葛根素减轻PM25对血管内皮细胞损伤机制研究.docVIP

葛根素减轻PM25对血管内皮细胞损伤机制研究 　　[摘要] 探讨PM25对EAhy926型人脐静脉内皮细胞损伤的影响及葛根素的保护作用及机制。采集大气PM25分别以0，20，200，400 mg?L-1染毒EAhy926细胞24 h，MTT法测细胞存活率，流式细胞术测细胞凋亡，Western blot法测pERK1/2，Bax，Bcl2蛋白水平，ELISA法测肿瘤坏死因子α（TNFα）及白细胞介素6（IL6）含量，并测细胞丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）及乳酸脱氢酶（LDH）活性；分别加入葛根素（10，50，100 μmol?L-1）和ERK1/2通路特异性阻滞剂PD98059 20 μmol?L-1检测葛根素的干预作用及机制。检测发现与对照组比较，PM25染毒后呈剂量依赖性降低EAhy926细胞存活率，上调pERK1/2蛋白水平及Bax/Bcl2蛋白比率以促进细胞凋亡，诱导分泌TNFα及IL6含量增高，降低SOD活性，增加MDA含量及LDH活性（P005）；葛根素呈剂量依赖性增加EAhy926细胞的存活率，下调pERK1/2蛋白水平及Bax/Bcl2蛋白比率以抑制细胞凋亡，降低TNFα及IL6含量，增加SOD活性，降低MDA含量及LDH活性（P005）。研究显示葛根素可能通过抑制ERK1/2通路减轻PM25对EAhy926细胞的损伤。 　　[关键词] 大气细颗粒物；葛根素；细胞外信号调节蛋白激酶1/2；血管内皮细胞 　　Puerarin attenuates PM25induced vascular endothelial cells 　　injury via ERK1/2 signaling pathway 　　WAN Qiang1*， YANG Yuping2， LIU Zhongyong1 　　（1. Department of Medical Cardiology， the Affiliated Hospital of Jiangxi University of 　　Traditional Chinese Medicine， Nanchang 330006， China； 　　2. Department of Respiratory Medicine， the Affiliated Hospital of Jiangxi University of 　　Traditional Chinese Medicine， Nanchang 330006， China） 　　[Abstract] To investigate the effect and the mechanism of puerarin in attenuating PM25induced human umbilical vein endothelial cells （EAhy926） injury， the samples of fine particulate matter （PM25） were collected and made into suspension Different concentrations of PM25 （0，20， 200， 400 mg?L-1） were used to contaminate EAhy926 cells for 24 h The cells survival rate was detected by MTT assay； cells apoptosis of EAhy926cells was detected by flow cytometry； the protein levels of pERK1/2， Bax and Bcl2 were detected by Western blot； the contents of tumor necrosis factorα （TNFα）， interleukin6 （IL6）， malonaldehyde （MDA）， and the activities of superoxide dismutase （SOD） and lactic dehydrogenase （LDH） were measured by ELISA Puerarin at different concentrations （10， 50， 100 μmol?L-1） or a specific inhibitor of ERK1/2 pathway PD98059 （20 μmol?L-1） was added into the EAhy926 cells to observe the intervention effect and mechanis