黑老虎中倍半萜类化合物分离鉴定及抑制NO生成作用研究.docVIP

黑老虎中倍半萜类化合物分离鉴定及抑制NO生成作用研究 　　[摘要] 目的 分离鉴定黑老虎中倍半萜类化合物，并考察化合物对一氧化氮（NO）释放的抑制作用。 方法 采用丙酮提取，半制备高效液相色谱等方法分离化学成分，波谱方法鉴定化合物的结构；脂多糖（LPS）和γ干扰素（IFN-γ）诱导的单核巨噬细胞RAW264.7作为细胞炎症模型，考察化合物对NO释放的抑制作用。 结果 分离得到了4个倍半萜类化合物，经波谱方法鉴定，分别为匙叶桉油烯醇（1）、（-）-7βH-柳杉二醇（2）、（-）-依兰油醇（3）、（+）-顺-菖蒲烯（4）。化合物1较强抑制LPS/INF-γ诱导NO的产生。 结论 化合物1～4均首次从南五味子属中分离得到，化合物1具有抗炎活性。 　　[关键词] 黑老虎；倍半萜；NO；抑制作用 　　[中图分类号] R927 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2016）04（a）-0027-04 　　Identification of Sesquiterpenes from Kadsura coccinea and reaserch on their Nitric Oxide inhibitory activities 　　SHI Liuliu LI Heran 　　College of Pharmacy， Soochow University， Jiangsu Province， Suzhou 215123， China 　　[Abstract] Objective To study the sesquiterpenes from kadsura coccinea and their nitric oxide （NO） inhibitory activities. Methods Acetone was used to extract， the compounds were isolated by semi-preparative HPLC method， their structures were identified by spectroscopy. The activated RAW 264.7 macrophages induced by LPS and IFN-γ were used to evaluate the inhibitory activities on NO production. Results Four sesquiterpenes were isolated and identified as ent-spathulenol， （-）-7βH-eudesmane-4α， 11-diol， （-）-T-muurolol， （+）-cis-Calamenene. Compound 1 had strong inhibitory activity on NO production. Conclusion Compound 1-4 are obtained from the Kadsura for the first time. Compound 1 has the anti-inflammatory effect. 　　[Key words] Kadsura coccinea； Sesquiterpene； NO； Inhibitory activity 　　黑老虎为五味子科南五味子属植物[Kadsura coccinea（Lem.）A.C.Smith]的根和藤茎，别名冷饭团、绯红南五味子、过山龙腾等。广泛分布于我国湖北、广东、广西、四川、云南、贵州等西南地区。黑老虎为民间草药，主要用于治疗风湿骨痛、跌仆扭伤、妇女痛经、慢性胃炎等症[1]。本课题组对黑老虎进行了化学成分研究，并考察了部分木脂素、三萜等化合物的生物活性[2-5]，为进一步研究黑老虎的抗炎活性成分，本次实验中，从黑老虎的根茎中分离得到4个倍半萜类化合物，并进行了理化鉴定和波谱分析，并且，以脂多糖（LPS）和γ干扰素（IFN-γ）诱导的单核巨噬细胞RAW264.7作为细胞炎症模型，考察化合物对一氧化氮（NO）释放的抑制作用。 　　1 仪器与材料 　　UV-160紫外光谱仪（岛津公司，日本）；IR A2红外光谱仪 （JASCO公司，日本）；DIP-360 旋光光谱仪（JASCO公司，日本）；JEOL-ECA 600 MHz 核磁共振仪（Varian公司，美国，TMS为内标）；JEOL GC 质谱仪（Varian公司，美国）；柱层析硅胶（Wako公司，日本）；薄层色谱（Merck公司，美国）；JASCO PU-2089 高效液相色谱仪（JASCO公司，日本）；高效液相色谱柱（Senshu Scientific公司