沉默notch-1对膀胱癌emt影响的体外分析-effect of silence notch - 1 on emt of bladder cancer in vitro.docxVIP

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2018-09-10 发布于上海
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沉默notch-1对膀胱癌emt影响的体外分析-effect of silence notch - 1 on emt of bladder cancer in vitro.docx

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沉默notch-1对膀胱癌emt影响的体外分析-effect of silence notch - 1 on emt of bladder cancer in vitro

目录目录 IV IV 目录 HYPERLINK \l _bookmark0 第 1 章引言 1 HYPERLINK \l _bookmark1 第 2 章材料与方法 4 HYPERLINK \l _bookmark2 2.1 材料 4 HYPERLINK \l _bookmark3 2.1.1 细胞株来源 4 HYPERLINK \l _bookmark4 2.1.2 主要试剂 4 HYPERLINK \l _bookmark5 2.1.3 主要仪器与设备 5 HYPERLINK \l _bookmark6 2.2 实验方法与步骤 5 HYPERLINK \l _bookmark7 2.2.1 主要试剂的配制 5 HYPERLINK \l _bookmark8 2.2.2 细胞培养 6 HYPERLINK \l _bookmark9 2.2.3 转染细胞 8 HYPERLINK \l _bookmark10 2.2.4 转染 48h 后，qRT-PCR 检测膀胱癌细胞 Notch-1 的 mRNA 表达 ..9 HYPERLINK \l _bookmark11 转染 48h 后，qRT-PCR 检测 E-cadherin、N-cadherin、vimentin 的 HYPERLINK \l _bookmark11 mRNA 表达 11 HYPERLINK \l _bookmark12 转染 48h 后，western blot 检测 E-cadherin、N-cadherin、vimentin、 HYPERLINK \l _bookmark12 Notch-1 的蛋白表达 11 HYPERLINK \l _bookmark13 2.2.7 流式细胞仪检测膀胱癌细胞凋亡情况 13 HYPERLINK \l _bookmark14 2.2.8 Transwell 检测细胞侵袭力的改变 13 HYPERLINK \l _bookmark15 2.3 统计学处理 14 HYPERLINK \l _bookmark16 第 3 章结果 15 HYPERLINK \l _bookmark17 3.1 观察转染后各组 5637 细胞的形态学变化以及细胞转染效率 15 HYPERLINK \l _bookmark18 转染 48h 后，qRT-PCR 检测 Notch-1 的 mRNA 表达 15 HYPERLINK \l _bookmark19 转染 48h 后，qRT-PCR 检测 E-cadherin、N-cadherin、vimentin 的 mRNA HYPERLINK \l _bookmark19 表达变化 16 HYPERLINK \l _bookmark20 转染 48h 后，western blot 检测标记物 E-cadherin、N-cadherin、vimentin、 HYPERLINK \l _bookmark20 Notch-1 蛋白表达变化 18 HYPERLINK \l _bookmark21 3.5 细胞转染 48h 后，流式细胞仪检测细胞凋亡率变化情况 18 HYPERLINK \l _bookmark22 3.6 转染 48h 后，Transwell 检测 5637 细胞侵袭变化情况 19 PAGE PAGE VI HYPERLINK \l _bookmark23 第 4 章讨论 21 HYPERLINK \l _bookmark24 第 5 章结论和展望 23 HYPERLINK \l _bookmark25 5.1 结论 23 HYPERLINK \l _bookmark26 5.2 展望 23 HYPERLINK \l _bookmark27 致谢 24 HYPERLINK \l _bookmark28 参考文献 25 HYPERLINK \l _bookmark29 综述 28 中英文中英文缩略词表中英文缩略词表缩写全称中文名称 shRNA short hairpin RNA 短发卡核糖核酸 RPMI1640 Roswell Park Memorial Institute 1640 RPMI1640 细胞培养基 FBS Fetal bovine serum 胎牛血清 DMSO Diphenylamine 二甲基亚砜 PBS Phosphate buffer saline 磷酸盐缓冲液 Rpm revolutions per minute 每分钟转速 Lipo2000 lipofectamineTM2000 脂质体 2000 MEM minimum essential me