TLR4介导的P38MAPK信号通路对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征伴高血压大鼠脂肪因子的影响-内科学专业论文.docxVIP

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TLR4介导的P38MAPK信号通路对阻塞性睡眠呼吸暂停综合征伴高血压大鼠脂肪因子的影响-内科学专业论文

PAGE PAGE 10 TLR4 介导的 p38MAPK 信号通路对阻塞性睡眠呼 吸暂停综合征伴高血压大鼠脂肪因子的影响 中 文 摘 要 目的:研究 TLR4 介导的 p38MAPK 信号通路在阻塞性睡眠呼吸暂停综 合征(Obstractive Sleep Apnea Symptom,OSAS)伴高血压大鼠脂肪组织、 脂肪细胞中的表达,和对脂肪细胞因子 leptin 的影响,探讨 OSAS 伴高血压 可能的发病机制。 方法:45 只健康雄性 SD 大鼠随机均分为间歇低氧 4 周组、间歇低氧 6 周组和正常对照组,间歇低氧 4 周组和 6 周组大鼠放入实验舱中,循环充 入氮气和氧气, 每次循环 90s, 每天间歇性低氧 8h, 正常对照组大鼠暴露于 空气中不予任何特殊处理。分别测定实验前和每周试验后各组大鼠尾动脉 血压。于间歇低氧 28、42d 后分别处死间歇低氧 4 周组和 6 周组大鼠,HE 染色观察各组大鼠心肌、肾动脉的病理变化,ELISA 法检测各组大鼠血浆 中 leptin 含量的变化,RT-PCR、Western-Blot 法检测脂肪组织中 TLR4、 p38MAPK mRNA 和蛋白的表达; 取各模型组大鼠脂肪组织进行原代培养脂肪细胞,显微镜下观察细胞 形态改变,流式细胞仪检测细胞增殖活性; 油红 O 染色法进行细胞鉴定; 各组原代脂肪细胞分为 12 组: 正常对照组,间歇低氧 4 周对照组,间歇低 氧 6 周对照组,脂多糖诱导正常组,脂多糖诱导间歇低氧 4 周组,脂多糖 诱导间歇低氧 6 周组,TLR4 阻滞正常组,TLR4 阻滞间歇低氧 4 周组,TLR4 阻滞间歇低氧 6 周组, p38MAPK 阻滞正常组, P38MAPK 阻滞间歇低氧 4 周组,p38MAPK 阻滞间歇低氧 6 周组。收集上述各组脂肪细胞,利用 RT-PCR 法和 Western-blot 法分别检测 TLR4、p38MAPK mRNA 和蛋白的表 达,另收集上述各组脂肪细胞培养液,利用 ELISA 法测定培养液中 leptin 的含量。 结果:1 模型大鼠血压逐渐升高,且出现以心肌细胞肿胀、肾动脉管 壁增厚为特征的相关 OSAS 病理改变,从而成功建立 OSAS 合并高血压大 鼠模型。 2 与正常对照组相比,间歇性低氧 4 周组、间歇性低氧 6 周组血清 leptin 含量升高(P0.05,P0.01),且间歇性低氧 6 周组升高更显著(P0.05)。 3 与正常对照组相比,间歇低氧 4 周组、间歇低氧 6 周组脂肪组织 中 TLR4、p38MAPK mRNA 和蛋白表达水平均显著升高(P0.05,P0.01)。 4 成功培养原代大鼠脂肪细胞。细胞 24 小时贴壁时为类圆形,3 d 后 渐成梭形或多角梭形,6d 左右进入指数增长期;流式细胞仪检测证明细胞 具有增殖分化能力;经诱导分化为成熟脂肪细胞,油红 O 染色可见细胞内 出现红染颗粒. 5 TLR4 介导 p38MAPK 信号通路在脂肪细胞中的表达:与对照组相 比,脂多糖可以上调 TLR4、p38MAPK mRNA 和蛋白的表达(P0.01, P 0.05);TLR4 阻滞剂可以下调 TLR4、p38MAPK mRNA 和蛋白的表达 (P0.01,P0.05);p38MAPK 阻滞剂仅下调 p38MAPK mRNA 和蛋白的 表达(P0.05),对 TLR4 表达无意义。 6 大鼠脂肪细胞中 TLR4 介导的 p38MAPK 信号通路对 leptin 分泌的 调控:与对照组相比,脂多糖预处理组分泌 leptin 增加(P0.01),TLR4 阻滞剂组分泌 leptin 减少(P0.05),P38MAPK 阻滞剂组分泌 leptin 无意义 (P0.05)。 结论: TLR4 介导的 p38MAPK 信号通路在脂肪组织和脂肪细胞中表 达,并通过对脂肪因子 leptin 的调控影响 OSAS 合并高血压病情进展,为进 一步寻找更有效的治疗方法打下基础。 关键词:阻塞性睡眠呼吸暂停综合征;高血压;toll 样受体 4;p38 丝裂 原活化蛋白激酶;瘦素 Effect of TLR4-Dependent P38MAPK Pathway on Adipokine of Obstractive Sleep Apnea Syndrome with Hypertension Rats ABSTRACT Objective: To investigate the expression of toll-like receptor4(TLR4) -dependent p38MAPK pathway on rat adipose tissues and adipocytes of obstr

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