食品中禁用物质酸性橙染料的检测 高效液相色谱法（国内贸易行业标准征求意见稿）.docVIP

ICS FORMTEXT FORMTEXT FORMTEXT FORMTEXT SB 中华人民共和国 FORMTEXT 国内贸易行业标准 FORMTEXT SB/T FORMTEXT XXXXX— FORMTEXT 2012 FORMTEXT FORMTEXT 肉与肉制品中重金属元素的测定-电感耦 食品中禁用物质酸性橙染料的检测 高效液相色谱法 FORMTEXT Disabled foods of acidic substances orange dye detection HPLC method FORMTEXT FORMDROPDOWN FORMTEXT FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX发布 FORMTEXT XXXX - FORMTEXT XX - FORMTEXT XX实施 FORMTEXT 中华人民共和国商务部发布 SB/T XXXXX—2011 PAGE \* MERGEFORMAT 4 前言 本标准由中华人民共和国商务部提出并归口。 本标准依据GB/T 1.1-2009 标准化工作导则起草。 本标准起草单位：商务部流通产业促进中心。 本标准主要起草人： 本标准由中华人民共和国商务部负责解释。 本标准首次制定。 食品中禁用物质酸性橙染料的检测 高效液相色谱法 范围 本标准规定了蜜饯、肉制品、豆制品及其他食品中酸性橙Ⅰ和酸性橙Ⅱ的高效液相色谱测定方法。本标准适用于蜜饯、肉制品、豆制品及其他食品的测定。 本方法的最低检测限(mg/kg)分别为：酸性橙Ⅰ:1.0mg/kg；酸性橙Ⅱ:1.0mg/kg。 规范性引用文件 下列文件中的条款通过GB/T 9959的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。 GB/T 5750.6-2006 生活饮用水标准检验方法 方法原理 试样用70%的乙醇水溶液提取，经HLB固相萃取柱净化后，氮气吹干，用高效液相色谱法测定，外标法定量。 试剂与材料 4.1 甲醇：色谱纯。 4.2 乙醇：色谱纯。 4.3 氨水：含量为25％～28％。 4.4 乙酸铵：分析纯。 4.5 HLB固相萃取小柱。 4.6 0.02mol/L乙酸铵：准确称取1.52g乙酸铵溶于1L水中，混匀后备用。 4.7 酸性橙Ⅰ,酸性橙Ⅱ标准品：纯度大于99.0% 。酸性橙Ⅰ标准品分子量(328.34) 4.8 各标准储备液：分别准确称取10mg上述标准品于100 mL 容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，配制成浓度为100ug/mL 的标准储备液，于4℃避光保存。 4.9 混合标准使用溶液：取适量的标准储备溶液，用流动相稀释至相应的浓度。 5. 仪器 5.1分析天平：感量为0.0001 g和0.01 g。 5.2 离心机：转速不低于4000 r/min。 5.3 超声波水浴。 5.4固相萃取装置。 5.6 氮气吹干仪。 5.7 涡旋混合器。 5.8 具塞塑料离心管：50 mL。 5.9高效液相色谱仪（HPLC）：配有二极管阵列检测器（DAD）。 6 分析步骤 6.1 提取 称取均质样品2 g（精确至0.01 g）试样于50 mL具塞塑料离心管中，加入10ml 70%乙醇水提取，40℃超声提取15分钟，4000r/min离心。上清液转移到另一50ml离心管。再次加入10ml 70%乙醇水复提。合并提取液。取1mL提取液过HLB固相萃取柱。 6.2 净化(HLB固相萃取柱，3cc/60mg) ： 6.2.1 活化及平衡：3mL甲醇、3mL水，保持流速2滴/s。 6.2.2上样：加入提取液1mL。 6.2.3 淋洗：3mL水，弃去淋洗液并将小柱抽干。 6.2.4洗脱：3mL 5%氨化甲醇(v/v)洗脱。 6.2.5浓缩：40℃，氮气吹干。 准确加入1ml流动相定容，超声混匀，用于高效液相色谱测定。 6.3 高效液相色谱测定 a)色谱柱：Agilent ZORBAX SB-C18（250 mm×4.6 mm，5μm） b)流动相：A:0.02mol/L乙酸铵 b:甲醇，梯度洗脱见表1。 表1梯度洗脱表 时间/min A/% B/% 0 88 12 8 10 90 10 88 12 15 88 12 c)流速：1mL/min d)柱温：25℃ e)检测器：二极管阵列检测器 f)进样量：20uL 7 结果计算 试样中酸性橙Ⅰ和酸性橙Ⅱ的含量按式（1）进行计算。 EQ …………(1) 样品中酸性橙含量，单位为毫克每千克（mg/k