03药物分析方法的设计跟验证.pptVIP

第三章 药物分析方法的设计和验证 * * 第一节 药物分析方法的分类和设计 一、分类 按取样量分 常量分析（0.1~1g或10~100mL） 微量分析 半微量 (10~100mg或1~10mL) 微量 (0.1~10mg或10uL~1mL) 超微量(0.1mg或10uL) 重量分析法 滴定或容量分析法 化学分析法 （mC+nR—CmRn） 仪器分析法 光谱分析 色谱分析 电化学分析 热分析 吸收(UV，IR，AA，NMR) 发射(荧光,火焰) 质谱 旋光 折光 -----LC，GC，TLC，CE -----电位、电流 ----TGA，DTA，DSC 按测定原理与操作方法分 （一）应与被测组分的含量相适应 二、分析方法选择原则 常量组分 容量法 重量法 原料药含量测定 干燥失重、灼炽残渣检查 Rd千分之几 微量组分 仪器分析法 制剂含量 溶出度或均匀度检查 Rd百分之几 实例:配位滴定法测定复方氢氧化铝片中铝、镁 问题：还可选用哪种方法？ （二）应考虑被测组分性质 被测组分性质 测定方法 常用原则： ⑴纯度高样品-----容量分析法 ①酸或碱性------酸碱滴定法 ②氧化性或还原性----氧化还原滴定法 ③金属阳离子-----配位滴定法 ④卤素阴离子----银量法 ⑵复杂样品----色谱法 ①有一定挥发性-----GC ②非挥发性------LC，TLC 1、非水酸量法------------弱酸性药物 2、紫外分光光度法----药物结构中有共轭体系且吸光系数大 3、三氯化铁比色法------药物结构中有酚羟基结构 4、HPLC-UV-----成分较多且相互影响且紫外吸收的药物 5、TLC------------药物中杂质限度检查 苯溴马隆 实例分析 小结：最佳方法------测定的目的与对象 原料药含量测定----非水酸量法 制剂含量或溶出度检查----UV 杂质检查或鉴别----TLC 赋形剂干扰-----LC （三）应与测定的具体要求相适应 1、成品分析或仲裁分析-----------准确度要求高 2、中间体分析或环境分析--------快速简便 3、微量分析或痕量分析-----------灵敏度要求高 （四）应考虑干扰物质的影响 干扰物存在-------选择分离方法（TLC、HPLC） 结论 结构性质 含量 干扰物 现有设备 测定技术 测定要求 （准确度、专属性、灵敏度、时效） 测定成本 合适测定方法 方法选择考虑因素 第二节 药物分析方法的验证 准确度(accuracy) 精密度(precision) （重复性、中间精密度、重现性） 专属性(specificity) 检测限(limit of detection,LOD) 定量限(limit of quantitation,LOQ) 线性(linearity) 范围(quantitation range) 耐用性(ruggedness) 验证内容 一、误差及其分类 （一）绝对误差和相对误差 （二）系统误差和随机误差 1、系统误差 （1）方法误差 （2）仪器和试剂误差 （3）操作误差 2、随机误差-----多次平行测定 解决方法 对照或空白试验 校正仪器 3、测量结果检验-----方差分析 （t检验、G检验、F检验） （一）准确度（Accuracy) 1、定义 表示分析结果与真实值的接近程度。 用绝对误差或相对误差表示. 2、评价方法 加样回收率（相对误差）衡量 一、准确度和精密度 （二）精密度（precision) 1、定义：平行测量的各次测量值（实验值）之间互相接近程度。 2、评价方法 （1）偏差（deviation) （2）平均偏差 （5）相对标准偏差（RSD or CV） （3）相对平均偏差（Relative average deviation) （4）标准偏差（standard deviation) （三）重复性、中间精密度、重现性 （1）重复性 同室同人同仪器对同样品的某物理量重复测定的结果相互接近程度。 （2）中间精密度 同室不同人、不同设备、不同时间对同一样品的某一物理量重复测定结果的精密度。 （3）重现性 不同人不同室不同仪器对同样品的某物理量测定结果的精密度。 三、准确度和精确度的关系 精密度是准确度的保证。测量值的准确度表示测量结果的正确性；测量值的精密度表示测量结果的重现性、重复性。 第三节 药物分析中的有效数字 一、有效数字 （一）定义：分析中，实际能测量到的数字。 根据测定方法和使用仪器的准确程度来确定，只有最后一位欠准，欠准度为±1。 2、有效