慢性低压低氧对SD大鼠血脂及心肌NO影响.docVIP

慢性低压低氧对SD大鼠血脂及心肌NO影响 　　摘要：目的 探讨慢性低压低氧对SD大鼠血脂、心肌NO的影响及其可能机制。方法 雄性SD大鼠40只随机分为两组：常氧组与低氧组，4w后留取心肌标本及外周血，采用TBA比色法测定血浆丙二醛（MDA）含量，WST-1法测定超氧化物歧化酶（SOD）活力，终点法和直接检测法测定血脂含量，硝酸还原酶法测定心肌NO代谢产物硝酸盐/亚硝酸盐（NOx）水平。结果 与常氧组比较，低氧组大鼠血浆HDL明显降低，MDA含量明显升高，心肌NOx含量明显降低。两组间血压、心率及血浆SOD活力无明显差别。结论 慢性低压低氧可引起大鼠血脂异常，降低心肌NO水平，其机制可能与氧化应激损伤增加有关。 　　关键词：低压低氧；一氧化氮；血脂一氧化氮（nitric oxide, NO）作为细胞信号分子，具有扩张血管、抑制血小板聚集和抑制平滑肌细胞增殖等作用，可调节血管张力、维持血管稳态、调控心肌细胞功能。因而NO是心血管系统重要的保护因子[1]。 　　近年来，西部大开发等因素使暴露于高原低氧环境的人数不断增加，高原低压低氧对机体存在多方面影响，可引起NO含量及血脂异常[3-4]，但目前结果尚不一致。本研究通过分析低压低氧对SD大鼠血脂及心肌NO的影响，探讨其可能机制，为进一步研究奠定基础。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料 　　1.1.1实验动物清洁级雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠40只，6w龄，体重180～200g，由中国药科大学提供，将大鼠随机分为两组（每组20只）：常氧组（南京，海拔10m）及低氧组（模拟海拔5000m，低压氧舱），自由饮食饮水。于实验4w末取材，取外周静脉血置于EDTAK2抗凝管，取心肌标本于-80℃冰箱保存。 　　1.1.2主要仪器和试剂分光光度计（北京元业伯乐科技发展有限公司），低压氧舱室（贵州风雷航空机械有限公司 DYC-3000），冷冻离心机(德国BECKMAN)，高速组织匀浆机(德国Miccra D-8)，一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒（南京建成生物公司），BCA蛋白分析试剂盒(USA Pierce Chemical Company) ，BP2010AUL（北京软隆科技有限责任公司），血脂检测试剂盒（北京利德曼生化股份有限公司）。 　　1.2方法 　　1.2.1血压、心率测定采用BP2010AUL测定大鼠血压及心率变化。 　　1.2.2血脂水平检测采用终点法检测血浆甘油三酯(TG)及总胆固醇（TCH）含量，采用直接测定法检测血浆低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL) 含量。 　　1.2.3血浆SOD活力和MDA含量测定将抗凝血离心（3000 r/min）10 min，分离血浆，用WST-1法测定SOD活力，TBA比色法测定MDA含量。 　　1.2.4心肌硝酸盐/亚硝酸盐（NOx）水平检测采用硝酸还原酶法检测心肌NOx水平，间接反映心肌NO含量。 　　1.2.5统计学处理应用SPSS17.0软件进行数据统计分析。结果用（x±s）表示，两组间比较采用t检验，P0.05为差异具有统计学意义。 　　2结果 　　2.1血压、心率测定用BP2010AUL测定大鼠血压及心率变化，结果显示与常氧组比较，低氧组大鼠收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、平均动脉压（MBP）及心率（HR）无明显变化，见表1。 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　2.2血脂水平检测血脂检测结果显示，低氧组大鼠血浆HDL含量明显低于常氧组。两组间TG、TCH、LDL含量无明显差异，见表2。 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　2.3血浆MDA，SOD水平的测定MDA含量检测结果显示，低氧组大鼠静脉血浆MDA含量明显高于常氧组，差异有统计学意义；两组大鼠血浆SOD活力无明显差异，见表3。 　　2.4心肌NOx水平测定两组大鼠心肌NOx含量检测结果显示，低氧组大鼠心肌NOx含量明显低于常氧组,见表3。 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　3讨论 　　本研究通过检测心肌NOx（间接反映NO）含量及血脂水平，探讨低压低氧对SD大鼠心肌NO和血脂影响及其机制。结果显示，相对于常氧组，低氧组大鼠NOx含量明显降低，血浆HDL水平明显降低，MDA含量明显升高。表明慢性低压低氧引起大鼠心肌NO损伤。 　　低氧组大鼠心肌NOx含量明显低于常氧组，表明慢性重度低氧（于低压氧舱模拟海拔5000m）降低心肌NOx含量。一氧化氮是高原适应与习服重要指标之一，高原世居藏族循环血NO代谢产物明显高于低海拔人群的水平，可增加血流灌注和氧传递，抵消低氧的影响[3]。本研究中慢性重度低压低氧并未