TLR4介导的BV2细胞抗HCV固有免疫应答机制初步研究-神经病学专业论文.docxVIP

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TLR4介导的BV2细胞抗HCV固有免疫应答机制初步研究-神经病学专业论文

宁夏医科大学学位论文独创性声明 本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独 立进行研究工作所取得的成果,无抄袭及编造行为。除文中已经特别加 以注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写 过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中 以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承 担。 论文作者签名_____ 论文导师签名_____ 年 月 日 年 月 日 宁夏医科大学关于学位论文使用授权的声明 宁夏医科大学有权保留使用本人学位论文,同意学校按规定向国 家有关部门机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅。本人 授权宁夏医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据 库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论 文。可以公布(包括刊登)论文的全部或部分内容。 (保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名_____ 论文导师签名_____ 年 月 日 年 月 日 宁夏医科大 宁夏医科大学硕士研究生学位论文 中文摘要 I I TLR4 介导的 BV2 细胞 抗 HCV 固有免疫应答机制初步研究 摘 要 目的 通过观察 HCV 刺 激 后 小 鼠 小 胶 质 细 胞 (BV2 细胞 )TLR4 表 达 变 化 及 其 下 游 细 胞 因 子 IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12 分 泌 变 化 ,进 而 分析 两 者 变 化 的 相 关 性 , 初 步 探 讨 TLR4 是 否 介 导 参 与 中 枢 神 经 系 统 (CNS)抗 HCV 固 有 免 疫 应 答 及 其 可 能 机 制 。 方法 用含 20%HCV 阳 性 血 清 的 培 养 液 刺 激 BV2 细胞,为 HCV 实验 组 , 并 设 置 正 常 血 清 组 和 空 白 对 照 组 。 应用 实 时 荧 光 定 量 PCR(RT-qPCR)方 法 检 测 刺 激 6h 、 12h 、 18h 、 24h 后 TLR4mRNA 的相 对 表 达 ; 应 用 流 式 细 胞 术 (FCM)、 酶 联 免 疫 吸 附 法 (ELISA)分 别 检 测 刺 激 24h 后 TLR4 蛋白 及 IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12 表 达 水 平 ;通过 观 察 TLR4 阻 断后 各 组 细 胞 IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12 分 泌 变 化 分 析 两 者 的 相 关 性 。 采 用 单 因 素 方 差 分 析 进 行 多 组 均 数 的 比 较 , P0.05 为差 异 具 有 统 计 学 意 义 。 结果 在 BV2 细胞 中 有 TLR4 mRNA 和 TLR4 蛋 白 的 表 达 ; HCV 实 验 组 TLR4 mRNA 和 TLR4 蛋 白 均 高 于 正 常 血 清 组 及 空 白 对 照 组 , 差 异 有 统 计 学 意 义 (P0.01),且 HCV 实 验 组 TLR4 mRNA 表达 24h 内 呈 递 增 趋 势 ; HCV 实验组 IFN-α、 IFN-β、 IL-6、 IL-12 分 泌 明 显 高 于 正 常 血 清 组 及 空 白 对 照 组 , 差 异 有 统 计 学 意 义 (P0.01); HCV 实验组 TLR4 阻 断 后 IFN-α、 IFN-β、 IL-6、 IL-12 分 泌 明 显 减 少 , 差 异 有 统 计 学意义 (P0.01),正 常 血 清 组 和 空 白 对 照 组 阻 断 TLR4 前 后 无 明 显 变 化 (P0.05)。 结论 HCV 阳 性 血 清 刺 激 可 引 起 体 外 培 养 的 BV2 细胞 TLR4 表达 II II 上调 ,激 活 细 胞 因 子 IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12 等 分 泌 发 挥 抗 病 毒 作 用, 因此 TLR4 可 能 介 导 参 与 了 CNS 抗 HCV 固 有 免 疫 应 答 过 程 。 [关 键 词 ] Toll 样受体 4,丙 型 肝 炎 病 毒 ,小 胶 质 细 胞 ,干 扰 素 -α、 β, 白介素 6 、 12 宁夏医科大 宁夏医科大学硕士研究生学位论文 英文摘要 PAGE PAGE IV Preliminary study on the mechanism of innate immune response mediated by TLR4 in BV2 cells anti-HCV ABSTRACT Objective To explor e wh eth er th e TLR4 in volved in and mediated in the innate immun e r espon

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