TLR4及其调控因子SOCS3在IgA肾病发病机制中作用的初步探讨-内科学(肾脏内科)专业论文.docxVIP

摘要 摘要 万方数据 万方数据 摘 要 目的： 初步探讨 Toll 受体 4（Toll-like receptor-4,TLR4）及其调控因子细胞因子信 号传导抑制因子 3（suppressor of cytokine signaling-3,SOCS3）在人类 IgA 肾病(IgA nephrology,IgAN)中的作用及机制。 方法： 收集 IgAN 患者及健康正常人(对照组)的一般资料及 IgAN 患者的临床、病 理资料。采用 Ficoll 法分离 21 例 IgAN 患者和 21 例正常人的外周血单个核细胞 (peripheral blood mononuclear cell,PBMC)，实时荧光定量 PCR 技术（real-time polymerase chain reaction ,real-time PCR）检测 IgAN 患者和正常对照组 PBMC 中 TLR4 和 SOCS3 mRNA 的相对表达量；蛋白免疫印迹法（Western blotting,WB） 检测 IgAN 患者和正常人 PBMC 中 TLR4 和 SOCS3 的蛋白相对表达量；免疫组 织化学染色（Immunohistochemistry staining,IHC）方法观察 TLR4 和 SOCS3 在 21 例 IgAN 患者肾组织和 5 例肾肿瘤行肾切除患者正常肾组织的表达定位并进 行半定量分析。比较 IgAN 患者外周血及肾组织中 TLR4 和 SOCS3 表达量与健 康对照组间的差异，相关分析法分析其与临床、病理资料的相关性。 结果： （1）Real-time PCR 结果：IgAN 患者 PBMC 中 TLR4 和 SOCS3 mRNA 的 表达水平较正常对照组增高，差异无统计学意义。 （2）Western blotting 结果：IgAN 患者 PBMC 中 TLR4 和 SOCS3 蛋白的表 达水平较正常对照组升高，其中 TLR4 蛋白表达量显著高于正常对照组，差异有 统计学意义（P 0.01）。 （3）免疫组织化学结果：TLR4 和 SOCS3 在肾切除患者正常肾组织的肾小 球、肾小管中仅有少量表达，而在 IgAN 患者肾组织的肾小球、肾小管中的表达 量明显高于正常对照组。 （4）相关性分析结果：IgAN 患者肾组织中，TLR4 在肾小球中的表达量与 III 尿红细胞计数成正相关，在肾小管中的表达量与血肌酐、血尿素氮、血尿酸均 成正相关，与肾小球滤过率成负相关；SOCS3 在肾小球中的表达量与 24 小时尿 蛋白定量成正相关，与血浆白蛋白、总蛋白成负相关，在肾小管中的表达量与 尿隐血成正相关。IgAN 患者 PBMC 中 SOCS3 蛋白相对表达量与 TLR4 蛋白相 对表达量成正相关。 结论： IgAN 患者 PBMC 及肾组织中 TLR4 和 SOCS3 的表达量均较正常对照组升 高，且与肾脏损害程度正相关，提示 TLR4 和 SOCS3 可能均参与了 IgAN 的发 生发展。 关键词：IgA 肾病；TLR4；SOCS3 IV Abstract ABSTRACT Objective： To explore the effect of Toll-like receptor-4 (TLR4) and it’s regulatory factor-suppressor of cytokine signaling-3 (SOCS3) in the immunological mechanism of IgA nephropathy(IgAN). Methods： 21 IgAN patients and 21 normal subjects were researched. All patients were pathologic diagnosed primary IgA nephropathy excluding secondary reasons．None of the patients have been treated with glucocorticoid or immunosuppressants in one month． The PBMC of IgAN patients and normal controls were separated by Ficoll method. Detecting the mRNA levels of TLR4 and SOCS3 by real-time polymerase chain reaction . The TLR4 and SOCS3 protein levels were detected by western blotting. Immunohist