槟榔仁对KM小鼠急性毒性研究.docVIP

槟榔仁对KM小鼠急性毒性研究 　　摘要：为研究口服槟榔（Areca catechu Linnaeus）仁汁液的毒性，进行了小鼠的经口急性毒性试验。根据预试验确定正式试验给药剂量的范围，选用KM小鼠经口灌胃，一次给药，给药后连续观察7 d，记录小白鼠的中毒反应及死亡情况，采用寇氏法计算 LD50及LD50的95%可信限。结果表明，高剂量给药组小白鼠出现中毒反应并死亡，解剖后检查发现主要原因是胃肠和肺部的病变，测得槟榔仁汁液的LD50及LD50的 95%可信限分别为12.425 g/（kg.bw）、10.610～14.551 g/（kg.bw），表明槟榔仁汁液可以被认为是实际无毒物质。槟榔仁原液干物质的LD50及LD50的95%可信限分别为1.349 g/（kg.bw）、1.152～1.580 g/（kg.bw），属于低毒物质。 　　关键词：槟榔（Areca catechu Linnaeus）仁；小鼠；急性毒性；半数致死量 　　中图分类号：R992 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）18-4532-03 　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.18.035 　　槟榔（Areca catechu Linnaeus）又称宾门、仁频、洗瘴丹、国马、大腹子、橄榄子、榔玉、青仔、海南子等，为棕榈科槟榔属的多年生常绿乔木植物。槟榔位居中国四大南药（槟榔、砂仁、益智、巴戟）之首，它味苦、性辛、温，归胃、大肠经，具有杀虫消积、降气、行水、截疟的功效，入药历史悠久，疗效确切，是中医常用的驱虫、消积药物。槟榔全身都是宝，其未成熟的果实（槟榔）、雄花蕾（槟榔花）、果皮（大腹皮）、种子（槟榔仁）均可入药[1，2]。槟榔咀嚼的习俗由来已久[3]，但长期大量嚼食槟榔，除可能罹患口腔疾病、口腔癌外，食用过量会产生中毒症状，如兴奋、眼神呆滞、全身发抖、走路不稳、行为怪异或粗暴、心律不齐和心肌梗死等。2003年世界卫生组织国际癌症研究中心认定槟榔为一级致癌物[1，4，5]。目前，在中国槟榔作为嗜好食品的咀嚼方式有两种，一种是以海南和台湾为代表的槟榔鲜果咀嚼方式，该方式咀嚼的为全槟榔，包含槟榔仁和大腹皮。另一种是以湖南为代表的不含槟榔仁的槟榔干果咀嚼方式，以湖南湘潭为代表的槟榔加工地区把槟榔晒干或烘干后制成槟榔干果，为了防腐，剔除了槟榔仁和采用烟熏工艺的干果加工工艺。但是，嗜好槟榔的海南人和台湾人认为干果槟榔失去了新鲜槟榔的特有口感，所以，尽管湖南加工的槟榔干果比较方便和卫生，但是海南和台湾本土人还是更多地选择咀嚼含有槟榔仁的槟榔鲜果。随着槟榔的食用安全性越来越受到全社会的关注，国内外众多学者对槟榔毒理进行了大量的研究[6-9]。但是针对槟榔仁的毒性状况尚未见报道，为了评价槟榔仁的安全性及更系统地研究其药理作用，特进行了槟榔仁原液对小白鼠经口急性毒性试验，测定其半数致死量（LD50），从而确定该物质的急性毒性强弱。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　1.1.1 试验动物 试验动物采用SPF级KM小白鼠，购自湖南斯莱克景达实验动物有限公司，小鼠生产许可证号：SCXK（湘） 2013-0004。全部动物引入后，置于海南三亚市功能槟榔研究重点实验室动物房养殖，饲养室的室温为（22±3） ℃，相对湿度为60%～70%，12 h光照。以SPF级小鼠专用维持饲料雌雄分笼喂养，自由饮水采食，适应7 d，在小鼠适应的过程中，观察小鼠的综合状况，选取表现正常和大小均匀一致的小鼠待用，体重（20±1） g，雌雄各半，雌性小鼠未产未孕。 　　1.1.2 槟榔果实标准及槟榔仁原液制备 试验所使用的槟榔采摘于海南省三亚市吉阳区农民的槟榔种植园。采收标准为：外形为长椭圆形或椭圆形，果实匀称，茎部带宿萼，剖开果皮内有未成熟瘦长形种子，光泽较好、颜色纯正的适于嚼食的槟榔青果，横向直径3～4 cm，纵向直径5～6 cm。采摘后用保鲜膜包裹，及时运到实验室，放冰箱冷藏待用。 　　取待用新鲜优质槟榔，剖开果皮取槟榔仁，压榨取汁液，放入经消毒后的离心管，以5 000 r/min离心10 min，上清液经0.22 μm除菌过滤膜过滤，滤液即为供试槟榔仁原液，无团聚现象，纯度100%，现用现榨。 　　1.2 试验方法 　　1.2.1 经口急性毒性试验预试验 按照GB15193.2-2014《食品毒理学实验室操作规范》进行试验，选取健康小白鼠60只，雌雄各半，随机分为6个组，每组10只，禁食6 h后按体重比例灌胃给药，给药后禁食1 h。给药方法：将槟榔仁原液用蒸馏水稀释后，按等差数列从小到大配成不同浓度的稀释液，分6个剂量组，每组每个剂量按照剂量大小分为一次性灌胃给药和二次给药，单次灌胃剂量标准为25 g/（k