TLR4基因多态性及信号转导相关因子与军团菌感染的关系-流行病与卫生统计学专业论文.docxVIP

山西医科大学硕士学位论文 山西医科大学硕士学位论文 I I TLR4基因多态性及信号转导相关因子与 军团菌感染的关系 中 文 摘 要 目的 ①初步探讨 TLR4 基因(2244G→A)位点多态性与军团菌感染的关系。②了解 MyD88 mRNA 表达与军团菌感染的关系；探讨 TLR4 基因(2244G→A)位点基因 多态性与 MyD88 mRNA 表达的关系。③了解 IFN-β、IL-10 与军团菌感染的关系； 探讨 TLR4 基因(2244G→A)位点基因多态性与 IFN-β、IL-10 表达的关系。 方法 ①采用聚合酶链反应（PCR）扩增肺部感染患者尿液中军团菌属特异性 16SrRNA基因，酶免疫检测法(EIA)检测其尿液中血清1型嗜肺军团菌抗原（Lp1 尿抗原），军团菌感染的判定标准为Lp1尿抗原阳性或16SrRNA基因扩增阳性。 ②采用PCR-RFLP技术检测25例军团菌感染者、66例其它非革兰氏阴性菌引 起的肺部感染者（病人对照组）、102例健康体检者的TLR4基因(2244G→A)位点 多态性。 ③采用real-time RT-PCR方法检测军团菌感染组、病人对照组和健康人对照 组MyD88 mRNA的表达水平，分析PBMC中MyD88 mRNA与军团菌感染的关系 及TLR4基因（2244 G→A）位点基因多态性与MyD88 mRNA表达的关系。 ④采用 ELISA 法检测军团菌感染组、病人对照组和健康人对照组 IFN-β、 IL-10 浓度，分析 IFN-β、IL-10 与军团菌感染的关系及 TLR4 基因(2244G→A)位 点基因多态性与 IFN-β、IL-10 的关系。 结果 ①健康人对照组 TLR4 (2244G→A)位点 A 等位基因发生频率（44.6%）高于 病例组（34%）和病人对照组（36.4%），差异无统计学意义（χ2＝3.243，p=0.198）。 病例组、病人对照组、健康人对照组 TLR4 (2244G→A)位点三种基因型频率差异 无统计学意义（χ2＝6.003，p＝0.199）；TLR4 (2244G→A)位点 GG / GA 和 AA 基因型频率在三组分布差异未发现统计学意义（p＝0.076），健康人对照组与病 例组比较 TLR4 (2244G→A)位点 GG/GA 和 AA 基因型频率分布差异有统计学意 义（p＝0.044），AA 基因型在健康人对照组的发生频率比病例组高。 ②病例组、病人对照组、健康人对照组三组人群PBMC中MyD88 mRNA的 表达量差异有统计学意义（F=6.625, p =0.002）；病人对照组MyD88的表达量高于 II II 健康人对照组，差异有统计学意义(p =0.000)，病例组MyD88的表达量高于健康 人对照组，但未出现统计学差异（p =0.095），病例组和病人对照组MyD88的表 达量差异无统计学意义（p =0.436）；病例组、病人对照组、健康人对照组TLR4 (2244G→A)位点三种基因型间MyD88 mRNA表达量差异均未发现统计学意义（p =0.408，p =0.235，p =0.174）；病人对照组、健康人对照组中AA基因型组MyD88 mRNA表达量高于GG/GA基因型组，但未出现统计学意义（Z= -1.461, p=0.144； Z=-1.791, p=0. 073）。 ③病例组、病人对照组、健康人对照组三组人群 IFN-β 浓度差异有统计学 意义（F=12.884，p =0.000），病例组和病人对照组 IFN-β 浓度均高于健康人对照 组，差异均有统计学意义(p =0.001, p =0.000 )，病例组和病人对照组 IFN-β 浓度 差异无统计学意义（p =0.982），病例组和病人对照组 IL-10 浓度与健康人对照组 比较均有不同程度的升高，但未出现统计学意义（F= 1.835,p = 0.166）；病例组， 病人对照组，健康人对照组三种基因型间 IFN-β、IL-10 浓度差异无统计学意义 （p =0.506 , p =0.497 , p =0.260；p =0.399, p =0.1, p =0.223），病人对照组、健康 人对照组中 AA 基因型组 IFN-β 浓度低于 GG/GA 基因型组，但未出现统计学差 异（Z=-1.155,p=0.248；Z=-1.617,p=0.106）,病人对照组 AA 基因型组 IL-10 浓度 高于 GG/GA 基因型组，差异有统计学意义（Z=-2.132,p=0.032），健康人对照组 AA 基 因 型 组 IL-10 浓 度 高 GG/GA 基 因 型 组 ， 但 未 出 现 统 计 学 差 异 （Z=-0.981,p=0.326）。 结论 ①TLR4 (2244G→A