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抵当汤对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力影响 　　[摘要] 目的 观察抵当汤对阿尔茨海默病（AD）大鼠学习记忆能力的影响。 方法 将40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、安理申组和抵当汤组。采用右侧海马一次性注射聚集态Aβ25-35方法制备AD大鼠模型，造模成功后进行定位航行实验及空间探索实验，之后连续灌胃给药，疗程为8周，用药结束后继续进行Morris水迷宫实验，观察各组大鼠学习记忆能力的改变。 结果 与模型组比较，各给药组大鼠逃避潜伏期明显缩短（P0.05或P0.01），抵当汤组较安理申组缩短更明显（P0.05）。同时药后安理申组和抵当汤组大鼠跨台次数较实验前明显增加（P0.05），与安理申组相比抵当汤组增加更显著（P0.05）。 结论 抵当汤可以改善AD大鼠的学习记忆能力。 　　[关键词] 抵当汤；阿尔茨海默病；学习记忆 　　[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2014）03（b）-0016-03 　　阿尔茨海默病（Alzheimer disease，AD）是一种以进行性认知障碍和记忆力损害为主要临床表现的中枢神经系统退变性疾病，其典型的病理学特征是老年斑（SP）、神经原纤维缠结（NFTs）和神经元丢失[1]。本病发病率高，危害大，目前中国60岁以上人群AD发病率已高达3%～5%[2]，给家庭和社会带来了沉重的负担。由于发病机制尚未完全阐明，本病尚缺乏有效的防治手段，积极寻找疗效确切的治疗药物是目前医务工作者的迫切任务。近年来，受张仲景蓄血证理论的启迪，采用抵当汤治疗阿尔茨海默病取得了理想的临床疗效[3]。但本方治疗阿尔茨海默病的基础研究目前还十分薄弱，疗效机制尚未完全阐明。本研究通过Aβ25-35海马区注射建立AD动物模型并用经方抵当汤进行干预，观察本方对阿尔茨海默病大鼠学习记忆能力的影响，以期为其临床应用提供客观依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 药物与试剂 　　抵当汤组成：桃仁12 g，大黄9 g，水蛭6 g，虻虫6 g。药物由本院药剂科提供，水煎后浓缩制成每毫升煎液含生药3 g，高温消毒灭菌，置于4℃冰箱保存备用。多奈哌齐[安理申，卫材（中国）药业有限公司，批号130536A]。Aβ25-35购于Sigma公司。 　　1.2 仪器 　　脑立体定向仪（江湾1号C型，上海川沙花木农机厂）；Morris水迷宫（淮北正华生物仪器设备有限公司）。 　　1.3 动物 　　雄性Wistar大鼠40只，清洁级，鼠龄8～12周，体质量200～250 g，由山东中医药大学实验动物中心提供。 　　1.4 实验方法 　　1.4.1 动物分组及给药 将大鼠40只随机分为假手术组、模型组、安理申组、抵当汤组，每组10只。治疗药物及对照药物均根据临床用药情况，按成人（60 kg）日用药量的10倍量折算成大鼠使用剂量。造模成功后第2天开始连续灌胃给药，1次/d。假手术组及模型组用等量生理盐水灌胃。疗程为8周。 　　1.4.2 动物模型的建立[4] 用10%水合氯醛腹腔注射（3～3.5 ml/kg）麻醉大鼠。将头部固定在立体定向仪上，剪毛消毒，在头背中部纵向切口，暴露颅骨，参照《大鼠脑立体定位图谱》，选右侧海马为注射区，定位坐标：前囟后3.0 mm，中线右侧2.0 mm，硬膜下2.6 mm。在坐标点周围用牙科钻环行钻开颅骨，并分离暴露硬脑膜，缓慢垂直进针至靶点，然后将1 μl Aβ25-35（10 μg/μl）缓慢注入，注射时间5 min，留针5 min，以保证溶液充分弥散，再缓慢撤针。所有操作均在无菌条件下进行，皮肤切开处给予少许青霉素粉剂，缝合切口。 　　1.4.3 Morris水迷宫实验[5] Morris水迷宫为一恒温圆形水池，直径150 cm，高60 cm，水深35 cm，在水池的上缘等距离地设东、西、南、北4个标记点，以这4个入水点在水面和水桶底部的投影点，将水面和水桶分成4个象限，水温（25±2）℃，实验时保持水池周围参照物、灯光强度不变。①定向航行实验：大鼠术前1周进行Morris水迷宫训练，将平台设置于东北象限，每天将实验动物从东、南、西、北4个入水点分别放入水池中。记录90 s内动物自入水到找到平台后四肢爬上平台时所需要的时间，作为逃避潜伏期。每天训练一次，共训练5 d，第6天进行测试。②空间探索实验：第7天撤走平台进行空间探索实验，任选一个入水点将大鼠面向池壁放入，记录在90 s内大鼠跨越原平台的次数。给药完毕后训练3 d后再进行定位航行实验及空间探索实验。 　　1.5 统计学处理 　　采用SPSS 19.0统计软件进行数据分析，样本均数间比较采用方差分析，以P0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 定位航行