短时常规体外受精及补救性卵胞浆内单精子注射胚胎染色体非整倍体分析-妇产科学专业论文.docxVIP

短时常规体外受精及补救性卵胞浆内单精于注射胚 胎染色体非整倍体分析 研究生彭兆锋 导师孙萤瑛 郑州大学第一附属医院生殖医学中心 中国郑州 450052 摘要 在体外受精…胚胎移植( in vitro ferti1ization-embryo trans伽， IVF击丁)周期 中有 10%20%的几率会出现完全的受精失败，其原因 E可能是由于卵母细胞和精 子内在的结构成功能缺陷、精卵结合障碍等而引起，具体到每一个受精失败周 期中是不同而又很难确定的。然而预测用受精失败亦非常困难，国内外也多 有报道认为选择合适的卵子及时补救卵胞浆内单精子注射 (in伽cytoplasmic S严rmi均ection ，ICSI)可获得娃报和分娩。为有效降低周期的取消率，我们尝 试行短时 IVF 结合短时 IVF 补救 ICSI 的受精方式。但这两种技术本身是否会影 响到胚胎染色体非整倍体情况，尚未见相关报道。 目的 本研究拟运用二轮荧光照位杂交( fluorescence in situ hybridization ，FISH) 技术分析常规 IVF、短时IVF 和短时 IVF 后行补救 ICSI 胚胎非整倍体情况，更 为科学的评价短时 IVF 及短时 IVF 后行补救 ICSI 的安全性，为临床提供更有力 的支持依据。 方法 选取 2009 年 7 月2010 年 1 月郑州大学第一附属医院生殖医学中心 314 个 IVF击T 周期、 465 个短时 IVF嗣盯周期和 82 个短时 IVF 后补救 ICSI 周期资料。 经患者知情同意后收集同期各组废弃胚胎。采用丁 ween-20lHCl 消化透明带后吹 打法获得卵裂球， Tween-20lHCl +甲醇/冰醋酸法裂解固定卵裂球，应用荧光杂 交探针 LSI131 LSI21 和 CEP却Y 进行二轮 FISH ，Imstar 荧光分析软件拍摄、记 录、存档后进行分析。 所有数据采用 SPSS11.0 统计软件钮处理，数据采用百分率表示。计数资料 采用 %2 检验。检验标准取 (1=0.05，P0.05 为有显著性差异。 结果 1.统计分析结果 凹顾性分析 314 个 IVF-ET 周期中 4082 枚卵母细胞， 465 个姐时 IVF-ET 周 期中 6030 枚卵母细胞和 82 个短时 IVF 后补救 ICSI 周期中 749 枚卵母细胞受精 情况。短时 IVF 组总受精率、 2PN 受精率都不低于常规 IVF 组，短时 IVF 组优 胚率显著高于常规 IVF 组:短时后补救 ICSI 组总受精率 85.2%显著高于其他两 组 (P0.05); 短时后补救 ICSI 组多 PN 受精率 8.0%显著高于常规 IVF 组 (P0.05)。 2. 卵裂球固定和杂交情况 共收集废弃胚胎 152 只，固定率(固定卵裂球数/获得卵裂球数)为 91.9% (352/383 );出倍号率(出信号卵裂球数/固定卵裂球数)为 96.0% (338/352)。 信号反应 143 只胚胎染色体情况。 3. 卵裂球 FISH 结果 短时 IVF 周期的胚胎中胚胎染色体异常率不高于常规 IVF 周期的胚胎，短 时 IVF 后补救 ICSI 组与常规 IVF 组相比胚胎染色体异常率也无显著增高。各组 中 2PN 胚胎的染色体二体率恒定较高，但也存在非整倍体及嵌合体现象。 lPN 组的胚胎也表现较高的染色体二体率。而 ?:3PN 组中，染色体非裳倚体事为 81.0%，显著商于lPN 细、 2PN 组 (P0.05)。数据中可观察到随年龄增加胚胎 的染色体异常率里增高趋势， 2PN 胚胎?:35 岁组染色体异常率显著高于 30 岁组 和 3034 岁组 (P0.05)。按平均获卵数13 枚为界分组对比染色体异常率差异 无显著性。 11 结论 1.短时 IVF 不降低受精率，不增加胚胎染色体异常几率，是一种安全有效 的受精方式。 2. 短时 IVF 失败后补救 ICSI 可及时挽救受精失败，有效减少周期取消率， 且不增加正常胚胎的染色体异常风险。 3.2PN 胚胎是移植的首选对象。但也存在染色体异常几率。可能为体外受 精娃搬率低下原因之一。 IVF 中 lPN 胚胎染色体具有较高的工体型比率，说明 IVF 中 lPN 胚胎很大可能为正常受精。 3PN 胚胎染色体异常高发，不具有移植 价值。 4. 胚胎染色体异常凡事随年龄增高而增高，尤其是三 35 岁女性，染色体异 常几率明显升高。获卵数目对胚胎染色体异常形成关系不大。 关键词 短时受精补救 ICSI 荧光原位杂交非整倍体植入前遗传 学诊断 Analysis of Chromosomal Aneuploid on Embryos from Sho