转染adam17-shrna的bmsc对mcf-7人乳腺癌细胞的影响-effects of bmsc transfected with adam 17 - shrna on mcf - 7 human breast cancer cells.docxVIP

万方数据 万方数据 Effects of BMSC Transfected with ADAM17-shRNA on the Human MCF-7 Breast Cancer Dissertation Submitted to Hebei United University in partial fulfillment of the requirement for the degree of Master of Medicine by Ding Hua ( Surgery) Supervisor: Professor Zhang Xuepeng June, 2014 独 创 性 说 明 本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究 工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的 地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含 为获得河北联合大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材 料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了 明确的说明并表示了谢意。 论文作者签名： 日期： 年 月 日 关于论文使用授权的说明 本人完全了解河北联合大学有关保留 、使用学位论文的规定， 即：已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文，学校有权保 留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论 文的全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检 索和交流。 作者及导师同意论文公开及网上交流的时间： □ 自授予学位之日起； □ 自 年 月 日起。 作者签名： 导师签名： 签字日期： 年 月 日 签字日期： 年 月 日 摘 要 摘 要 目 的 观 察 转 染 ADAM17-shRNA 的 大 鼠 骨 髓 间 充 质 干 细 胞 （ bone marrow mesenchymal stem cell, BMSC）与 MCF-7 乳腺癌细胞混合培养后，对 MCF-7 增殖 能 力 以 及 侵 袭 能 力 的 影 响 。 旨 在 探 究 新 的 ADAM17-shRNA 给 予 方 式 ， 为 以 ADAM17 为靶点的乳腺癌靶向治疗提供新的方法。 方法 设计 4 个针对 ADAM17 以重组慢病毒为载体的 shRNA，将其分别转染入 MCF-7 人乳腺癌细胞中，通过 real-time PCR 检测 mRNA，筛选出对 ADAM17 表 达的干扰率最佳的 shRNA。体外培养 SD 大鼠的 BMSC，用筛选出的 shRNA 转染 BMSC 细胞，将转染后的 BMSC 与 MCF-7 细胞共培养，用 real-time PCR 方法检测 共培养后 ADAM17mRNA 的表达，用 transwell 侵袭实验检测 MCF-7 的侵袭能 力，用 MTT 法检测 MCF-7 的增殖能力。 结果 Realtime PCR 方法筛选出的 shRNA-has-1658 可显著抑制 MCF-7 细胞 ADAM17mRNA 的表达。Realtime PCR 检测共培养后 ADAM17mRNA 的表达，将 对照组的 ADAM17mRNA 相对表达水平设为 100%，转染组的 ADAM17mRNA 的 水平明显低于对照组，转染组与对照组比较，差异有统计学意义。体外侵袭实验显 示对照组和无意义序列组 MCF-7 细胞到达下室的细胞数量明显多于转染组，转染 组与对照组比较，差异具有统计学意义。MTT 实验显示，转染组和对照组相比， 转染组细胞增殖能力明显受到抑制，差异有统计学意义。 结论 转染 ADAM17-shRNA 的 BMSC 对 MCF-7 的 ADAM17mRNA 表达有显著 抑制作用，对 MCF-7 的侵袭和增殖能力也有明显的抑制作用，提示以 BMSC 为载 体的 ADAM17-shRNA 可用于乳腺癌的靶向治疗。 图 9 幅；表 4 个；参 136 篇。 关键词：乳腺癌；骨髓间充质干细胞；RNA 干扰；侵袭；增殖 分类号：R737.9 - I - 河北联合大学硕士学位论文 Abstract Objectives To study the effects on the proliferation and invasion ability of MCF-7 breast cancer, which co-culture with rat bone marrow mesenchymal stem cell transfected with ADAM17-shRNA. To explore new ways to transfer ADAM17-shRNA, for targeted therapy of breast cancer by targeting ADAM17 p