谈如何采用高效液相色谱测定药物中阿莫西林含量.docVIP

谈如何采用高效液相色谱测定药物中阿莫西林含量 　　摘 要：目的：主要探讨了高效液相色谱测定药物中阿莫西林含量的方法与过程。方法：研究者首先构建一个完整的高效液相色谱测定系统，同时做好流速、流动相等控制工作，测定期间，还需要对色谱柱温度进行控制，以此确保结果不会产生严重的偏差。结果：应用高效液相色谱测定阿莫西林含量时效果比较好，提取回收率保持在86.1-98%之间时，阿莫西林浓度保持在0.5-20ml之间时，阿莫西林封面积与浓度保持最佳的线性关系。结论：高效液相色谱可以用来测定药物中阿莫西林含量。 　　关键词：高效液相色谱；阿莫西林；含量 　　阿莫西林是典型的抗生素，具有杀菌性，能够阻碍细菌正常生长。由于阿莫西林效果作用明显，因此医学界一直以来都对其展开了大量的研究。通常情况下都会选择应用高效液相色谱法来测定阿莫西林含量，以此为依据进行进一步的研究。 　　一、材料与方法 　　1、仪器与试剂 　　Agillent1100高效液相色谱仪，包括G1379A脱气机，G1311A四元泵，G1313A自动进样器，G1316A柱温箱，G1315ADAD检测器，A.10.02色谱工作站。阿莫西林标准品，批号K0220703，含量86.8%，中国兽医药品监察所提供。乙腈，色谱纯；其他试剂均为分析纯；超纯水。 　　2、色谱条件色谱柱 　　ZORBAXSBC（4.6mmx150mm，5.0xIm）；流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾一0.1mol/L三乙胺一乙腈（800：120：7），用磷酸调pH至2.5；流速1.0mL/min；柱温30oC；检测波长220nm。 　　3、标准溶液的制备、稀释和含药标准血浆的配制 　　研究者首先要精确称取标准品，溶解与稀释的过程中，都需要使用纯水，同时配置与之浓度相同的储备液。一般而言，研究选择使用的是稀释方法，标准品会稀释成7种浓度不一致的标准体系，为此需要选用7份测定药物，研究者需要将这些药物放入到相应的工作溶液中，以此来划分阿莫西林的不同的含量。 　　4、研究者应该将含有阿莫西林的标准溶液放入到测定的药物中，配置过程中，浓度必须进行达到精确的程度，按照浓度的高、中、低来区分药物样品，此外，研究者还需要将样品根据指定的规范标准来展开测定工作。 　　5、研究者按照指定的配制方法来配制阿莫西林血浆，也需要控制好浓度，另外，研究者应该将等到测量却未知的血浆样品添加蒸馏水，通常要添加100ml，各个浓度不同的血浆管需要另外添加高氯酸溶液，也需要100ml，样品血浆管也是如此。将标准血浆与样品血浆管都放到旋涡震荡器上，每个都要震荡40s，之后再进行高速冷冻离心，时间为15min，每分钟至少要达到15000转。高速冷冻离心之后，再将清液放入到色谱系统中，清液含量为50ml，分析得出阿莫西林峰面面积，并且将其看作是纵坐标，而将阿莫西林浓度看作是横坐标，以此来绘制各类曲线。然后进行线性回归方程的计算。 　　6、研究者在空白血浆中再放入阿莫西林标准溶液，配置成不同浓度的血浆药物样品，浓度等级分为低、中、高，具体浓度分别为0.5、5.0、20ml，制作完成血浆药物样品。 　　二、结果 　　1、阿莫西林的色谱图血浆中阿莫西林与内源性杂质分离好，阿莫西林的保留时间约为12.3min。 　　2、两种浓度的血浆样品的提取回收率为86.1%～98.0%，表明本方法的提取回收率良好，血浆前处理步骤完全能适合血浆中样品的测定。、 　　3、药物中阿莫西林浓度在0.5～20.0mL范围内，峰面积与浓度有良好的线性关系，回归方程为Y=41.912一2.098=0.9997。当S/N=3时，检测限为0.06g/mL。低、中、高三种浓度的药物样品的平均加样回收率分别为100.7%、105.1%、103.3%；变异系数分别为3.0%、0.1%、3.3%。表明本方法可用于药物中阿莫西林含量的测定。 　　三、讨论 　　阿莫西林人们的日常生活中比较常用，属于抗生素类药物，溶解与水，但是却不溶于乙醇。阿莫西林含量测定，通常情况下都会选择应用高效液相色谱法。测定过程中，需要明确流动相，由于阿莫西林能够溶于水，而且具有比较强的流动性，因此研究者应该添加一定量的乙腈，这样能够提高色谱柱的稳定性，也可以确保测定的最终结果稳定。在添加乙腈时，研究者必须控制好用量，不宜过大，否则阿莫西林出峰时间将会大受影响，此外，样品也会出现大量的杂质，这使得杂质峰与林峰会出现严重的分离情况。为了可能避免这一问题，研究者还需要在样品溶液中，添加一定量的三乙胺，这样就能够确保出峰完整，降低测定结果误差。另外，研究者测定过程中，还需要控制流动相，以此确保流动相PH值保持在指定的范围之内，进而使得流动相能够进行分离，更加明确的区分阿莫西林主峰，使得主峰停留超