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金线莲叶片气孔和光合特性研究 　　摘要：为探讨金线莲的光合特性，以福建、广西、台湾金线莲为试材，观察气孔特征，测定分析叶片光合色素含量和光合参数，结果表明：在自然光下，金线莲光合速率日变化均呈“V”形，中午13：00光合速率最低，在早晚光强较低时有光合积累，光合“午休”现象明显；不同种间金线莲气孔特性、光合特性及光合色素含量存在明显差异，台湾金线莲光合色素含量最高，有效光合时间较长；福建金线莲和广西金线莲的光合特性相似，稍有差异。 　　关键词：金线莲；台湾；福建；广西；叶片；气孔；光合特性 　　中图分类号：文献标志码：A文章编号：1002-1302（2014）11-0210-03 　　我国兰科（Orchidaceae）开唇兰属（AnoectochilusBl.）植物有23种左右，其中，部分种的全草民间作药用，通称金线莲[1-3]，是使用较广的一种传统珍贵药材，多用于治疗糖尿病、高血脂、乙型肝炎等疾病[4]，有“药王”“金草”之称。目前，有人认为金线莲是花叶开唇兰[A.roxburghii（Wall.）Lindl.][1，5]；也有人认为金线莲包括2种，一种是花叶开唇兰，另一种是台湾银线兰（A.formosanusHayata），又名金线莲、台湾金线莲[1，6]；还有人认为，金线莲有3种，即花叶开唇兰、台湾金线莲和高雄金线莲（A.koshunensis）[7]。金线莲野生分布范围广，如花叶开唇兰，主要分布于中国、日本、斯里兰卡、印度和尼泊尔等国，我国主要分布于亚热带地区即台湾、福建、浙江、江西、广东、广西、海南、云南、四川、贵州和西藏等省（区），其中，以台湾、福建、浙江和江西为主产地[8]，野生金线莲对生态环境的要求比较苛刻，加之价值高，人工采挖过度，导致资源濒临灭绝，已被列为国家二级保护植物。金线莲的应用研究兴起于台湾，被认为是台湾最传奇的作物，目前，在福建、广西等地出现对金线莲的研究和种植热，许多企业投入资金建设了规模化组培工厂，开展金线莲的人工种植，关于金线莲的研究多集中在药理和化学成分和组织快繁等方面，尚未见关于光合特性方面的报道。为此，本试验以广泛栽培的花叶开唇兰、台湾银线兰为材料，研究其光合特性，以期为实际生产提供技术依据。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　金线莲试材引自福建、广西、台湾，均为组培苗，经南京农业大学中药材研究所王康才教授鉴定，福建和广西的为花叶开唇兰，台湾的为台湾金线莲。将壮苗生根培养后，移栽到泥炭土∶蛭石∶木屑为2∶1∶1的基质中，于2层遮阳网遮阴的大棚培养50d后再进行试验。 　　1.2仪器 　　Li-6400便携式光合仪，美国Li-COR公司生产；FA1104型分析天平，上海精科天平生产；UV-1100分光光度计；OLYMPUSDP72电子显微镜。 　　1.3方法 　　1.3.1气孔观察2013年10月上旬，于晴天上午分别采摘3张金线莲成熟叶片，撕取下表皮，番红染色，显微镜下观察，随机选取3视野，测定气孔密度、气孔大小、气孔开合度。气孔大小=气孔外横径×气孔外纵径；气孔开度=气孔内横径×气孔内纵径。 　　1.3.2光合色素含量测定采用乙醇浸提法测定[9]。 　　1.3.3光合参数测定（1）光响应曲线测定：2013年10月13日（晴天）09：00―11：00，在大棚中使用便携式光合仪，于开放式气路测定系统，0、20、50、80、100、150、200、400、600、800、1000、1200μmol/（m2?s）光合有效辐射下，测定福建、广西、台湾金线莲的光响应参数。净光合速率（Pn）、蒸腾速率（Tr）、气孔导度（Gs）、胞间CO2浓度（Ci）由仪器直接测得，光补偿点（LCP）、光饱和点（LSP）根据Pn-PAR回归方程得出；表观量子效率（AQY）为0～200μmol/（m2?s）低光强下Pn-PAR直线回归方程的斜率。（2）光合日变化测定：2013年10月14日（晴天）07：00―17：00，每品种取3株，每株取3张叶片，在大棚中使用便携式光合仪，于开放式气路测定系统、自然条件下，每隔2h对标记叶片进行测定，取平均值绘制光合日变化曲线。 　　2结果与分析 　　2.1气孔形态比较 　　福建、广西和台湾金线莲的叶片均为异面叶，气孔仅分布于下表皮；白天和夜间气孔均有不均匀关闭的现象，白天气孔几乎均为关闭状态，仅上午11：00左右有开启；气孔形态无差异，均具不等型和横列型2类气孔[10]，保卫细胞均为肾形，不等型气孔占绝大多数，横列型气孔较少。由表1可见，气孔大小依次为台湾金线莲广西金线莲福建金线莲，气孔密度依次为广西金线莲福建金线莲台湾金线莲，气孔开度依次为福建金线莲台湾金线莲广西金线莲；台湾金线莲的气孔最大，为1537.92μm2，气孔密度最小，为32.14