XIAP在甲状腺乳头状癌中的表达及基因沉默对细胞生物学行为的影响-内科学(内分泌与代谢病)专业论文.docx

PAGE PAGE 10 中文摘要 近年来，甲状腺癌的发病率呈上升趋势，以乳头状癌的升高最为明显。甲 状腺乳头状癌是最常见的甲状腺恶性肿瘤, 约占所有甲状腺恶性肿瘤的60-80%, 占全身恶性肿瘤的1.0-1.5%。甲状腺乳头状癌存在增殖失控、凋亡受阻等生物学 特性，且侵袭能力较强，淋巴结转移率高，术后复发率较高，二次手术效果不 佳，目前尚缺乏内科及生物学治疗方法。 X-连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein，XIAP）是凋 亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein，IAP）家族最重要的成员之一，它被 认为是家族中最具有特征性及功能最强的内源性Caspase抑制因子，在生理学上 是细胞死亡的关键性调节因子。研究显示，XIAP在正常的组织中呈低表达或不 表达状态，而在多种恶性肿瘤中高表达，如在肺癌、胸腺癌、胰腺癌、宫颈癌， 白血病中高表达，在卵巢癌也有许多相关报告。体外试验及动物实验均研究表明， XIAP通过抑制细胞凋亡及促进细胞增殖、生存、迁移、侵袭及肿瘤血管形成等 在肿瘤发生发展过程中发挥瘤基因的重要作用。由于XIAP在恶性肿瘤中过表达， 而在正常的组织中低表达甚至不表达，且最新研究显示敲除正常大鼠XIAP基因 后大鼠未发现明显病理变化，提示敲除XIAP可能对正常细胞无毒性。基于以上 特性，XIAP基因被认为是具有潜力的肿瘤治疗靶点, 已成为肿瘤治疗和药物开发 的热门靶基因。 RNAi是近几年发展起来的新技术，是外源性和内源性双链RNA在生物体内 诱导同源靶基因的mRNA特异性降解，导致转录后基因沉默的现象。RNAi具有 高度序列特异性、抑制基因表达的高效性、稳定性及可传播性。目前常用的RNAi 实验方法由直接转染双链siRNA及载体（质粒或病毒）表达发卡RNA两种，由于 慢病毒载体能转染分裂期与非分裂期细胞，具有转染率高，基因抑制表达作用 强，持续时间长等特性，且病毒的遗传物质能整合到宿主的基因组。通过慢病 毒载体介导的RNAi，使长效抑制目的基因表达成为可能。 尽管目前已经证明XIAP与某些恶性肿瘤发生发展存在密切相关，而且也展 现出作为肿瘤治疗靶点的潜力，但目前有关甲状腺乳头状癌与XIAP之间的文献 较少，为此我们研究XIAP在甲状腺乳头状癌中的表达情况及用RNAi对其细胞生 物行为的影响，以期对甲状腺乳头状癌提出新的生物学治疗策略。 1. 目的 第一部分 XIAP在甲状腺乳头状癌中的表达及意义 （1）检测XIAP在甲状腺乳头状癌、甲状腺腺瘤及正常甲状腺组织中的表达 （2）研究XIAP的表达与甲状腺乳头状癌临床病理参数的关系 2. 材料与方法 （1）收集病例资料：收集本院接受手术并病理证实甲状腺乳头状癌、甲状 腺腺瘤及甲状腺正常组织标本，详细记录病人资料。 （2）研究XIAP在甲状腺乳头状癌、甲状腺腺瘤及甲状腺正常组织的表达： 免疫组织化学染色法。 结果 （1）XIAP在甲状腺乳头状癌组织中是高表达的，81.6%（40/49）标本为阳 性表达。 （2）对 49 例甲状腺乳头状癌患者的临床资料进行卡方检验及 t 检验，研究 XIAP 与临床病理参数之间的关系。男性患者中 XIAP 阳性率为 76.9%（10/13）， 女性患者中 XIAP 阳性率为 80.6%（29/36）,两组之间无显著性差异（P=0.780）。 XIAP 阳性表达患者年龄为 46.18±15.24 岁， XIAP 阴性表达患者年龄为 43.22 ±11.35 岁,两组之间无显著性差异（P=0.520）。术前发生淋巴结转移 XIAP 阳性 表达率为 86.7%（13/15），术前未发生淋巴结转移 XIAP 阳性表达率为 79.4% （27/34），两组之间不存在显著性差异（P=0.546）。 XIAP 阳性表达患者肿瘤直径为 1.98±0.59 厘米， XIAP 阴性表达患者肿 瘤直径为 1.53±0.52 厘米，两组之间有显著性差异（P=0.041）。术前发生甲状腺 外浸润 XIAP 阳性表达率为 95.4%（21/22），术前未发生甲状腺外浸润 XIAP 阳 性表达率为 70.4%（19/27），两组之间存在显著性差异（P=0.024）。处于疾病早 期（Early stage，I+II 期）的甲状腺乳头状癌患者中 XIAP 阳性率为 69.6%(16/23)， 进展期（Advanced stage，III+IV 期）甲状腺乳头状癌患者中 XIAP 阳性率为 92.3% （24/26），两组相比有显著性差异(P=0.040)，进展期 XIAP 表达水平高于早期。 经典型的甲状腺乳头状癌患者中 XIAP 阳性率为 63.2%（12/19），滤泡型的甲状 腺