麦角甾醇研究进展.docVIP

麦角甾醇研究进展 　　摘要:自从1889年Tanret从燕麦麦角菌中分离到麦角甾醇以来,人们开始对麦角甾醇进行了大量的研究。麦角甾醇(ergostero1) 又称麦角固醇,大量存在于酵母中,是一种重要的医药化工原料,可用于可的松、黄体酮等药物的生产。麦角甾醇受9到紫外线照射时可转化为维生素D2,是维生素D2的前身,也是生产甾体激素药物的重要原料。本文对近十年来麦角甾醇的研究予以综述,旨在为麦角甾醇的进一步应用奠定基础。 　　关键词:麦角甾醇;生物合成 　　 　　1 生物合成途径 　　 　　1.1麦角甾醇生物合成途径 　　麦角甾醇的生物合成是一个多酶参与的复杂的代谢过程。近年来,人们对真核细胞内麦角甾醇的生物合成做了大量的研究,对其生物合成途径有了比较详细的了解,其合成途径如下: 　　ERG9→鲨烯ERG1→ 环氧鲨烯ERG7→羊毛甾醇ERG11→4,4-二甲基-胆甾-8,14, 24 三烯醇ERG24 →4,4-二甲基酵母甾醇ERG25→酵母甾醇ERG6→粪甾醇ERG2→ 上位甾醇ERG3→ 麦角-5,7,24 (28) 三烯醇ERG5→麦角-5,7,22,24 (28) 四烯醇ERG4→ 麦角甾醇 [1] 　　1.2麦角甾醇生物合成途径有关基因的研究 　　ERG9 :ERG9 编码的蛋白为鲨烯合成酶,催化2分子焦磷酸法呢酯形成麦角甾醇生物合成途径中第一个固醇分子,是麦角甾醇合成的直接前提。有两家实验室克隆到了ERG9[2] ,在两家的研究当中ERG9 的营养缺陷型需补充麦角甾醇和有氧生长条件,用含ERG9 的质粒转化大肠杆菌,导致大肠杆菌内麦角甾醇的合成, ERG9 包含1个开阅框,编码444个氨基酸的蛋白质,蛋白分子量为51700,该基因在人与酵母之间高度保守,位于第Ⅷ染色体上。 　　ERG1:ERG1 编码产物为鲨烯环氧酶,该酶为需氧酶,催化鲨烯转化为2. 3 环氧鲨烯,利用该酶对丙烯胺敏感的特性克隆到了ERG1 基因[3] ,经分析发现,ERG1 基因包含1个开阅框,编码1个496氨基酸的蛋白质,位于第ⅩⅤ染色体上。 　　ERG7 :ERG7 编码的蛋白产物为羊毛甾醇合成酶,先后在热带假丝酵母( C. albicans) 和啤酒酵母(S. cerevisiae) 中克隆到该基因[4], ERG7 包含1个2 196bp 的开阅框,编码732 氨基酸的蛋白质。ERG7 位于达到第Ⅷ染色体上。 　　ERG11 :ERG11 编码产物为羊毛甾醇14α去甲基化酶-细胞色素P450 ,催化羊毛甾醇14α氧化脱甲基作用。Kalb 等从酵母中克隆到该基因[5],它含有单一的开阅框, 编码530 氨基酸的蛋白质,ERG11 被破坏的菌株需补充麦角甾醇及有氧生长条件。目前已经分别从高等植物、真菌、哺乳动物体内克隆出P450 基因并测序分析, 所有的P450 都含有500～600 个氨基酸残基,多序列联配结果表明高等植物、真菌、哺乳动物之间有35 %～42 %的序列同源性,说明P450 是非常保守的,P450还是许多抗真菌剂的作用靶位,对P450 基因及其产物的研究将为抗真菌新药的研发提供理论依据。ERG8 位于达到第Ⅷ染色体上。 　　ERG24 :ERG24 编码的蛋白产物是C-14 还原酶,催化4. 4-二甲基-胆甾-8. 14. 24 三烯醇还原为4. 4-二甲基酵母甾醇。ERG24 包含1个1314bp 的开阅框,编码438 氨基酸的蛋白质,蛋白质分子量为50612[6] 。该基因在染色体上的位置尚未确定。 　　ERG25 :ERG25 编码的蛋白产物为C24 固醇甲基氧化酶,M. Bard 等人首先在啤酒酵母中克隆到了该基因[7] , ERG25 突变体在菌体内积累4. 4-二甲基酵母甾醇, ERG25 对于啤酒酵母生长是必需的。ERG25 包含单一开阅框,编码309 氨基酸的蛋白质,存在于第Ⅶ染色体上。 　　ERG6 :ERG6 编码的产物为C-24 甲基化酶,存在于植物和真菌中,催化酵母甾醇C-24 位甲基化形成28 碳的甾醇结构,C-24 位甲基化对形成正常细胞膜是必需的 , ERG6 突变体对放线菌酮敏感,对制霉菌素具抗性,对ERG6 突变体必需补充色氨酸。ERG6 具单一开阅框,编码383 氨基酸的蛋白质,ERG6 定位在第ⅩⅢ染色体上。 　　ERG2 :ERG2 编码的蛋白为C-8 固醇异构酶,催化粪甾醇转化为上位甾醇,该酶是抗真菌药物吗琳的作用靶位。基因包含单一开阅框,编码222氨基酸的蛋白质。ERG2 定位于第ⅩⅢ染色体上。 　　ERG3 :ERG3 编码的蛋白产物为C-5 脱氢酶,催化上位甾醇还原为麦角-5. 7. 24 ( 28) 三烯醇。ERG3 存在于动物、植物、真菌