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葛根素对IL―1β损伤大鼠关节软骨细胞一氧化氮及一氧化氮合成酶影响
葛根素对IL―1β损伤大鼠关节软骨细胞一氧化氮及一氧化氮合成酶影响
摘要:目的 观察葛根素(Pue)对IL-1β损伤大鼠关节软骨细胞一氧化氮的影响。 方法 取雌性10日龄大鼠膝关节软骨作体外细胞培养,培养后软骨细胞随机分成正常组、L-1β组、地塞米松组、Pue50组、Pue100组、Pue200组等6组。后5组分别加入IL-1β(5 μg/L)10 μmol、IL-1β(5 μg/L)10 μmol +地塞米松10-9 mol、IL-1β(5 μg/L)10 μmol +Pue50 μmol/L、IL-1β(5 μg/L)10 μmol+ Pue100 μmol/L、IL-1β(5 μg/L)10 μmol+Pue200 μmol/L,使用南京建成生物工程研究所的一氧化氮(NO)试剂盒和一氧化氮合成酶(iNOS)试剂盒检测NO含量和iNOS活性。 结果 6组软骨细胞的NO含量(μmol/L)分别为1.351、12.162、4.054、9.459、6.757、5.405,后4组与IL-1β组比较有明显差异(P0.05),且随着剂量上升(50、100、200 μmol/L),软骨细胞分泌的NO的含量越少。6组软骨细胞的iNOS含量(U/mL)分别为0.535、1.069、0.713、1.069、0.891、0.713,后4组与IL-1β组比较有明显差异(P0.05),且随着剂量上升(50、100、200 μmol/L),iNOS活性越低。 结论 葛根素是一良好的NO清除剂,其通过降低iNOS活性,减少NO生成,以达到保护关节软骨细胞的目的,为防止骨性关节炎提供理论依据。
关键词:葛根素;软骨细胞;IL-1β;iNOS活性;NO含量
中图分类号:R285.5 文献标志码:A 文章编号:1007-2349(2017)02-0083-03
【Abstract】Objective: To observe the effect of puerarin on nitric oxide (NO) of articular chondrocytes in rats with IL-1β-induced injury. Methods: Chondrocytes were isolated from female 10-day-old rats and cultured in vitro. The chondrocytes were randomly divided into a normal group, a L-1β group, a dexamethasone group, a Pue50 group, a Pue100 group and a Pue200 group. The latter five groups were respectively given (5 μg/L) 10 μmol, IL-1 β (5 μg/L) 10 μmol+dexamethasone 10 μmol, IL-1 β (5 μg/L) 10 μmol/L, 10 μmol+Pue 100 μmol/L and 10 μmol+Pue 200 μmol/L of IL-1β (5 μg/L) and NO kit and iNOS kit made by Nanjing Jiancheng Biology Engineering Institute were used to detect NO content and iNOS activity. Results: The NO content (μmol/L) of chondrocytes of the six groups was 1.351, 12.162, 4.054, 9. 459, 6.757 and 5. 405 respectively. There were significant differences between the latter four groups and IL-1β group (P0.05) (50 μmol/L, 100 μmol/L, 200 μmol/L). With the rising of dose(50 μmol/L、100 μmol/L、200 μmol/L), the content of NO produced by chondrocytes decreased. The iNOS content (U/mL) of the six groups of chondrocytes was 0.535, 1.069, 0.713, 1. 069, 0.891and 0.713 respectively. The iNOS c
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