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微芯片电泳研究进展及其在离子检测中应用 　　摘 要 微芯片电泳具有检测迅速、易于便携化、消耗试剂少等优点，成为离子检测诸多手段中的热门方法。本文在介绍微芯片电泳原理的基础上，从微芯片电泳的结构、材料、制作工艺、表面改性、实验方法及其在离子检测中的应用等多个方面进行了综述，并对存在的问题以及未来的研究方向进行了总结和展望。 　　关键词 微芯片电泳；离子检测；表面改性；预浓缩；评述 　　1 引 言 　　离子检测在环境监测、土壤养分管理、医疗检测等方面具有重要的作用和意义。测量水体与陆地环境中的养分离子、重金属离子的含量对治理富营养化与重金属污染具有重要意义[1～3]。血液及尿液中某些离子的浓度是衡量身体是否健康的指标之一[4～6]。如何快速、简便地实现离子检测一直是相关的研究热点。传统的离子分析方法一般在实验室条件下进行，存在检测成本高、周期长、功能单一等缺点，在很大程度上阻碍了离子检测技术的普遍应用。多种新的离子检测方法应运而生[7～9]，其中微芯片电泳（Microchip electrophoresis， ME）技术以检测迅速、易于便携化、可同时检测多种离子、消耗试剂少等优点脱颖而出。 　　20世纪90年代，Manz等[10]首先提出了微全分析系统的概念，将实验室条件下进行的生物、化学等方面的检测实验压缩到一张芯片上进行，这一概念的提出掀起了微芯片电泳的研究热潮。2001年，Guijt等[11]提出了非接触电导检测法，该方法避免了检测电极的腐蚀并降低了分离高压对检测信号的影响，进而延长了检测电极的使用寿命，提高了检测精度，它的提出是微芯片电泳技术的另一个里程碑。 　　如图1A所示，一个微芯片电泳系统主要由微芯片、分离高压、信号发生与采集模块以及信号后处理模块构成。图1A和1B是传统微芯片电泳的进样与分离示意图，首先从微芯片的1端口将缓冲液注入到芯片的所有通道内，缓冲液的作用是缓解高压电场下溶液特性的改变，如pH值、导电性等； 然后从3端口通过电动进样或压力进样的方法注入待测样品液； 开启c信号发生与采集模块，对检测区进行实时检测； 1、2端口施加直流高压，溶液中的离子由于电渗流（Electroosmotic flow， EOF）及电泳的作用[12，13]，会沿着水平通道迁移并分离。图1C是电渗流及电泳作用下的离子运动示意图。按照双电层理论，固液两相接触时，会在靠近固体的水溶液中形成双电层，即紧密层与扩散层，所谓电渗流是指在电场作用下扩散层中离子定向移动进而推动整个流体进行块状运动； 而电泳是指带电粒子在电场作用下的定向移动，离子的运动是电渗流与电泳作用下的合运动。不同离子的运动速度是不同的，可以根据离子到达检测电极处的时间判断离子的种类。对于电导检测法而言，检测区设置了检测电极，当溶液中离子流经电极处时，检测到的电导值会发生变化，进而根据电导值的变化量得出离子的浓度[14，15]。 　　本文在介绍原理的基础上，总结了近年来微芯片电泳的研究进展，从结构、材料、制作工艺、表面改性、实验方法及其在离子检测中的应用等多个方面对微芯片电泳进行了综述，讨论了目前存在的问题及未来的发展方向，以期为后续的研究提供参考与借鉴。 　　2 结 构 　　Manz等[10]于1990年提出的微全分析系统由进样、样品传输、样品预处理以及检测等多个环节构成，这一概念的提出为微芯片电泳的发展提供了方向。之后又于1992年提出了微芯片电泳的结构雏形[16]，在玻璃基底上刻蚀出两个相交的通道，分别采用电动进样与电泳分离的方法实现了待测样品的注入与分离。2001年，Guijt等[11]提出了基于非接触电导检测的微芯片结构，在检测电极上覆盖了SiC薄层，避免了检测电极的腐蚀并降低了分离过程中高压对检测信号的干扰。自此，微芯片电泳-电容耦合非接触电导检测（Capacitatively coupled contactless conductivity detection， C4D）的结构以此为原型衍生发展开来。根据通道层与检测电极层的装配关系，可将电泳微芯片的结构分为一体式（Integrated electrodes microchip， IEM）与外部电极式（External electrodes microchip， EEM）。 　　两种典型的电泳微芯片结构如图2所示。图2A是一种电极层与通道层集成一体的微芯片，其通道层与电极层是粘合、不可拆卸的[17]。图2B是一种外部电极式结构的微芯片，其通道层与电极层是独立的，可以根据需要改变检测电极的位置[18]。一体式芯片的加工难度大于外部电极式，对电极层与通道层的材料有特定的粘合要求，但?z测精度高； 外部电极式芯片的通道层与电极层是独立的，使用灵活，然而组装过程中电极与通道存在对准误差，检测精度以