二甲基甲酰胺降解菌的分离筛选及其降解途径的研究-环境科学与工程专业论文.docx

Classified Index: X703.1 U.D.C: 504 Thesis for the Master Degree of Engineering ISOLATION AND SCREENING OF DIMETHYLFORMAMIDE BIODEGRADING BACTERIA AND STUDY ON IT’S DEGRADATION PATHWAY Candidate: Sun Cuifang Supervisor: Prof. Jin Wenbiao Academic Degree Applied for: Master of Engineering Specialty: Environmental Science and Engineering Affiliation: Shenzhen Graduate School Date of Defence: Decemeber, 2010 Degree-Conferring-Institution: Harbin Institute of Technology 摘 要 N,N-二甲基甲酰胺，简称二甲基甲酰胺（DMF）是一种性能优良的有机溶 剂和精细化工原料，它被广泛应用于各行业中。由于 DMF 对人类和动物具有 较高的毒性，所以随意排放含有 DMF 的工业废水会对环境造成严重危害。目 前在处理 DMF 废水的方法（物化法、化学法、生物法）中，生物法不仅成本 合理，并且最终产物无毒，适合处理大规模含有 DMF 的废水。同时由于 DMF 可生化性较差，且高浓度的 DMF 对微生物的生长具有一定的抑制作用，从而 限制了 DMF 的生物处理效果。由此，需要从环境中分离筛选出能够降解 DMF 的高效菌种，提高废水生物处理技术的有效性。 本研究以 DMF 为唯一碳氮源，对采集的活性污泥进行富集驯化，通过平 板分离和降解性能的测定从中分离筛选出能够降解 DMF 的高效菌种，并从形 态学、生理生化特性以及分子生物学方面对菌种进行鉴定。对分离菌的生长和 降解特性进行深入研究，以探究分离菌在不同环境中生长和降解 DMF 的情况。 通过对菌株利用可能中间产物，以及在降解过程中中间产物的产生情况进行考 察，确定菌株的降解途径。同时，对分离菌株进行紫外诱变，以期获得降解效 果更好的菌株。 本研究主要研究成果如下： (1) 最终分离筛选出两株有效的 DMF 降解菌，经鉴定两株菌均为副球菌属 （Paracoccus sp.）的菌株。在起始 DMF 浓度为 0.5%的培养基中，两株菌在培 养 48h 后，都能够降解 75%~80%的 DMF。 (2) 在一定的 DMF 浓度范围内，适当的降低菌株培养环境的 pH 值，有利 于菌株在培养后期的生长和对 DMF 的降解。两株菌都能够在含有较高 DMF 浓 度（≤5%）的培养基中生长，同时，高浓度的 DMF 对菌株的生长和降解具有 一定的抑制作用。 (3) 菌株 DMF3 和 DMF4 可以较好的利用 DMF、甲基甲酰胺、二甲胺、甲 胺、甲醇、乙醇、甲酸、乙酸进行生长，但是对二甲基乙酰胺、甲酰胺、甲醛、 乙 醛 的 利 用 性 不 佳 。 菌 株 DMF3 的 生 长 动 力 学 常 数 为 μmax=0.22129/h ， Ks=0.4108g/L，Ki=25.92735g/L；所以菌株 DMF3 的动力学方程为： ? ? 0.22129 1 ? 0.4108 ? S S 25.92735 -I- (4) 两株菌的降解途径一致，过程如下： DMF DMFase 二甲胺 二 甲 胺脱 氢 酶 一甲胺 一 甲 胺 脱氢 酶 氨 甲酸 甲醛 甲醛 (5) 通过紫外诱变的方式，获得了两株降解效果更好的菌株，其降解效果分 别比原始菌株提高了 14.8%和 19.4%。 关键词：DMF；污水；生物降解；菌；筛选 Abstract N,N-dimethylformamid (DMF) is widely used as solvent or main chemical raw materials in various industries. DMF have acertain toxicity to humans and animals. So emissions of industrial waste water containing DMF will cause serious harm to the environment.Both at home and abroad, in the treatment methods of wastewater containing DMF (included physico-che