcinoma 肝细胞癌 HE hematoxylin and eosin 苏木素和伊红 HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶 IDO indoleamine2, 3-dioxygenase 吲哚胺 2，3-双加氧酶 IL interleukin 白细胞介素 imDC immature dendritic cell 未成熟 DC mDC mature dendritic cell 成熟树突状细胞 MHC major histocompatibility complex 主要组织相容性复合物 MLR mixed lymphocytes reaction 混合淋巴细胞反应 MTT 3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl） 3-（4,5-二甲基噻唑-2） -2,5-diphenyl-tetrazolium bromide -2,5-二苯基四氮唑溴盐 PAGE polyacrylamide gel electrophoresis PAMPs pathogen associated molecular patterns 聚丙烯酰胺凝胶电泳 病原相关分子模式 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PD-1 programmed death 1