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观察不同时机运用中医补益法协同化疗抗结肠癌有效性以及可能作用机制
观察不同时机运用中医补益法协同化疗抗结肠癌有效性以及可能作用机制
【摘要】目的:探究在不同时机运用中医补益法协同化疗抗结肠癌的临床效果以及其可能的作用机制。方法:对80只裸鼠实施人结肠癌LoVo细胞移植手术,建立裸鼠结肠癌模型。经过8天的培养成瘤后,随机选取移植成功的60只结肠癌裸鼠,并随机分为六个不同的组别:模型组,中药组,化疗组,提前干预组,同步干预组,延后干预组。在16~23天给予中药组补益汤方剂的中药治疗;给予化疗组,提前干预组,同步干预组,延后干预组5-Fu腹内注射的化疗;另外,在8~15天给予提前干预组补益汤方剂的中药治疗,在16~23天给予同步干预组化疗的同时,给予中药治疗,在24~31天给予延后干预组中药治疗;同时给予模型组腹内注射生理盐水。用药结束后,在第32天,选取所有小组的裸鼠各一半,摘除眼球法处死,分理出体内的结肠肿瘤,测量每组裸鼠肿瘤的平???体积,平均体重,肿瘤组织经处理后做免疫组织化学实验,观测其相关凋亡蛋白Bcl-2和Bax的光密度。剩余的裸鼠继续观察其生命体征,记录其平均生存期。结果:肿瘤的平均体积结果显示,除了中药组外,其他组的平均体积都明显小于模型组,而且有提前干预组和延后干预组要明显小于化疗组,p0.05,差异具有统计学意义;肿瘤的平均重量比较显示,除了中药组外,其他组的平均重量都小于模型组,延后干预组要明显小于化疗组;各组的生存期比较显示,除中药组外,其他各组生存期都长于模型组,以延后干预组和提前干预组为最长;对于相关凋亡蛋白光密度的测定,除中药组外,其他组的都与模型组有差别,提前干预组和延后干预组与化疗组和同步干预组的差异明显,p0.05,差异具有统计学意义。结论:在以化疗作为结肠癌的主要治疗手段时,以中医补益法在化疗前后进行协同治疗能够抑制肿瘤发展,延长生存期,其机制可能与中药治疗提高了肿瘤细胞对化疗的敏感性,促进细胞凋亡有关。
【关键词】不同时机;医补益法;化疗;协同;结肠癌
【中图分类号】R730.53 【文献标识码】B【文章编号】1004-4949(2014)06-0015-01
结肠癌是一种发病率很高的疾病,目前其发病人数在不断的增加中,化疗作为其主要的治疗方式,虽然对癌细胞的扩散有抑制作用,但是其因骨髓抑制,消化道反应等给患者带来的巨大痛苦,往往使治疗难以继续,因此,其治疗方式正在向生物治疗,中医药治疗方面转变,中医补益法正以其减少并发症,提高疗效,延长患者生存期的优越性登上国际舞台。本文就不同时机中医补益法协同化疗抗结肠癌的效果和作用机制作出探讨。
1 一般资料和方法
1.1 裸鼠模型的资料:选取实验室喂养的80只健康裸鼠,体重为20~25g,平均体重为22.1±0.4g。裸鼠周龄为4~6周,平均周龄为5.1±0.3周。进行结肠癌LoVo细胞移植后的第8天。随机选取肿瘤成型好,日常状态好的60只裸鼠进行分组实验。
1.2 方法
1.2.1 结肠癌LoVo细胞移植建模方法:结肠癌LoVo细胞系在含有10%胎牛血清的F-12K培养基中培养,至于含5%体积分数的CO2,温度为37℃,湿度达到饱和的培养箱中进行隔天换液传代培养。将处于对数期的结肠癌LoVo细胞以0.25%胰酶消化离心后,用生理盐水稀释为1×107/ml的溶液,用注射器吸取0.2ml于裸鼠的左侧腋下进行接种。
1.2.2 分组实验方法:将60只裸鼠随机分为6个小组:模型组,中药组,化疗组,提前干预组,同步干预组,延后干预组。
模型组给药:移植后的16~23天以0.15ml/10g的生理盐水进行进行腹腔灌注。
中药组给药:中药组给予补益汤方剂,生晒参,生黄芪,茯苓,猪苓30g,女贞子,枸杞子15g,先用10倍于药量的纯化水冷浸1h,再用武火煮沸后改文火煮沸1h,用8层的纱布过滤8次后,收集滤液,将滤渣再加8倍水文火煎半个小时,滤过,合并两次的滤液,浓缩为0.15ml/10g的方剂。在第16~23天,每天以0.15ml/10g的量对裸鼠灌服。
化疗组:第16~23天,以0.25mg/10g的5-Fu生理盐水稀释液对裸鼠实施腹腔灌注。
提前干预组:在8~15天给予裸鼠中药方剂灌注,16~23天给予化疗。
同步干预组:在16~23天同时给予中药方剂治疗和化疗。
延后干预组:16~23天给予化疗后在24~31天给予中药治疗。
1.3 数据统计学方法:本次实验的数据均应用统计学软件SPSS17.0进行处理、分析,计量资料(体重,周龄等)以X±s表示,采用t检验,计数资料用χ2检验,其中p0.05表示差异具有统计学意义。
2 结果
2.1 不同组别平均肿瘤体积的比较:平均体积以肿瘤的平均直径为代表。从表1可以看
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