胶体金法与ELISA法检测抗CCP抗体用于诊断RA比较研究.docVIP

胶体金法与ELISA法检测抗CCP抗体用于诊断RA比较研究 　　[摘要] 目的 比较两种检测抗CCP抗体方法的优劣。 方法 用胶体金法与ELISA法对患者血清进行抗CCP抗体检测，两种方法结果不符的以临床明确诊断确认。结果 胶体金法灵敏度85%，特异性为97.5%，假阳性率2.5%，假阴性率为15%；同ELISA法比较得出阳性符合率为98.8%，阴性符合率为98.4%。结论 两种检测方法的灵敏度和特异性无差异，均较高， 　　[关键词] 胶体金；ELISA；抗CCP抗体；类风湿性关节炎 　　[中图分类号] R7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2015）10（a）-0025-03 　　类风湿关节炎（ rheumatoid arthritis， RA） 是常见的自身免疫性疾病，以关节滑膜慢性炎症为主要表现。目前抗环瓜氨酸肽（anti- cyclic citrullinated peptide， 抗CCP）抗体的检测方法为酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunoabsorbent assay ， ELISA） [1]，因其检测试剂对环境及保存条件的限制，在基层医院的检验科和门诊中较难实现该项目的实验检测。胶体金免疫层析法（gold-immunochromatography assay，GICA）因对试剂保存条件与实验室环境要求不高，而且，试剂包装简易，可以单独对一份标本进行试验，其操作简便、快速，结果直观，稳定性好等，应用于抗CCP抗体检测，可快速筛选类风湿性关节炎，使类风湿性关节炎的早期诊断变成现实；满足基层医院、即时检测、床边检测的需求，将拥有巨大的市场潜力和效益[2]。该文以2013年6月―2014年7月收集的200例RA患者为研究对象，对两种诊断产品的临床检测性能进行评估研究，报告如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　收集2013年6月―2014年7月来自鸡西市矿业集团总医院确诊为200例RA患者，所有患者均符合美国风湿病协会1987年修订的RA诊断标准[3]；同时选择来该院进行健康体检的健康人员100例和非RA患者100例作为对照组；两组人员基本情况比较差异无统计学意义（P0.05）。血清标本抽取三组人员晨起空腹静脉血3～5 ml，离心后血清标本储存预 -70℃冰箱中待测。 　　1.2 试剂来源 　　抗CCP抗体检测胶体金法试剂盒由上海科新生物技术股份有限公司提供；抗CCP抗体（ELISA法）试剂盒为欧洲诊断试剂公司生产；仪器：安图96孔酶标仪，25℃恒温箱，科华洗板机。 　　1.3 检测方法 　　分别采用胶体金免疫层析法和间接ELISA法来检测患者血标本中是否含有抗CCP抗体。操作按照各自试剂盒说明书进行，质控品、标准品均作复孔且与标本同时检测。质控品检测结果符合质控要求。抗CCP抗体检测试剂盒（胶体金法）采用高度特异性的抗原抗体反应及免疫层析分析技术，测试时，血清标本滴入加样处，血清标本中的IgG与预包被在聚酯膜上的胶体金标记的二抗结合，结合物随之在毛细效应下横向层析。当血清中含有特异性抗CCP抗体时，泳动到T线时被预先包被在硝酸纤维素膜上的抗原捕获，出现阳性条带，血清中若不含待测抗体时，在T线处继续横向层析至C线，C线为预先包被非特异性抗原，结合物在C线处被捕获，此反应为非抗原特异性的反应，作为对照条带，因此无论血清是否含有特异性的抗CCP抗体均在C线处形成阳性条带。抗CCP抗体胶体金法检测结果参考范围为阴性，ELISA法： 25RU/mL。对于试验研究中测定结果明显不符的样本，将比对方法或其它方法再次重复进行确认试验，同时由临床试验方根据患者的具体相关临床症状和其它用以诊断该疾病的特异性指标报告加以分析，提供不符样本的患者临床相关资料以便对临床研究结果进一步分析，并作记录。 　　1.4 统计方法 　　该研究所有数据均使用SPSS 17.0统计学软件处理分析，应用配对四格表卡方χ2检验，使用Kaapa来检验两种检验方法检测结果的一致性，P0.05表示比较差异有统计学意义 　　2 结果 　　2.1 胶体金法检测抗环瓜氨酸抗体的诊断灵敏度、特异性分析 　　通过对该研究三组人员采用胶体金法检测抗环瓜氨酸抗体诊断的灵敏度及特异性分析得知，200例RA患者诊断的灵敏度为85%，假阴性率为15%；100例健康献血者诊断的特异度为98%，假阳性率为2%；100例非RA患者诊断诊断的特异性为97.0%，假阳性率为3%，健康献血者+非RA患者诊断的特异度为97.5%，假阳性率为2.5%，见表1。 　　表1 胶体金法检测抗CCP抗体用于诊断RA的特异性 　　2.2 胶体金法与ELISA法检测结果比较分析 　　通过对两种方法检测结果汇总统计分析，