TLR4在脑出血继发性损伤中脑水肿形成的炎性机制研究-神经病学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 目 录 中文摘要 1 ABSTRACT 6 中英文缩略词表 12 前 言 13 实验材料 17 实验方法 22 实验结果 33 讨 论 47 全文结论 52 参考文献 53 综 述 61 致 谢 69 学位论文独创性声明70 学位论文知识产权权属声明70 学位论文使用授权声明 70 中文摘要 中文摘要 TLR4 在脑出血继发性损伤中脑水肿形成的炎性机 制研究 硕士研究生：邝素军 导 师：田作军 教授 学 科 专 业：神经病学 中文摘要 研究背景: 脑出血(Intracerebral hemorrhage，ICH)为全球范围内较为常见的脑血管病， 在所有脑血管疾病中约占 10-30%，ICH 的致残率以及病死率相当高，给家庭乃 至社会带来沉重的负担，是威胁人类生命健康的三大类疾病之一。最近几十年 来，尽管针对 ICH 的研究从未驻足，但至今为止其发病机制仍然不明朗，且治 疗手段依然严重不足。因而，进一步深入研究 ICH 的发病机制及其防治手段， 具有非常重要的意义。有研究发现，发病之初并非 ICH 病情最严重的时期，而 是在出血后几天以后，随着继发性神经损伤的产生，进一步引起脑损伤以及神 经功能缺损才是 ICH 的发病的严重状况。因此，近几十年来，有关 ICH 的继发 性损伤发病机制以及防治手段探索逐渐成为医学界的研究热点。目前的研究认 为，血肿周围代谢状态异常，红细胞裂解所诱发的炎症反应是引起神经功能缺 损的主要因素，尤其是炎症反应在此过程中所产生的作用备受人们关注。研究 发现，ICH 后血肿周围的炎性细胞功能被激活，从而释放 TNF-α 等致炎因子， 进而促使细胞间的粘附分子表达量上调，血脑屏障受到破坏，单核巨噬细胞、 外周中性粒细胞等炎症细胞向血肿周围区域聚集，从而诱发炎症级联反应，加 重神经细胞的死亡以及脑水肿的程度，最终导致神经功能缺损以及脑损伤加剧。 1 广州医科大学硕士学位论文 广州医科大学硕士学位论文 但至今为止，脑出血导致炎症反应的下游级联关系仍不明晰。 TLRs（Toll-like receptors）是近十多年来研究较为热门的受体，目前为止 发现人类基因组中共有 11 种 TLR，命名分别为 TLR1-11，它属于 IL-1 受体超 家族成员，是人类经过长期进化而保留的天然防御机制之一，能介导天然免疫。 TLR4 在革兰阴性菌感染过程中作为各种内毒素的跨膜受体的作用而得到广泛 认同。此外，早期有实验证实 TLR4 能参与脑缺血再灌注损伤，TLR4 激活的炎 症反应是缺血性脑卒中后继发性脑水肿形成的重要环节，但 TLR4 是否通过介 导炎性机制在脑水肿形成的病理演变过程中发挥作用，尚不得而知。肿瘤坏死 因子-α（Tumor Necrosis Factor-alpha，TNF-α）是一种重要的炎性因子，高等动 物体内主要由单核巨噬细胞可以产生，此外在脑神经元、各种免疫细胞以及某 些肿瘤细胞等均可以生成。TNF-α 能够促进血小板活化因子以及血管内皮细胞 组织因子的产生，进而影响某些血管收缩活性物质的表达，通过细胞间粘附分 子诱导炎症细胞向神经组织方向迁移，参与炎症反应。水通道蛋白 4 (Aquaporin 4，AQP4)是一种与水通透相关的跨膜转运蛋白，水分子能在大脑内流动主要是 靠 AQP4 提供的关键通道，因而 AQP4 是反应脑水肿的重要指标，其影响水分子 的跨膜转运和控制细胞内外水势平衡。此前有脑水肿实验模型表明，AQP4 在 各种因素引起的脑水肿的发生与发展过程中扮演着重要的角色。TNF-α 等炎性 因子诱发脑水肿可能是通过多种机制破坏正常的血脑屏障，进而诱导 AQP4 表 达上调，从而加重脑水肿状况，产生级联放大效应。而 TLR4 作为炎性信号通 路的关键受体，能激活其信号通路下游的炎性反应，从而介导炎性损伤，此中 过程极有可能是通过上调 AQP4 的表达，介导脑水肿的形成。 TLR4 炎性信号转导激活后，启动通路下游一系列的炎症反应，进而激活 炎症细胞，分泌炎性因子，产生级联放大效应，从而加剧炎性损伤，此过程是 缺血性脑卒中继发性脑水肿形成的关键环节。因 TLR4 具有强大的炎性效应， 所以 TLR4 很有可能在脑出血继发性脑损伤的炎性机制中具有关键作用，但 TLR4 是否通过介导炎性反应，上调 AQP4 表达参与脑出血后脑水肿形成，国 内外尚未有研究报道证实。本课题采用大鼠脑出血模型，研究 TLR4 及其炎性 反应途径下游相关指标 TNF-α，与 AQP4 及脑水肿的相关性及联系，探索脑出 2 中文摘要 中文摘要 血后继发性损伤中脑水肿形成的炎性机制，将有助于开发调节 TLR4 信号通路 的拮抗剂，对阻断炎性级联反应下游信号转导，遏制炎症瀑布效应，减轻水肿， 减少神经元的