TLR3在氧诱导视网膜病变中的作用研究-眼科学专业论文.docxVIP

重庆医科 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 英文全称 中文全称 OIR Oxygen-induced retinopathy 氧诱导视网膜病变 TLR3 Toll-like receptor 3 Toll 样受体 3 Poly（I:C） Polyinosinic: polycytidylic 聚肌苷酸-聚胞苷酸 ROP Retinopathy of prematurity 早产儿视网膜病变 PDR Proliferative diabetic retinopathy 增殖型糖尿病视网膜病变 AMD Age-related macular degeneration 年龄相关性黄斑变性 PAMPs Pathogen associated molecular patterns 病原相关分子模式 NF-κB Nuclear factor kappa B 核因子-κB IL-6 Interleukin-6 白细胞介素 6 TNF-α MCP-1 Tumor necrosis factor-α Monocyte chemoattractant protein-1 肿瘤坏死因子 α 单核趋化蛋白 1 HSK Herpetic stromal keratitis 单纯疱疹病毒性角膜炎 HCEC Human corneal epithelial cell 人角膜上皮细胞 EAU Experimental autoimmune uveitis 实验性葡萄膜炎 BD Behcet’s disease 白塞氏病 RPE Retinal pigment epithelium 视网膜色素上皮细胞 CNV Choroidal neovascularization 脉络膜新生血管 ERMs Epiretinal membranes 视网膜前膜 1 TLR3 在氧诱导视网膜病变中的作用研究 摘 要 目的： 本文旨在通过检测大鼠氧诱导视网膜病变（Oxygen-induced retinopathy, OIR）中 TLR3(toll-like receptor 3)及其相关信号通路的 表达情况，以及玻璃体腔注射 TLR3 配体 poly（I:C）或 TLR3 中和性 抗体对其表达以及大鼠视网膜损伤程度的影响，探讨 TLR3 在缺血缺 氧诱导的视网膜病变中的作用。 方法： 刚出生的 SD（Sprague-Dawley）乳鼠随机分为正常对照组（N） 和氧诱导视网膜病变组（OIR），通过连续 14 天交替氧循环饲养的方法 构建氧诱导视网膜病变大鼠模型。造模成功后，将不同日龄的大鼠处 死， HE 染色和异凝集素染色检测视网膜损伤情况，免疫组化方法检 测大鼠视网膜中 TLR3 的表达情况。 分别给正常大鼠和 OIR 大鼠玻璃体腔注射 TLR3 配体 poly（I:C） 或中和性抗体 anti-TLR3，注射 24 小时后处死大鼠， Real-time PCR 检 测大鼠视网膜中 TLR3 和相关炎症因子 IL-6、TNF-α 的基因表达水平， western blot 检测 TLR3、NF-κB 的蛋白表达水平。 结果： OIR 大鼠视网膜中 TLR3 及 NF-κB 的蛋白及 mRNA 表达均比正常 2 对照组有所增加（P0.05）；OIR 组 IL-6、TNF-α 表达水平较正常组增 加（P 值均0.05）。玻璃体腔注射 poly（I:C）能显著上调视网膜中 TLR3 及 NF-κB 表达水平（P0.05），促进视网膜中 IL-6、TNF-α 的释放 （P0.05）。TLR3 中和性抗体能减少 OIR 大鼠视网膜中 TLR3、NF-κB 以及 IL-6、TNF-α 的表达（P0.05）。HE 染色和异凝集素染色显示 OIR 组的视网膜新生血管数较正常组更多，视网膜结构更加紊乱（P0.05）。 结论： TLR3 及其下游炎症通路信号分子在 OIR 大鼠模型中表达显著增 高。玻璃体腔注射 TLR3 配体 poly（I:C）可以上调视网膜中 TLR3 的 表达，促进相关炎症因子的释放，进而增加正常和 OIR 大鼠视网膜新 生血管和结构改变；TLR3 中和性抗体能下调 TLR3 表达，以及相关炎 症因子的表达。低氧可能通过激活 TLR3 及其下游信号通路促进视网 膜炎症因子 IL-6、TNF-α 释放而加重视网膜损伤。 关键词：氧诱导视网膜病变；toll 样受体 3；炎症因子 3 THE ROLE OF TLR3 IN THE INFLAMMATORY RESPONSE IN OXYGEN-INDUCED RETINOPATHY ABSTRACT Purpose: In this study, we detect the ex