长期运动训练对运动性低血色素大鼠组织转铁蛋白及转铁蛋白受体基因表达影响.docVIP

长期运动训练对运动性低血色素大鼠组织转铁蛋白及转铁蛋白受体基因表达影响 　　摘要：了解发生运动性低血色素时转铁蛋白及转铁蛋白受体基因表达的变化对深入研究运动性贫血的发生机制具有重要的意义。实验结果表明：长期运动训练导致运动性低血色素大鼠肌肉组织中转铁蛋白和转铁蛋白受体基因表达均显著增加，表明运动训练造成的运动性低血色素大鼠肌肉中铁代谢紊乱，肌肉应激性使转铁蛋白以及转铁蛋白受体表达增加，以促进肌肉对铁的吸收；运动性低血色素大鼠肝脏组织中转铁蛋白基因表达均显著下降，这可能是由于肝脏铁储量增加而导致的转铁蛋白基因表达的适应性的降低有关；运动训练导致运动性低血色素大鼠转铁蛋白和转铁蛋白受体表达具有组织特异性，转铁蛋白受体基因表达与组织铁代谢关系密切。 　　关键词：运动训练；运动性低血色素；转铁蛋白；转铁蛋白受体；基因表达 　　中图分类号：G804．7 文献标识码：A 文章编号：1007―3612(2006)11―1492―03 　　运动性贫血是运动训练过程中出现的血红蛋白水平、红细胞水平和红细胞比积水平的显著性下降，运动性贫血是竞技体育中容易出现影响运动员身体机能的一种现象，尤其是体能类项目运动员的运动水平影响极大，在竞技体育中血红蛋白水平反映体能类项目运动员的竞技状态。本实验通过建立运动性低血色素大鼠模型观察其出现运动性低血色素时大鼠组织中转铁蛋白和转铁蛋白受体基因表达的变化特点和规律，对深入研究运动性贫血的发生机制具有十分重要的意义，并探寻能够及时、准确反映机体铁缺乏的指标，便于运动训练实践中及时的反映机体的铁代谢状况。 　　 　　1　实验材料与方法 　　 　　1．1实验动物与分组　雄性Wistar大鼠40只，体重(200±15)g，由中国医学科学院实验动物研究所提供，动物许可证编号：SCXK11－00―0006，动物级别：二级。随机、筛选分为2组：对照组(21只)、递增负荷跑台运动组(简称运动组，19只)。动物饲料为全价营养颗粒饲料，由北京科澳协力饲料有限公司提供(京动许字(2000)第15号，含铁量32．1 mg／100g)；动物饲养环境温度(23±2)℃，湿度40％，60％；分笼饲养，每个鼠笼5只，自由饮食，自然昼夜节律变化光照。实验动物分组情况(表1)。 　　 　　1．2运动方式运动组大鼠进行递增负荷跑台训练(BCPT－96型)11周，动物跑台坡度为0°，跑台速度为30m／min，每周训练6d，前两周每天1次进行训练，其余时间为每天早晚各1次，周日休息；前五周运动性贫血模型建立时的训练安排计划为：第1次训练时间为1min，之后2 min／次的加速度进行递增，最后1次的训练时间为97 min；后六周训练安排计划为：每天两次(两次的训练时间相同)，前两周分别为80 min／次和85min／次，之后四周以90min／次为起点、2min／d的加速度进行递增。如果训练过程中大鼠出现严重力竭症状：连续施加机械刺激大鼠不能继续跑动、下跑台后腹部触地严重呈“甲鱼状”，则允许其休息2～5min。跑台训练安排(表2)。 　　 　　1．3取样方法及样品保存　根据分组要求，在最后一次运动后24 h对各组进行取样。以2％戊巴比妥实行腹腔注射麻醉，腹主动脉取血，0．5 mL和3 mL血样肝素抗凝以测定测定血红蛋白(Hb)、红细胞数目(RBC)和红细胞比积(Hct)等指标；取血完毕后迅速取出其它各组织，并在冷生理盐水中洗净血液，滤纸沾干水分，在锡纸上标号迅速包好各组织投入液氮中冷冻，然后放入－80℃低温冰鞋保存待测。 　　1．4测试指标及方法 　　1．4．1血红蛋白及血红细胞参数的测定　取抗凝血测定红细胞参数相关指标。采用日本Sysmex F－820血细胞分析仪进行测定。 　　1．4．2组织总RNA提取后cDNA的合成、PCR扩增和电泳取组织提取总RNA，然后通过合成cDNA，通过PCR扩增；取5ulPCR扩增产物于1％琼脂糖凝胶电泳分析扩增结果，用DNA marker来判断扩增片段的大小(溴化乙锭EB染色)。 　　用分子生物学图像分析软件名为IT3软件分析EB染色情况和灰度比值。 　　 　　转铁蛋白受体的扩增片段大小为509bp。 　　1．5数据统计学处理方法 实验数据采用SPSS10．0统计软件包采用one－way ANOVA检验进行数据分析，实验数据以平均数±标准差表示，显著性水平为P0．05，非常显著性水平为P0．01；同时对各指标之间进行相关性分析。 　　 　　2　结果 　　 　　2．1长期运动训练对大鼠红细胞参数的影响 　　2．2长期运动训练对运动性低血色素大鼠组织转铁蛋白及转铁蛋白受体基因表达的影响　对大鼠组织转铁蛋白和转铁蛋白受体基因表达的研究结果表明(表4)：运动组的转铁蛋白表达显著高