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TLR4介导的BV2细胞抗HCV固有免疫应答机制初步研究-神经病学专业论文
宁夏医科大学学位论文独创性声明
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(保密论文在解密后应遵守此规定) 论文作者签名_____ 论文导师签名_____
年 月 日 年 月 日
宁夏医科大
宁夏医科大学硕士研究生学位论文
中文摘要
I
I
TLR4 介导的 BV2 细胞
抗 HCV 固有免疫应答机制初步研究
摘 要
目的 通过观察 HCV 刺 激 后 小 鼠 小 胶 质 细 胞 (BV2 细胞 )TLR4 表 达 变 化 及 其 下 游 细 胞 因 子 IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12 分 泌 变 化 ,进 而 分析 两 者 变 化 的 相 关 性 , 初 步 探 讨 TLR4 是 否 介 导 参 与 中 枢 神 经 系 统 (CNS)抗 HCV 固 有 免 疫 应 答 及 其 可 能 机 制 。
方法 用含 20%HCV 阳 性 血 清 的 培 养 液 刺 激 BV2 细胞,为 HCV 实验 组 , 并 设 置 正 常 血 清 组 和 空 白 对 照 组 。 应用 实 时 荧 光 定 量 PCR(RT-qPCR)方 法 检 测 刺 激 6h 、 12h 、 18h 、 24h 后 TLR4mRNA 的相 对 表 达 ; 应 用 流 式 细 胞 术 (FCM)、 酶 联 免 疫 吸 附 法 (ELISA)分 别 检 测 刺 激 24h 后 TLR4 蛋白 及 IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12 表 达 水 平 ;通过 观 察 TLR4 阻 断后 各 组 细 胞 IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12 分 泌 变 化 分 析 两 者 的 相 关 性 。 采 用 单 因 素 方 差 分 析 进 行 多 组 均 数 的 比 较 , P0.05 为差 异 具 有 统 计 学 意 义 。
结果 在 BV2 细胞 中 有 TLR4 mRNA 和 TLR4 蛋 白 的 表 达 ; HCV 实 验 组 TLR4 mRNA 和 TLR4 蛋 白 均 高 于 正 常 血 清 组 及 空 白 对 照 组 , 差 异 有 统 计 学 意 义 (P0.01),且 HCV 实 验 组 TLR4 mRNA 表达 24h 内 呈 递 增 趋 势 ; HCV 实验组 IFN-α、 IFN-β、 IL-6、 IL-12 分 泌 明 显 高 于 正 常 血 清 组 及 空 白 对 照 组 , 差 异 有 统 计 学 意 义 (P0.01); HCV 实验组 TLR4 阻 断 后 IFN-α、 IFN-β、 IL-6、 IL-12 分 泌 明 显 减 少 , 差 异 有 统 计 学意义 (P0.01),正 常 血 清 组 和 空 白 对 照 组 阻 断 TLR4 前 后 无 明 显 变 化 (P0.05)。
结论 HCV 阳 性 血 清 刺 激 可 引 起 体 外 培 养 的 BV2 细胞 TLR4 表达
II
II
上调 ,激 活 细 胞 因 子 IFN-α、IFN-β、IL-6、IL-12 等 分 泌 发 挥 抗 病 毒 作
用, 因此 TLR4 可 能 介 导 参 与 了 CNS 抗 HCV 固 有 免 疫 应 答 过 程 。
[关 键 词 ] Toll 样受体 4,丙 型 肝 炎 病 毒 ,小 胶 质 细 胞 ,干 扰 素 -α、 β, 白介素 6 、 12
宁夏医科大
宁夏医科大学硕士研究生学位论文
英文摘要
PAGE
PAGE IV
Preliminary study on the mechanism of innate immune response mediated by TLR4 in BV2 cells anti-HCV
ABSTRACT
Objective To explor e wh eth er th e TLR4 in volved in and mediated in the innate immun e r espon
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