清热解毒扶正颗粒对ETM大鼠血清IL―1βIL―12及TNF―α含量影响.docVIP

清热解毒扶正颗粒对ETM大鼠血清IL―1βIL―12及TNF―α含量影响 　　摘要：目的 探讨清热解毒扶正颗粒对ETM大鼠血清IL-1β、IL-12及TNF-α含量的影响。方法 90只大鼠随机分为正常组、模型对照组、西药组以及中药低、中、高剂量组，采用腹腔注射脂多糖法（LPS）复制大鼠内毒素血症模型。正常组、模型对照组予生理盐水1ml/100g灌胃，每天1次；西药组给甲基强的松龙1.17mg/100g灌胃，每天1次；中药组给清热解毒扶正颗粒1ml/100g灌胃，每天1次；实验结束后，用ELISA法测定各组血清IL-1β、IL-12、TNF-α的水平。?Y果 与模型组比较，各治疗组均有效降低了血清中IL-1β浓度（P0.05）；中药中、高剂量组能有效降低血清TNF-α浓度（P0.05）。结论 清热解毒扶正颗粒中、高剂量组能有效下调ETM大鼠血清中IL-1β、IL-12等炎性因子的含量，从而在某种程度上达到对内毒素血症的治疗作用。 　　关键词：清热解毒扶正颗粒；内毒素血症；白介素-1β；白介素-12；肿瘤坏死因子-α 　　中图分类号：R285.5 文献标志码：A 文章编号：1007-2349（2017）02-0087-03 　　现代医学认为，内毒素血症（Endotoxeamia，ETM）发生原因是在严重创伤、感染等应激状态下全身的网状内皮系统功能障碍，免疫机能下降，肠腔革兰阴性细菌内毒素从肠道移位进入血液及机体组织，诱导内毒素血症及全身免疫反应的发生，导致机体组织、细胞的损伤，造成机体死亡[1]。其诱导的大量炎性介质失控性释放所致的全身炎性反应综合征（SIRS），以及进一步恶化发展成为的多脏器功能失常综合征（MODS）是严重感染患者走向死亡的主要途径，而该恶性进展的关键启动因子为内毒素及其诱导的失控性大量炎性介质。因此，拮抗内毒素及调控其诱导的失控性大量炎性介质具有重要临床意义。本研究通过腹腔注射脂多糖（lipopo-lysaccharide，LPS）诱导大鼠内毒素血症模型，观察各处理组大鼠血清中白介素-1β（IL-1β）、白介素-12（IL-12）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的浓度水平，旨在了解清热解毒扶正颗粒对大鼠ETM模型中炎性介质的影响，并探讨其部分药效。现报道如下。 　　1 材料 　　1.1 实验动物 选择Wistar大鼠（SCXK{川}2013-24，001643）90只，体重（200±20）g。 　　1.2 实验试剂 LPS（sigma公司，L2630），大鼠（Rat）白介素1β（IL-1β）、白介素12（IL-12）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）ELISA检测试剂盒（Biocalvin，苏州卡尔文生物科技有限公司）。 　　1.3 实验药品 ①清热解毒扶正颗粒：由翼首草，荷叶顶，鱼腥草，柴胡，葛根，太子参，麦冬，丹皮，薏苡仁等14味药组成。以上14味药由云南中医学院第一附属医院中药房鉴定为正品；薏苡仁、葛根、丹皮粉碎成细粉，其余翼首草等11味加水煎煮3次，每次1 h，合并煎液，滤过，浓缩至相应密度为1.30～1.35（500C）的浸膏1份，蔗糖3份，糊精1份，及上述细粉混匀，制成颗粒，干燥既得。1 g相当于原生药1.26 g。相当于15 g/袋含生药18.9 g，1日服生药56.7 g。低剂量组含生药为0.5 g/ml，中剂量组含生药为1 g/mL，高剂量组含生药为2 g/mL。4℃保存；②甲基强的松龙（国药集团容生制药有限公司，40 mg，国药准字。 　　1.4 主要实验仪器及设备 ①酶标仪（450nm，spectraMax i3x，美国MOLECULAR DEVICES公司）。②恒温箱（3111，美国Thermo公司）。③离心机（1.0R，美国Thermo公司）。④电子天平（YP3000型，上海精科天平厂）。 　　2 方法 　　2.1. 实验动物造模 除正常组外，其余大鼠根据文献[1]采用腹腔注射脂多糖（LPS）致大鼠内毒素血症模型。具体操作方法是先每日测量大鼠体温（肛温）2次，连续2 d，取2次体温的平均值记为基础体温。单次体温超过38℃或2次体温差超过0.5℃的动物剔除。实验前6 h禁食不禁水。然后腹腔注射LPS，诱导动物发热，注射LPS后每隔30 min测一次体温，连续测8h。 　　2.2 实验动物分组与处理 90只大鼠进行编号，查随机数字表分为正常组、模型对照组、西药组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组。（1）正常组每日予生理盐水1ml /100g灌胃，每天1次；（2）其余大鼠均腹腔注射脂多糖（LPS）制成大鼠内毒素血症模型，脂多糖用生理盐水配制成10mg/ml溶液，参照文献1造模方法造模成功后分为模型对照组、西药组、中药低、中