猪il2对jev eⅲppv vp2共表达基因疫苗免疫原性影响的初步研究-effect of porcine il 2 on immunogenicity of jev e ⅲ ppv vp2 co-expressed gene vaccine.docxVIP

下载本文档

2
0
约7.46万字
约 64页
2018-09-09 发布于上海
举报
版权申诉

猪il2对jev eⅲppv vp2共表达基因疫苗免疫原性影响的初步研究-effect of porcine il 2 on immunogenicity of jev e ⅲ ppv vp2 co-expressed gene vaccine.docx

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

猪il2对jev eⅲppv vp2共表达基因疫苗免疫原性影响的初步研究-effect of porcine il 2 on immunogenicity of jev e ⅲ ppv vp2 co-expressed gene vaccine

阳川山川A『州阳川山川A『州M州。川MMAaT 唰唰川nu 恻呻n唰u 川川川00 川阳川m相at- 州州Y 本研究分别扩增 ]EV CQRC 1 株 E 蛋白结构城111上统性中和抗原表位 E1II 基因和 PPV SC寸株 VP2 基因，然后运用重叠 PCR 将 VP2 基因和日11 基因通过 Linker 连接构建得到融合基因 EIII-V凹，并将其定向克降到 pMD19 TSimple 载体上。再将 EII1飞VP2 目的基因走向插入真核表达载体 pcDNA3. 1 (+)得到共表达童组质粒 pcDNA-EIII.VP2o PCR 扩增猪 IL-2 基因，将其定向插入真核载体 pcDNA3.1(+) 和重组载体 pcDNA-巴 III .VP2 得到重组质粒 pcDNA-IL2 和 pcDNA-IL2-EII1 .VP2? 采用脂质体介导法将重组质粒 pcDNA-E1II 飞VP2 和 pcDNA IL2- 四日.VP2 DNA 转染哺乳动物细胞 Vero 细胞，其表达产物通过盯 -PCR 和间接免疫荧光法检测目的基囚的转录与表达，能观察到目的条带和间接免疫荧光，证明成功构建了 pcDNA…四日.VP2 和 pcDNA-IL2- E1II.V归真核载体。将重组质粒 pcDNA-IL2-EIII.VP2 (A 组)、 pcDNA寸L2/pcDNA-EIII .VP2 (pcDNAIL2 先于 pcDNA-EIII.VP2 三天注射， B 组)、 pcDNA EIII.VP2/pcDNA- IL2 (pcDNA-E1日.VP2 先于 pcDNA-四 IL2 二天注射， C 组)、 pcDNA-E1II.VP2 (D组)免疫 BALB/c 鼠，同时设立猪细小灭油苗 (E 组)、猪乙脑弱毒疫苗 (F 组)和 pcDNA3. 1 (+)空载体组 CG 组)作为对照组，免疫 3 次，间隔两周 b 通过检测免疫小鼠血清 ]EV CPPV) 抗体效价、脾淋巴细胞增殖功能、外周血 T 细胞亚群值变化比较了重组猪 IL-2 对 pcDNA-EIII飞VP2 核酸疫苗免疫增强作用。结果显示首免 1 周后各实验组 JEVIPPV 抗体水平明显高于空载体对照组， A 、C 组显著成极显著高于 D 组， B 组抗体水平工免后上升较快，显著商于 D 组。细小疫苗组 PPV 抗体水平除第 5 周显著低于 D 组外，其他时间与 D 组抗体水平差异均不显著。乙脑疫苗组 JEV 抗体水平第 5 周与 A 、B 、C 三组笼异不显著，其他时间显著或极显著高于 A-D 四细。二免后，各组均能诱导小鼠产生较强的脾细胞增殖， A 、 B、C 组 SI 值显著成极显著高于 D 组，其中 A、C 组极显著高于 B 组，质粒组 L SI 值始终高于细小疫苗组，却低于乙脑疫苗组。 CD4+值和 CD4/CD8 值显示 A 、B 、 C 主组值均高于 D 组，其中 A 组最高，但 A 、B、C 三组问 CD8+值差异不具统计学意义 C PO.O日，各组 CD4\ CD8但都低于乙脑疫苗组，高于细小疫苗组。结果表明，共表达真核质粒 pcDNA EII1.VP2 能诱导小鼠产生…寇的体液和细 II II 胞免疫:重组猪 IL 2对pcDNA-EIII.VP2共表达核酸疫苗免疫原性有很好的增强作用，其中 IL-2与日II飞VP2形成融合基因构建的核酸疫苗免疫效果最好。研究结果为新型、高效的乙脑和细小疫苗提供了数据参考。关键词z 猪 IL-2 基因; VP2基因; EIII 基因:核酸疲苗: 免疫原性 ‘ r Preliminary research on the immunogenicity of the pig interleukin 2 (IL-2) on coexpression DNA vaccine with JEV EIII飞PPVVP2 Xiao Yi-rong(M碍。r: Preventive Veterinary Medicine) Directed by Professor Wang Yin (Sichuan Agriculture University，Yaan，Sichuan卫R.China，625014) Abstract In this research ，VP2 gene ofPPV Virus Strain SC-l and linear neutra1 antigen epiposition EIIIgene ofEIII of JEV Virus Strain CQRC-l was amplified ，and 甘len they w盯e fused in