痹清饮治疗类风湿关节炎的疗效观察及对滑膜细胞的干预作用-中西医结合临床专业论文.docxVIP

IV IV 目 录 引 言 1 临床研究 4 一、病例选择 4 （一）诊断标准 4 （二）病例选择标准 7 二、临床资料 7 （一）病例来源与分组 7 （二）一般资料 8 三、研究方法 11 （一）试验方法 11 （二）观察指标 11 （三）不良反应观察 12 四、疗效判定标准 12 （一） 类风湿关节炎疗效判定标准 12 （二） 中医证候疗效判定标准 12 五、统计学处理 12 六、研究结果 12 （一）疾病总疗效分析 12 （二）中医证候疗效分析 13 （三）临床症状体征疗效分析 14 （四）安全性评估 14 （五）耐受性评估 15 七、讨论 15 （一）历代医家对本病的认识 15 （二）活动期类风湿关节炎病因病机探讨 16 （三）治则治法 22 （四）方药分析 22 （五）疗效机理探讨 23 （六）小结 24 V V 实验研究 25 一、实验材料 25 （一）组织来源 25 （二）实验试剂与仪器 25 二、实验方法 27 （一）标本取材 27 （二）分离滑膜组织和纯化滑膜 FLS 27 （三）培养滑膜 FLS 28 （四）滑膜 FLS 的特性 28 三、实验结果 31 （一）FLS 的特性及药物对 FLS 生长的影响 31 （二）MTT 法检测二种药物对各种 FLS 生长的影响 31 （三）流式细胞仪测定 FLS 的细胞周期及药物对细胞周期的影响 32 （四）RT—PCR 方法检测滑膜 FLS 的 BAX MRNA、BCL-2 MRNA 表达 32 四、讨论 34 （一）RA 的发病机制 34 （二）RA 与关节滑膜细胞 37 （三）痹清饮、白芍总苷对 RA-FLS 的作用 39 （四）小结 40 结 语 41 参考文献 42 综 述 48 附 录 67 致 谢 73 查新报告 74 PAGE PAGE 1 引 言 类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）为一种以对称性多关节炎病变为主 的全身性自身免疫性疾病。主要表现为受累关节疼痛、肿胀，病变呈持续反复发作。 如治疗不当，病情可逐渐加重，骨关节侵蚀破坏最后造成关节强直、畸形、功能丧失 和不同程度的残废。该病变呈持续性，反复发作，对人体损害较大。尤其是活动期， 加重了患者的痛苦，影响着疾病的进展与转归，有效地控制活动期是控制 RA 病情进 展，降低致残率的关键。 RA 的病因尚不清楚，可能与感染因子、遗传倾向和免疫网络失衡有关。当抗原 进入人体后激活辅助性 T 淋巴细胞（helper T cell,Th）, Th 细胞分泌的细胞因子 和各种介质，激活 B 淋巴细胞分化为浆细胞，分泌大量的免疫球蛋白，包括类风湿因 子（rheumatoid factor， RF）和其他抗体，同时诱发炎症反应。上述促炎性细胞因 子、成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes, FLS)的类肿瘤样生长和细 胞凋亡障碍是导致关节内炎性细胞聚集，滑膜细胞增生和向周围组织侵蚀及基质降解 和破坏的主要因素。因此，抑制 FLS 的增生和活化，将有利于控制 RA 的发生和发展。 临床上尚缺乏根本治疗本病的方案以及预防本病的措施，治疗本病的目的主要 是：减轻或消除患者因关节炎引起的关节肿痛、压痛、晨僵或关节外症状；控制疾病 的发展，防止或减少关节骨的破坏，达到较长时间的临床缓解，尽可能保持受累关节 的功能；促进已破坏关节骨的修复，并改善其功能。治疗措施包括：一般治疗，药物 治疗，外科手术治疗，其中以药物治疗极为重要，临床药物治疗主要使用非甾体抗炎 药、免疫抑制剂、肾上腺糖皮质激素等药物。在治疗 RA 的同时常常伴随有一些副作 用的发生，很多患者因为无法耐受药物的副作用和不良反应，而提前中断治疗，这就 使得药物的疗效大大降低，因此选择一种既具有肯定治疗 RA 的作用而又无明显毒副 作用的药物一直是众多学者的研究方向，中医药在这些方面具有一定的优势。因此从 中医学角度探讨活动期 RA 的病因病机，寻求有效的治疗方法，具有重要的现实意义。 多数学者认为动物模型对于研究 RA 的病因及发病机制至关重要，RA 动物模型有 许多与人类 RA 有着相似或相近的特点，是研究 RA 筛选抗炎免疫药物的较理想模型。 然而，所有这些 RA 动物模型都是在一定条件下建立的，并不能完全反映 RA 的所有特 点，只是侧重于某一个或某几个因素而建立起来的。因此，滑膜细胞的体外培养是研 究滑膜正常形态结构和功能，及在其相应关节病中的作用和影响的前提和基础，药物 直接作用于 RA 患者膝关节滑膜细胞更能反映 RA 发病机制。 白芍总苷（Total Glucosides of Paeony ，TG