猫耳刺皂苷ilexpernoside C抑制低密度脂蛋白多聚体诱导泡沫细胞形成活性及机制研究.docVIP

猫耳刺皂苷ilexpernoside C抑制低密度脂蛋白多聚体诱导泡沫细胞形成活性及机制研究 　　[摘要]巨噬细胞来源的泡沫细胞在血管壁上的堆积，是动脉粥样硬化的主要成因。该实验构建了低密度脂蛋白多聚体（LDL aggregates）诱导的泡沫细胞模型，对冬青属植物猫耳刺分离的化合物进行体外活性研究，发现ilexpernoside C（IC1）能显著抑制泡沫细胞的形成。通过对泡沫细胞形成相关受体的分析发现，IC1能显著抑制低密度脂蛋白相关受体1（LRP1）的表达。因此，该研究认为皂苷IC1通过抑制巨噬细胞的胞吞作用，从而抑制泡沫细胞的形成，使其可能成为一种抗动脉粥样硬化的潜在药物。 　　[关键词]猫耳刺；ilexpernoside C；泡沫细胞；低密度脂蛋白多聚体 　　[Abstract]The aggregation of macrophage-derived foam cells on vascular wall is considered to be a main cause of atherosclerosis. In the present study， we evaluated the inhibitory effect of the compound ilexpernoside C （IC1） extracted from Ilex pernyi （Aquifoliaceae） on foam cell formation in THP-1 macrophages cells which were induced by low density lipoproteins aggregates （LDL aggregates）. Results showed that IC1 could significantly inhibit the formation of foam cells. The analysis on related receptors of foam cells indicated that IC1 could significantly decrease the expression of low density lipoprotein-related receptor 1（LRP1）. Therefore， these findings indicated that IC1 inhibited the formation of foam cells by inhibiting endocytosis of macrophages， thus it may act as a potential anti-atherosclerotic agent. 　　[Key words]Ilex pernyi； ilexpernoside C； foam cell； aggLDL 　　动脉粥样硬化（As）是一个多因素参与、多基因调控的复杂病理过程，以细胞内胆固醇平衡失调、胆固醇代谢障碍为特征，而泡沫细胞的形成是As的核心环节[1]。胆固醇代谢失衡贯穿于泡沫细胞形成的整个过程。研究表明，巨噬细胞经多种受体介导对修饰低密度脂蛋白（LDL）的无反馈抑制地大量内吞，是导致巨噬细胞、血管平滑肌细胞内胆固醇含量上升，最终形成泡沫细胞的主要原因。因此，阻止脂质在巨噬泡沫细胞中的积累能够起到潜在的抗As作用[2]。 　　猫耳刺Ilex pernyi Franch.系冬青科Aquifoliaceae冬青属植物，其性苦、寒，具清热解毒、润肺止咳的作用[3]。作为同属植物的山绿茶和苦丁茶冬青被报道具有治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病的疗效[4-5]，但猫耳刺及其单体化合物ilexpernoside C（IC1）抗As的作用还未见报道。为了更好地开发利用该药用资源，本实验以低密度脂蛋白多聚体（aggLDL）诱导单核巨噬细胞THP-1脂质沉积为细胞模型，对猫耳刺中单体化合物IC1抑制泡沫细胞形成的活性进行探究，并分析其对胆固醇胞吞和胞吐作用相关基因表达水平的影响，以阐明IC1抗泡沫细胞形成的药效和作用机制，并为猫耳刺的开发与利用提供有力支持。 　　1材料 　　1.1植物原料猫耳刺I. pernyi采自湖北神农架，由北京大学药学院天然药物学系屠鹏飞教授鉴定。凭证标本（MEC0504）存放于北京大学中医药现代研究中心标本室。猫耳刺三萜皂苷ilexpernoside C（IC1）由本实验室制备[6]，结构见图1，纯度95%。 　　1.2细胞人源单核巨噬细胞细胞系THP-1由本室保存。 　　1.3药品与试剂细胞培养皿和培养板（美国Corning公司）；RPMI-1640细胞培养液，0.25%胰酶，标准胎牛血清，丙酮酸钠，1