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广斧螳卵鞘水提物对非酒精性脂肪肝小鼠影响 　　摘要：为了研究广斧螳（Hierodula patellifera ootheca）卵鞘防治脂肪肝的作用，将56只小鼠随机分为5个组，正常组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组，30 d后测定血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）；制备肝匀浆并测定肝脏TC、TG；取肝脏，称湿重，计算其肝指数。结果表明，与正常组相比较，模型组动物血清TC、TG显著降低，肝指数极显著增加（P0.01），卵鞘水提物可显著降低该脂肪肝模型小鼠肝脏TC、TG，与模型组比较有显著差异（P0.05）；但卵鞘水提物对该脂肪肝模型小鼠血清TG无明显影响。广斧螳卵鞘水提物具有治疗小鼠非酒精性脂肪肝的作用，其作用机制与降低肝脏TC、TG有关。 　　关键词：广斧螳（Hierodula patellifera ootheca）卵鞘；水提物；非酒精性脂肪肝；肝指数；胆固醇；甘油三酯 　　中图分类号：Q485 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）15-3550-03 　　广斧螳[1]（Hierodula patellifera ootheca）为药食两用昆虫，其虫体衍生物卵鞘可入药，是医学上比较重要的中药[2]。卵鞘入药性平、味甘咸、入肝、肾经，具有补肾、助阳、固精、缩尿等功能[3]；主治肾阳不足、遗精、阳痿、早泄、白浊、赤白带下、小便频数、遗尿等症状[4，5]。脂肪肝的病变主体在肝小叶，以肝细胞弥漫性脂肪变性为主要病理改变[6]。非酒精性脂肪肝更为复杂化，包括“二次打击”因素，从而导致炎症反应和肝纤维化发生[7]。在治疗该病征时，大多用植物药极少用动物药，利用昆虫衍生物入药的甚少[8]。本研究以广斧螳的衍生物，即其卵鞘单味剂入药，观察广斧螳卵鞘水提物对非酒精性脂肪肝小鼠血液及肝组织的干预作用，探讨了其对非酒精性脂肪肝的治疗效果。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　1.1.1 原料 药物（广斧螳卵鞘）：秋季野外采捕雌性广斧螳回室内产卵收集，或从贵州省贵阳市中药材市场采购鉴定为昆虫纲直翅目螳科斧螳属（Hierodula Burmeister）广斧螳的卵鞘。80～100 ℃鼓风烘烤4 h，打粉过80目筛，取药材粉末5 g，其余药材粉末封装好后置于-80 ℃冰箱备用。参照国标GB/T 5009.6-2003，采用索氏提取法提取[9]，再用旋转蒸发仪浓缩成1 g/mL的原药液存入4 ℃冰箱保存，待测时用去离子水稀释成8%、4%、0.8%的灌胃药液。 　　试验动物：昆明种小鼠56只，清洁级，雌雄各半，体重18～22 g，购自重庆市滕鑫实验动物有限公司，动物合格证号：Scxk（渝）2007-0006。 　　1.1.2 主要试剂 胆固醇，胆酸钠，丙基硫氧嘧啶，TC试剂盒，TG试剂盒，CCl4，异丙醇，蔗糖（购自附近超市散称白砂糖），猪油（购自附近农贸市场，经炼制后使用），福尔马林，石蜡，二甲苯，无水乙醇，苏木精，加拿大树胶等。 　　1.1.3 试验仪器 酶标仪（德国莱卡，Leica），R-201型旋转蒸发仪，高速万能粉碎机，超低温冰箱，索氏提取仪，202型电热恒温干燥箱，超纯水仪（美国颇尔，Pall），冷冻离心机（美国西格玛，Sigma），2084型激光扫描共聚焦显微镜，移液器（德国，Eppendorf），80目筛，手术刀，止血钳，蜡盘，眼科剪，固定针，研钵等。 　　1.2 方法 　　脂肪肝动物模型造模方法按参考文献[10]，略加修改。配制复方高脂饲料：2%胆固醇+0.5%胆酸钠+0.2%丙基硫氧嘧啶+5%蔗糖（高温下转化为焦糖后使用）+10%猪油+82.3%基础饲料，由贵州大学昆虫研究所实验室自行配制生产。 　　56只小鼠随机分为5个组，正常组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组，试验前适应环境3 d，自由饮水，取食基础饲料。其中，正常组：常规方法饲养30 d；模型组：复方高脂饲料+5% CCl4 0.2 mL/（次·d）饲养15 d，第16天采用常规饲养方法，常规饲养15 d。高剂量组：在模型组基础上第16天灌胃卵鞘水提物833.3 mg/（kg·d）；中剂量组：在模型组基础上第16天灌胃卵鞘水提物416.7 mg/（kg·d）；低剂量组：在模型组基础上第16天灌胃卵鞘水提物83.3 mg/（kg·d）。高、中、低剂量组灌胃卵鞘水提物治疗15 d，并常规饲养15 d。 　　动物处死前禁食12 h，称体重，尾部取血，若有浑浊则离心（3 500 r/min，10 min），取上清液用生理盐水稀释成不同浓度，用酶标仪测定TC、TG。处死小鼠，迅速剪开腹腔并观察肝脏形态。取出完整肝脏，用滤纸吸干表面水分后称重，计算肝指数，肝指数=肝脏重量（g）/体重（g）×100。完整分离肝脏左叶用1