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碳源和氮源对绣球菌菌丝生长影响 　　采用平板培养方法研究了碳源、氮源对绣球菌（??Sparassis crispa??）菌丝生长的影响，并用二元二次正交回归实验对绣球菌的母种培养基配方进行优化。结果表明，适宜绣球菌菌丝生长的最佳碳氮源为葡萄糖和鱼粉蛋白胨，优化后的母种培养基配方为：马铃薯20%，葡萄糖2.10%，鱼粉蛋白胨0.32%，琼脂2%。 　　绣球菌； 碳源； 氮源； 响应面分析法 　　 　　绣球菌（??Sparassis crispa??），隶属于无（非）褶菌目（Aphyllophorales）、绣球菌科（Sparassidaceae），又名绣球蕈、绣球菇［1,2］，其子实体洁白，菌肉脆嫩，风味独特，营养十分丰富，是一种珍稀食药用真菌。绣球菌子实体干品中氨基酸总量和多糖含量都较高，分别为9.33%和2.6%［3］，另外，其含有的β-葡聚糖能提高人体免疫力及机体造血功能［4,5］，对某些肿瘤有一定的预防和抑制作用［5-8］。绣球菌和灰树花的混合提取物可以治疗癌症和艾滋病［9］，通过深层培养，绣球菌还可产生对某些真菌具有拮抗作用的绣球菌醇（sparassol）［10］。?? 　　近年来，随着绣球菌人工栽培的成功，国内已有学者对绣球菌的营养生理特性进行了报道，但仅限于碳源、氮源的单因素研究。笔者在研究碳源、氮源对绣球菌菌丝生长的基础上探讨了最适碳、氮源的最佳浓度，并对绣球菌的母种培养基配方进行了优化，旨在为绣球菌的进一步开发利用提供参考。?? 　　1 材料与方法 　　1.1材料 　　1.1.1供试菌株 　　绣球菌（??S. crispa??）C菌株由福建省农业科学院食用菌研究所保藏。?? 　　1.1.2培养基 　　碳源试验培养基（%）：在基础培养基(0.3 鱼粉蛋白胨，0.1 KH????2PO????4，0.05 MgSO????4，2 琼脂) 中分别加2%的葡萄糖、半乳糖、木糖、甘露醇、蔗糖、麦芽糖、乳糖、果糖、玉米粉、甲基纤维素。?? 　　氮源试验培养基（%）：在基础培养基（2 葡萄糖，0.1 KH????2PO????4，0.05 MgSO????4，2 琼脂）中分别加入0.3%的硝酸钾、硝酸铵、硫酸铵、碳酸铵、尿素、鱼粉蛋白胨、牛肉蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、麦芽浸粉。?? 　　1.2方法 　　1.2.1不同碳氮源对绣球菌菌丝生长的影响 　　将活化的绣球菌（菌种于PDA培养基上??23 ℃培养20 d）菌块（5 mm）接于不同碳源和氮源平板（9 cm）中于23 ℃培养18 d，用十字交叉法测定菌丝长速，观察菌丝长势，选择最适碳源和氮源。每个处理4次重复。?? 　　1.2.2不同碳氮源浓度对绣球菌菌丝生长的影响 　　将活化的绣球菌菌块（5 mm）分别接种于不同浓度的最适碳源和氮源的培养基中，碳源浓度（??C??）分别为1%、2%、3%、4%、5%和6%，氮源浓度（??N??）分别为0.1%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%和0.6%，其它同1.2.1，计算不同碳、氮源浓度下的菌丝长速（??Y??????C、??Y??????N）。?? 　　1.2.3绣球菌母种培养基优化 　　在以上试验的基础上，对绣球菌母种培养基进行优化，即在马铃薯20%，琼脂2%的基础上添加上述实验得到的最适碳源和氮源，采用二元二次正交回归设计对这两个因素进行最优组合研究，试验因素水平及编码见表1。?? 　　以绣球菌菌丝长速为响应值??Y??，拟合二次多项式方程：?? 　　??Y=b??o+∑2i=1b??iX??i+b????ijX??1X??2+∑2i=1b????iiX??2??i??（1）?? 　　式中：??Y??为菌丝长速的预测值；??b????0??为常数项；??b????i??为一次项系数；??b????ij??为交互项系数；??b????ii??为二次项系数；多项式方程的拟合性质由决定系数R2检验，其统计学上的显著性由??F??值检验。 　　1.3数据分析 　　试验数据采用DPS（Version 7.05）数据处理软件进行曲线拟合及统计分析。?? 　　2 结果与分析 　　2.1不同碳氮源对绣球菌菌丝生长的影响 　　不同碳氮源对绣球菌菌丝生长的影响见表2。在供试的10种碳源中，以麦芽糖为碳源时，绣球菌菌丝长速最快，可达1.42 mm/d，葡萄糖和果糖次之，但三者之间无显著差异（??P ????0.01）；以葡萄糖、半乳糖和玉米粉为碳源时，菌丝浓密、健壮，长势最好，其次为蔗糖；在以果糖、麦芽糖和甘露醇为碳源时，菌丝长势较弱；以木糖、乳糖和甲基纤维素为碳源时，菌丝不生长。因此，绣球菌菌丝生长的最适碳源为葡萄糖。复合氮源中，以牛肉膏、麦芽浸粉、鱼粉蛋白胨为氮源时，菌丝长速最快，三者之