瘀血生风假说检验——活血熄风法干预缺血性中风大鼠的作用机理研究-test of blood stasis and wind generation hypothesis - study on the mechanism of promoting blood circulation and extinguishing wind intervention in ischemic stroke rats.docx

目 录 引言……………………………………………………………………………………1 第一部分 瘀血与中风关系的理论探讨……………………………………………3 一、瘀血是中风发生的关键病因…… …………………………………………… 3 （一）文献学基础……………………………………………………………………3 （二）现代实验研究依据……………………………………………………………5 1．血液流变学方面 …………………………………………………………………5 2．微循环方面 ………………………………………………………………………6 3．纤溶系统与血小板功能方面 ……………………………………………………6 4．血液生化方面 ……………………………………………………………………8 二、活血熄风法是中风的基本治疗法则……………………………………………9 （一）流行病学资料…………………………………………………………………9 （二）临床治疗学基础………………………………………………………………9 （三）药物学基础 …………………………………………………………………10 第二部分 活血熄风法干预缺血性中风大鼠的作用机理研究…………………13 一、实验研究思路 …………………………………………………………………13 二、实验设计方案 …………………………………………………………………13 （一）缺血性中风动物模型的复制 ………………………………………………13 （二）动物分组及给药 ……………………………………………………………14 （三）检测指标及方法 ……………………………………………………………14 1．活血熄风法对缺血性中风大鼠神经行为及组织形态学的影响………………15 2．活血熄风法对缺血性中风大鼠模型炎性因子的影响…………………………16 3．活血熄风法对缺血性中风大鼠血管舒缩状态的影响…………………………16 4．活血熄风法对缺血性中风大鼠自由基代谢及能量代谢障碍的影响…………16 5．活血熄风法对缺血性中风大鼠神经细胞凋亡的影响…………………………16 6．活血熄风法对缺血性中风大鼠凋亡相关蛋白及基因表达的影响……………16 7．活血熄风法对缺血性中风大鼠血管新生的影响………………………………16 （四）统计学处理 ………………………………………………………………… 17 （五）技术路线图 …………………………………………………………………17 实验一 活血熄风法对缺血性中风大鼠症状行为及组织形态学的影响…………19 实验二 活血熄风法对缺血性中风大鼠炎性因子的影响…………………………30 实验三 活血熄风法对缺血性中风大鼠内皮素和一氧化氮含量的影响…………37 实验四 活血熄风法对缺血性中风大鼠自由基代谢及能量代谢障碍的影响……46 实验五 活血熄风法对缺血性中风大鼠神经细胞凋亡的影响 …………………53 实验六 活血熄风法对缺血性中风大鼠脑组织中 Bcl-2、Bax 蛋白表达的影响…61 实验七 活血熄风法对缺血性中风大鼠脑组织中 Caspase-3 蛋白及 mRNA 表达的影 响……………………………………………………………………………………69 实验八 活血熄风法对缺血性中风大鼠脑组织 VEGF mRNA 表达的影响………81 结语 …………………………………………………………………………………91 参考文献 ……………………………………………………………………………93 附录 1 实验附图 …………………………………………………………………103 附录 2 英文缩写 …………………………………………………………………111 附录 3 文献综述 缺血性中风大鼠模型的研究进展 …………………………112 致谢 …………………………………………………………………………………129 查新报告 ……………………………………………………………………………130 在读期间发表论文 …………………………………………………………………140 PAGE PAGE 100 引 言 “内风”，又称“风气内动”，是中医学特有的概念，临床上凡出现动摇、眩晕、 震颤、抽搐等症状者，即可概括为“风气内动”。近年来，随着人口老龄化的发展， “内风”病证的发生率不断增加，因此对其发病机理的研究也不断深入，但没有突破 性进展。在传统中医基础理论中，对“风气内动”的病机大多概括为“肝阳化风”、 “热极生风”、“阴虚生风”、“血虚生风”等，因此治法也就仅限于“平肝熄风法”、 “清热熄风法”、“养阴熄风法”、“养血熄风法”等。然而就目前临床来看，很多内风 病证均同时出现瘀血证的病证特点，在治疗上亦常常使用活血化瘀药物，且每每取得 较好的疗效，而这些新经验、新事实和新的用