配对盒基因2和CD44基因在子宫内膜癌中表达及意义.docVIP

配对盒基因2和CD44基因在子宫内膜癌中表达及意义 　　【摘要】目的探讨配对盒基因2（PAX2）和CD44基因在子宫内膜癌组织中的表达及临床意义。 　　方法采用免疫组化法（SP）检测25例正常子宫内膜组织、51例子宫内膜癌组织中PAX2与CD44的表达情况，并结合临床病理特征进行分析。 　　结果PAX2在子宫内膜癌阳性表达显著少于正常子宫内膜组织（P0.05）。 　　结论PAX2和CD44蛋白的异常表达与子宫内膜癌的发生相关，有望成为诊断子宫内膜组织早期癌变的有用指标。 　　【关键词】子宫内膜癌；PAX2；CD44；免疫组化 　　中图分类号：R737.33文献标识码：ADOI：10.3969/j.issn2016.04.006 　　子宫内膜癌是女性生殖系统恶性肿瘤之一，近年来发病率逐年上升，其发生发展与遗传、区域、环境等诸多因素相关。配对盒基因2（Paired box gene2，PAX2）是PAX基因家族的一员，编码核转录因子，目前研究发现，PAX2基因与人类多种肿瘤的发生、发展及预后密切相关。CD44基因是肿瘤干细胞标志物，具有多种功能的活性黏附分子，促进肿瘤细胞的增殖、分化、转移和凋亡。本研究应用免疫组织化学SP法检测人正常子宫内膜和子宫内膜癌中PAX2和CD44表达情况，并分析其与临床病理特征的相关性。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料 　　收集河池市人民医院病理科2014年1月～2015年12月经病理证实的手术切除的子宫内膜癌存档蜡块51例，年龄32～72岁，平均（5051±7.78）岁。根据国际妇产科联合会（International Federation of Gynecology and Obstetrics，FIGO）标准：Ⅰ期36例，Ⅱ期7例，Ⅲ期6例，Ⅳ期2例；病理组织学分级：G1、G2级39例，G3级12例；肌层浸润1/2者26例，≥1/2者25例；有淋巴结转移8例，无淋巴结转移43例。另选取同期因其他良性疾病手术的正常子宫内膜患者25例作为对照组，年龄26～71岁，平均（49.20±11.92）岁。 　　1.2病例入选和排除标准 　　入选标准：经病理科确诊为子宫内膜癌患者。排除标准：术前接受激素治疗或放化疗的子宫内膜癌患者，合并高血压、糖尿病、高血脂及其他器官恶性肿瘤者。 　　1.3研究方法 　　1.3.1所用试剂及检测方法 　　即用型兔抗人PAX2多克隆抗体、即用型鼠抗人CD44单克隆抗体、SP免疫组化试剂盒及DAB显色剂均购自福州迈新试剂生物技术开发公司。采用链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶连结法（SP法）进行染色，所有组织均以4 μm切片进行染色，染色步骤严格按照试剂盒说明进行。用磷酸缓冲液（PBS）代替一抗作阴性对照，用已知阳性切片作阳性对照，PAX2阳性表达定位于细胞核，呈淡黄、棕黄、棕褐色。CD44阳性主要定位于细胞膜。 　　1.3.2结果评定标准 　　采用半定量计分方法，根据染色阳性细胞占肿瘤细胞总数百分比和染色强度相加计分。在显微镜高倍视野下，随机选择5个视野，每个视野计数100个肿瘤细胞，共计数500个细胞。根据阳性染色程度计分：无着色为0分，淡黄色1分，棕黄色2分，棕褐色3分；按阳性细胞所占肿瘤细胞百分比评分：无阳性细胞为0分，阳性细胞75%为4分。两项评分相加3为阴性，≥3为阳性。 　　1.3.3观察项目 　　对比观察PAX2与CD44在正常子宫内膜组和子宫内膜癌组中的阳性表达率，并分析子宫内膜癌组中PAX2与CD44的表达情况与临床病理及二者的相关性。 　　1.4统计学方法 　　数据均采用SPSS 17.0软件进行处理， 计数资料以百分率（%）表示，组间比较采用χ2检验，两者之间相关性分析应用Spearman等级相关分析，检验水准：α=0.05。 　　2结果 　　2.1PAX2、CD44在正常子宫内膜组织和子宫内膜癌中的表达 　　PAX2在正常子宫内膜组织中阳性表达率为80%（20/25），阳性定位于内膜腺上皮细胞核，呈棕黄、棕褐色，同时亦表达于内膜间质细胞和平滑肌细胞的细胞核（图1A）；PAX2在子宫内膜组中阳性表达率为43.1%（22/51），癌细胞核呈淡黄、黄色、棕黄、棕褐色表达（图1B）；PAX2在子宫内膜癌表达显著少于正常子宫内膜，差异有统计学意义（P0.01）。CD44在正常子宫内膜组织中无阳性表达（0/25），在子宫内膜癌中阳性表达率为62.7%（32/51），阳性定位于细胞膜（图1C），与正常子宫内膜差异有统计学意义（P0.01）。见表1。 　　A：增生期正常子宫内膜，PAX2在子宫内膜腺上皮细胞核强阳性表达，SP法；B：高分化子宫内膜腺癌组织，PAX2在肿瘤性腺上皮细胞弱阳性表达，SP法；