不同孕激素对乳腺癌细胞增殖的影响及机制研究-临床医学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得 的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含 任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，与我一同工作的同志对本研 究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即： 学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、 缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或 机构送交论文，并编入有关数据库。 保密 ，在 年解密后适用本授权书。 本论文属于  不保密 。 (请在相对应的方框内打“√” ) 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 导 师 签 名 ： 日期： 年 月 日 天津医 天津医科大学硕士学位论文 中文摘要 目的 探讨不同孕激素对乳腺癌细胞增殖的影响及可能机制，并为临床激素替代 治疗合理选择用药种类及用药方案提供实验依据。 方法 体外培养两种乳腺癌细胞系，MCF-7细胞系(ER+、PR+)和MDA-MB-231 细胞系(ER-、PR-)，应用不同浓度(10-8M，10-7M，10-6M，10-5M)的不同孕激素(天 然黄体酮、醋酸甲羟孕酮、左炔诺酮、炔诺酮、屈螺酮、地屈孕酮、醋酸甲地 孕酮、诺美孕酮、去氧孕烯、醋酸环丙孕酮)及不同浓度(10-14M，10-12M，10-10M， 10-8M，10-6M)雌激素(17β-E2)对MCF-7乳腺癌细胞和MDA-MB-231乳腺癌细胞进 行单独刺激、连续联合刺激及序贯刺激，采用雌激素受体拮抗剂氟维司群(FUL) 和孕激素受体拮抗剂米非司酮(RU486)与雌孕激素单独或联合刺激细胞，应用 MTT法检测各个刺激实验中两种乳腺癌细胞系的增殖情况，单纯DMEM培养液 组为阴性对照组。将各组实验结果输入Spss19.0统计软件包内进行统计分析，以 了解不同孕激素及雌激素、不同激素刺激方案及加用雌孕激素受体拮抗剂对两 种细胞增殖的影响。 结果 1、不同孕激素单独刺激MCF-7细胞实验显示：屈螺酮(DRSP)及去氧孕烯 (DSG)在10-7M浓度时增殖率分别为117.71%±1.55%及112.24%±4.32%，10-6M时增 殖率为120.77%±2.71%及119.35%±2.91%，与阴性对照组相比均有显著统计学差 异(P＜0.01)，炔诺酮(NET)在10-7M时增殖率为103.70%±3.08%，与阴性对照组相 比无统计学差异，10-6M浓度增殖率约为110.00%±2.49%，与阴性对照组相比具 有显著统计学差异(P＜0.01)。而DRSP、NET、DSG在10-5M时与阴性对照组相比 均无统计学差异。醋酸甲羟孕酮(MPA)、天然黄体酮(P4)、诺美孕酮(NOM)、醋 酸环丙孕酮(CYP)、醋酸甲地孕酮(MA)、地屈孕酮(DYD)及左炔诺孕酮(LNG)各 浓度对细胞的增殖率与阴性对照组相比均无统计学差异。 2.、雌激素对MCF-7细胞单独刺激实验显示：10-14M、10-12M的17β-E2对细胞 无增殖作用， 10-10M 时增殖率为 111.97%±5.41% ， 10-6M 时 增 殖 率 为 108.20%±4.04%，与阴性对照组相比均有统计学差异(P＜0.05)。10-8M时增殖率 为 118.57%±6.01%，与阴性对照组相比具有显著统计学差异(P＜0.01)。 3、低浓度17β-E2与不同孕激素序贯方案刺激MCF-7细胞的增殖率较联合方 案低，但二者差异无统计学意义。 4、受体阻断剂实验结果显示雌孕激素刺激时加入雌激素受体拮抗剂氟维司 I 群(FUL)组及加入两种受体拮抗剂组对 MCF-7 细胞的增殖率与阴性对照组无 统计学差异，而加入孕激素受体拮抗剂米非司酮(RU486)组的增殖率仍高于阴性 对照组，其差异有显著性统计学意义。 5、对于MDA-MB-231细胞系，无论是雌孕激素单独刺激还是联合及序贯刺 激，与阴性对照组相比，增殖率均无统计学差异。 结论 1、雌激素刺激MCF-7 乳腺癌细胞显示在17β-E2浓度低于10-10M时无明显 增殖作用，高于10-10M时增殖作用明显，在10-8M时达到最高，故在进行HRT治 疗时应选用最低有效作用浓度的雌激素，对乳腺相对安全。 2、不同孕激素对乳腺癌增殖作用不同，DRSP、DSG 及 NET 对 MCF-7 细 胞有明显增殖作用，呈现一定的浓度依赖性，P4、NOM、MPA、CYP、MA、LNG、 DYD 对 MCF-7 无明显增殖作用。在应用 HRT 添加孕激素时，孕激素种类应当 谨慎选择，尽量