VKORC1基因多态性与河南汉族人群缺血性脑血管病的相关性研究-医学遗传学专业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 VKORCl 基因多态性与河南汉族人群 缺血性脑血管病的相关性研究 研究生:杨林燕 导师:郑红教授 郑州大学基础医学院医学遗传学与细胞生物学教研室 问南郑州 450052 摘要 背景与目的: 缺血性脑血管病( ischemic cerebrovascular disease ，ICVD)是目前发病率、 致残率和死亡率都比较高的神经系统疾病，其发生、发展是一个非常复杂的过. 程，是一种多基因遗传病，受遗传和环境因素相互作用的影响，其中遗传因素 起着非常重要的作用。 ICVD 的遗传因素受到多种层次、水平和途径的限制， 目前经各国学者研究发现的与 ICVD 相关的基因多态性有以下几个方面:①凝 血系统:②肾索…血管紧张素系统;@脂代谢系统:④同型半肮氨酸代谢系统: ⑥炎症反应:⑥基质沉积:⑦其他。本课题对凝血系统中的维生素 K 环轼化物 还原酶亚单位 1 CVitamin K 叩oxide reductase subunit 1，VKORC 1 )基因一 1639A1G 和 1173C/丁位点多态性与河南汉族人群的缺血性脑血管病的易感性的 相关关系进行研究，并参考文献与其他国家和地区的多态性分布作比较。 维生素 K 是脂恪性维生素，由于具有促进凝血的功能，故又称凝血维生素。 维生索 K 依赖性蛋白有: 11 、vn、胀、X 凝血因子，这些因子有促凝血作用; 蛋白质 C，蛋白质S 和蛋白质 Z ，具有抑制凝血功能。这些蛋白质因子发挥洒性 均依赖于谷氨酸残基关键的竣化作用，维生素 K 则是谷氨酸残基竣化作用的辅 因子。依赖维生索 K 的矮化反应是在肝细胞内质网进行的，在血液凝固过程中， +凝血酶原分子 N 末端具有的 y-竣基谷氨酸残基经竣化与 Ca2 擎合，被蛋白酶水 解而转变为凝血酶。凝血酶照上特定的谷氨酸残基的殿基化，是在依赖于维生 + 素 K 的谷氨酸竣化酶催化下完成的。一且缺乏维生素 K，则不能形成正常的凝 血酶尿，不能转化为凝血酶，继而影响血液凝固。因此，维生素 K 是凝血酶照 中谷氨酸残基竣化作用的辅因子。 VKORCl 是肝脏内维生素 K 循环的关键酶， 它能把无活性的氧化型维生素 K 还原为有活性的还原型维生素 K，促进维生素 K 的循环利用，从而使维生素 K 依赖性的凝.ún.因子得以维持稳定水丰。由于 VKORCl 参与血管生成及凝血机制，所以对心脑血管疾病的发病风险有一定的 影响。 VKORCl 基因内存在着大量的多态性位点，由于 VKORCl 蛋白是华法林 作用的受体， VKORCl 慕因多态性与华法林的剂量关系成为当前研究的热点， 但是，目前尚未见 VKORCl 1639A1G 基因多态性与脑血管疾病的相关性研究 报道， VKORCl 1173CIT 基因多态性与脑血管病的研究在国内也未见报道。本 研究利用聚合酶链反应…限制性片段长度多态性 (PCR-RFLP) 技术，在河南汉族 人群中对 VKORCl 1639A1G 和 1173C/T 位点多态性进行检测，探讨其分布情 况，并进一步探讨该位点多态性与 ICVD 是否关联。 研究对象: 1.病例组 ;iZt取 2006 年 7 月至 2009 年 8 月在河南省二甲以上医院神经内科住院的 ICVD 患者 370 例，经临床检查(病史、体征、生化检验、 CT 或 M阳)确诊， ICVD 的诊断参照第四届脑血管会议修定缺血性脑血管病的诊断标准。排除心源性栓 塞、低血容量、感染所致的脑梗死和无症状性脑梗死。其中男 221 例，女 149 例，年龄 (59.9士 11.6) 岁。 2. 对照组 选自同期健康体检的随机个体 408例，无脑血管病、冠心病和其他周围血管 病史，其中男 266例，女 142例，年龄 (52.9土 12.7) 岁。 以上两组研究对象均为河南地区汉族人，饮食结构相似，各研究对象之间 11 PAGE PAGE III 无血缘关系，排除癫痛、癌症及肝肾功能不全、接受器官移植、严重营养不良 等疾病患者。均是在研究对象知情同意的原则下进行。 研究方法: 采集研究对象外周静脉血 3 mL， ED丁A 抗凝，常规盼/氯仿法提取基因组 DNAo 设计引物， PCR 扩增目的片段，限制性内切酶 Msp 1 、Sty 1酶切， 2% 琼脂糖凝股电泳检测基因型，在紫外分析凝胶成像仪上观察基因型并照相分析。 统计学处理: 统计并计算 ICVD 患者与正常人群的基因型频率和等位基因频率。用. Ha町rd句y 15.0 软件包j进桂行统计学处 3理盟 o 用χ2 检验计算 ICVD 组与正常人群之间基因型频 率和等位基因频率的差异，井计算比数比(