HPLC与TLC法对蓝色签字笔墨水分类鉴定研究.docVIP

HPLC与TLC法对蓝色签字笔墨水分类鉴定研究 　　[摘 要] 结合薄层色谱法（TLC）和高效液相色谱法（HPLC），分析市售32种不同厂家、不同品牌以及同一品牌不同规格的蓝色签字笔油墨成分。首先采用正丁醇：无水乙醇：水：冰醋酸=6：2：2：1（体积比）为展开剂，用TLC法对32支不同产地不同牌号蓝色签字笔字痕分析，再以甲醇-NH4HCO3缓冲盐体系为流动相，流速0.8mL/min进行高效液相色谱分析。根据色谱峰个数，可将32种蓝色签字笔分成9类。 　　[关键词] 高效液相色谱； 薄层色谱； 蓝色签字笔； 分类 　　中图分类号：O657 文献标识码： A 文章编号：2095-5200（2015）04-061-04 　　[Abstract] Thin layer chromatography （TLC） and high performance liquid chromatography （HPLC） were employed to analyze the components contained in 32 different blue gel pen inks in this study. The components of 32 blue gel pen inks were analyzed by TLC with developing solvent containing n-butanol： ethanol： water： glacial acetic acid=6： 2： 2： 1. A better separation was archived using HPLC with mobile phases containing ammonium acid carbonate. The two methods are complementary to each other. This analysis of blue gel pen inks was found to be effective and credible. 　　[Key words] High performance liquid chromatography；Thin layer chromatography；Blue gel pen inks；Classification 　　前言 　　签字笔由于具有书写流畅、色彩鲜艳及价廉、环保等特点，逐渐成为人们最常用的笔种之一。在各类刑事、经济案件及民事纠纷中，经常涉及到有关蓝色签字笔字迹检验和鉴定。签字笔墨水主要由溶剂、染料、增稠剂、稳定剂和添加剂等组成。不同厂家或同厂家不同牌号签字笔中成分有所不同，特别是其中的染料组成会有一些差异，这就为签字笔种类鉴别提供依据。目前有关墨水分析的光谱法有红外光谱法[1-2]、拉曼光谱法[3]；色谱法有薄层色谱法[4-5]，高效液相色谱法[6-7]、毛细管电泳[8-9]等；还有用质谱法鉴定墨水中染料的研究[10]。在这些分析方法中，光谱法特别是红外和拉曼光谱法是无损分析，在墨水分类鉴定中发挥很大作用，但是由于墨水成分复杂，这些方法识别率相对较低[11-13]。与无损方法相比，有损和半有损的色谱方法识别率相对较高[14-16]。为此，本文首先用TLC对收集的蓝色签字笔进行分析，根据斑点个数、颜色以及比移值将其分为9类。在此基础上，使用HPLC以NH4HCO3缓冲盐体系为流动相，进行分离、分类。将HPLC与TLC分类结果进行比较，为更准确地区分蓝色签字笔墨水种类提供依据。 　　1 实验部分 　　1.1 仪器和试剂 　　1.1.1 仪器 Waters 600高效液相色谱仪，Waters 2996二极管阵列检测器，Waters 717 Plus自动进样器（Waters公司，美国）；色谱柱为Purospher STAR C18色谱柱（Merck公司，德国），Millipore超纯水器（Millipore公司，美国）；微孔滤膜（0.45μm）。 　　1.1.2 试剂 甲醇、无水乙醇、异丙醇、正丁醇、冰醋酸、乙酸乙酯、丁酮、N，N-二甲基甲酰胺（DMF）等为分析纯。乙腈、甲醇为色谱纯（Merck公司，德国）。 　　1.1.3 样品 由中国、美国、英国、日本、德国以及中国台湾等地生产的32支市售蓝色签字笔。 　　1.2 实验方法 　　1.2.1 实验条件 薄层色谱条件：实验使用德国Merck硅胶GF254层析板。展开剂为正丁醇： 无水乙醇： 水： 冰醋酸=6： 2： 2： 1。 　　HPLC条件：采用甲醇（A）-碳酸氢铵（0.01mol/L）（B）为流动相进行梯度洗脱，A相起始比例为45%，20min内上升至67%，保持该比例至60min；柱温：25 ℃；